କୀଟନାଶକ ବିଶ୍ୱ ଖାଦ୍ୟ ଅଭାବକୁ ସମାଧାନ କରିବା ଏବଂ ଭେକ୍ଟର-ବାହିତ ମାନବ ରୋଗର ମୁକାବିଲା କରିବାରେ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରେ। ତଥାପି, କୀଟନାଶକ ପ୍ରତିରୋଧର ବର୍ଦ୍ଧିତ ସମସ୍ୟା ପାଇଁ ତୁରନ୍ତ ନୂତନ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକର ଆବିଷ୍କାର ଆବଶ୍ୟକ ଯାହା ଅବ୍ୟବହୃତ ଲକ୍ଷ୍ୟକୁ ଲକ୍ଷ୍ୟ କରେ। କୀଟ କ୍ଷଣସ୍ଥାୟୀ ରିସେପ୍ଟର ପୋଟେନସିଆଲ୍ (TRPV) ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡ଼ିକ - ନାନଜୋଙ୍ଗ (ନାନ) ଏବଂ ନିଷ୍କ୍ରିୟ (Iav) - ହେଟେରୋଲୋଗସ୍ ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡ଼ିକ (ନାନ-Iav) ଗଠନ କରିପାରେ ଏବଂ ମେକାନୋସେନ୍ସରୀ ଅଙ୍ଗଗୁଡ଼ିକୁ ସ୍ଥାନୀୟ କରିପାରେ ଯାହା କୀଟନାଶକଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ ଜିଓଟ୍ରୋପିଜିମ୍, ଶ୍ରବଣ ଏବଂ ପ୍ରୋପ୍ରିଓସେପ୍ସନ ମଧ୍ୟସ୍ଥତା କରେ। କିଛି କୀଟନାଶକ, ଯେପରିକି ଆଫିଡୋପାଇରୋଲିଡୋନ୍ (AP), ଅଜଣା ଯନ୍ତ୍ର ମାଧ୍ୟମରେ ନାନ-Iavକୁ ଟାର୍ଗେଟ କରେ। AP ଭେଦକାରୀ-ଶୋଷକ କୀଟପତଙ୍ଗ (ହେମିପ୍ଟେରାନ୍ସ) ବିରୁଦ୍ଧରେ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ, ଫିଲାମେଣ୍ଟଗୁଡ଼ିକର କାର୍ଯ୍ୟକୁ ବାଧା ଦେଇ ଖାଦ୍ୟକୁ ରୋକିଥାଏ। AP କେବଳ ନାନ ସହିତ ବାନ୍ଧିପାରେ, କିନ୍ତୁ କେବଳ ନାନ-Iav ଆଗୋନିଷ୍ଟମାନଙ୍କ ସହିତ ଯୋଗାଯୋଗ କରିପାରିବ, ଯେଉଁଥିରେ ଏଣ୍ଡୋଜେନସ୍ ନିକୋଟିନାମାଇଡ୍ (NAM) ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ, ଯାହା ଦ୍ୱାରା ଚ୍ୟାନେଲ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରେ। ଏକ କୀଟନାଶକ ଲକ୍ଷ୍ୟ ଭାବରେ ନାନ-Iavର ସମ୍ଭାବନା ସତ୍ତ୍ୱେ, ଏହାର ଚ୍ୟାନେଲ ଆସେମ୍ବଲି, ନିୟାମକ ବନ୍ଧନ ସ୍ଥାନ ଏବଂ Ca2+-ନିର୍ଭରଶୀଳ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ବିଷୟରେ ବହୁତ କମ୍ ଜଣାଶୁଣା, ଯାହା ଆଗକୁ କୀଟନାଶକ ବିକାଶକୁ ବାଧା ଦିଏ। ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ, କାଲମୋଡୁଲିନ୍-ଲିଗାଣ୍ଡ-ମୁକ୍ତ ଅବସ୍ଥାରେ ହେମିପ୍ଟେରା କୀଟପତଙ୍ଗରେ ନାନ୍-ଆଇଏଭ୍ ର ଗଠନ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ପାଇଁ କ୍ରାଇଓ-ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ ଆଙ୍କିରିନ୍ ରିପିଟ୍ ସାଇଟୋପ୍ଲାଜମିକ୍ ଡୋମେନ୍ (ARD) ସୀମାରେ AP ଏବଂ NAM ସହିତ ମଧ୍ୟସ୍ଥତା କରାଯାଇଥିଲା। ଆଶ୍ଚର୍ଯ୍ୟଜନକ ଭାବରେ, ଆମେ ଜାଣିଲୁ ଯେ ନାନ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ନିଜେ ଏକ ପେଣ୍ଟାମର ଗଠନ କରିପାରିବ, ଯାହା AP-ମଧ୍ୟସ୍ଥତା ARD ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଦ୍ୱାରା ସ୍ଥିର ହୋଇଥାଏ। ଏହି ଅଧ୍ୟୟନ କୀଟନାଶକ ଏବଂ ଆଗୋନିଷ୍ଟ ଏବଂ ନାନ୍-ଆଇଏଭ୍ ମଧ୍ୟରେ ଆଣବିକ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ପ୍ରକାଶ କରେ, ଚ୍ୟାନେଲ କାର୍ଯ୍ୟ ଏବଂ ସମାବେଶରେ ARD ର ଗୁରୁତ୍ୱକୁ ଉଜ୍ଜ୍ୱଳ କରିଥାଏ ଏବଂ Ca2+ ନିୟନ୍ତ୍ରଣର ଯନ୍ତ୍ରପାତି ଅନୁସନ୍ଧାନ କରିଥାଏ।
କ୍ରମଶଃ ଗମ୍ଭୀର ବିଶ୍ୱ ଜଳବାୟୁ ପରିବର୍ତ୍ତନର ପୃଷ୍ଠଭୂମିରେ, ଅବନତିଶୀଳ ବିଶ୍ୱ ଖାଦ୍ୟ ସୁରକ୍ଷା ହେଉଛି 21 ଶତାବ୍ଦୀର ପ୍ରମୁଖ ଆହ୍ୱାନ ମଧ୍ୟରୁ ଗୋଟିଏ, ଯାହାର ପରିଣାମ ସମାଜ ପାଇଁ ଭୟଙ୍କର।୧,୨ବିଶ୍ୱ ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ସଂଗଠନର ବିଶ୍ୱରେ ଖାଦ୍ୟ ସୁରକ୍ଷା ଏବଂ ପୁଷ୍ଟିସାର ସ୍ଥିତି 2023 (SOFI) ରିପୋର୍ଟରେ ଆକଳନ କରାଯାଇଛି ଯେ ବିଶ୍ୱରେ ପ୍ରାୟ 2.33 ବିଲିୟନ ଲୋକ ମଧ୍ୟମରୁ ଗୁରୁତର ଖାଦ୍ୟ ସୁରକ୍ଷାରେ ପୀଡିତ, ଯାହା ଏକ ଦୀର୍ଘକାଳୀନ ସମସ୍ୟା।୩,୪ଦୁର୍ଭାଗ୍ୟବଶତଃ, ବାର୍ଷିକ ପ୍ରାୟ 20% ରୁ 30% କିମ୍ବା ତା’ଠାରୁ ଅଧିକ ଫସଲ ଉତ୍ପାଦନ କୀଟପତଙ୍ଗ ଏବଂ ରୋଗଜୀବାଣୁଙ୍କ ଯୋଗୁଁ ନଷ୍ଟ ହୁଏ, ଏବଂ ବିଶ୍ୱ ଉଷ୍ମତା କୀଟପତଙ୍ଗ ପ୍ରତିରୋଧ ଏବଂ ଫସଲ ଦୁର୍ବଳତାକୁ ବୃଦ୍ଧି କରିବ ବୋଲି ଆଶା କରାଯାଉଛି।୪,୫,୬,୭,୮କୀଟନାଶକ ବିକାଶ କେବଳ ଫସଲକୁ କୀଟପତଙ୍ଗଠାରୁ ରକ୍ଷା କରିବା ଏବଂ ଭେକ୍ଟର-ବାହିତ ରୋଗର ପ୍ରସାରକୁ ହ୍ରାସ କରିବା ପାଇଁ ନୁହେଁ, ବରଂ ଡେଙ୍ଗୁ ଜ୍ୱର, ମ୍ୟାଲେରିଆ ଏବଂ ଚାଗାସ୍ ରୋଗ ଭଳି ଭେକ୍ଟର-ବାହିତ ମାନବ ରୋଗର ମୁକାବିଲା କରିବା ପାଇଁ ମଧ୍ୟ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ, ଯାହା କୀଟନାଶକ ପ୍ରତି କ୍ରମାଗତ ଭାବରେ ପ୍ରତିରୋଧୀ ହେଉଛି।୫,୯,୧୦,୧୧
ନ୍ୟୁରୋଟକ୍ସିକ କୀଟନାଶକର ପ୍ରମୁଖ ଲକ୍ଷ୍ୟସ୍ଥଳ ମଧ୍ୟରେ, ହେଟେରୋଟେଟ୍ରାମେରିକ୍ TRPV ଚ୍ୟାନେଲ ନାନଚୁଙ୍ଗ (ନାନ)-ନିଷ୍କ୍ରିୟ (Iav) ଗତ ଦଶନ୍ଧିରେ ଆବିଷ୍କୃତ କୀଟନାଶକ ଲକ୍ଷ୍ୟସ୍ଥଳର ଏକ ଶ୍ରେଣୀକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ, ଯେଉଁଥିରେ ଇମିଡାକ୍ଲୋପ୍ରିଡ୍ ଏବଂ ପାଇରାକ୍ଲୋଷ୍ଟ୍ରୋବିନ୍ ଭଳି ବାଣିଜ୍ୟିକ ଭାବରେ ଉପଲବ୍ଧ କୀଟନାଶକ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ।୧୨,୧୩,୧୪ଅର୍ଦ୍ଧସଂସ୍ଥେତିକ କୀଟନାଶକ ଆଫିଡୋପାଇରୋଲିଫେନ୍ (AP) ହେଉଛି ଏକ ସଦ୍ୟତମ ବିକଶିତ ଏବଂ ବାଣିଜ୍ୟିକ ଉତ୍ପାଦ ଯାହାର ମୁଖ୍ୟ ଉପାଦାନ ହେଉଛି ସକ୍ରିୟ କୀଟନାଶକ ଇନସ୍କାଲିସ୍®, ଯାହା ଏକ ସବନାନୋମୋଲାର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସ୍ତରରେ AP କୁ ବାନ୍ଧିଥାଏ।15AP ପରାଗକ, ଉପକାରୀ କୀଟପତଙ୍ଗ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଅଣ-ଲକ୍ଷ୍ୟ ଜୀବମାନଙ୍କ ପ୍ରତି କମ୍ ତୀବ୍ର ବିଷାକ୍ତତା ପ୍ରଦର୍ଶନ କରେ, ଏବଂ ଲେବଲ୍ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ ବ୍ୟବହାର କଲେ, ଏହା ଅନ୍ୟ କୀଟନାଶକ ପ୍ରତି ପ୍ରତିରୋଧ ଚାପକୁ ହ୍ରାସ କରିପାରିବ।୧୬,୧୭,୧୮ନାନ୍ ଏବଂ ଇଆଭ୍ କୀଟପତଙ୍ଗ ପ୍ରଜାତି ମଧ୍ୟରେ ବ୍ୟାପକ ଭାବରେ ବିତରିତ, କେବଳ ଆଣ୍ଟେନା ଏବଂ ଅଙ୍ଗଗୁଡ଼ିକର କୋର୍ଡାଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରେଚ୍ ରିସେପ୍ଟର ନ୍ୟୁରନ୍ରେ ସହ-ପ୍ରକାଶିତ, ଏବଂ ଶ୍ରବଣ, ଗୁରୁତ୍ୱାକର୍ଷଣ ଅନୁଭବ ଏବଂ ପ୍ରୋପ୍ରିଓସେପ୍ସନ୍ ପାଇଁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ।୧୩,୧୬,୧୯,୨୦,୨୧,୨୨AP, ଇମିଡାକ୍ଲୋପ୍ରିଡ୍, ଏବଂ ପାଇରାକ୍ଲୋଷ୍ଟ୍ରୋବିନ୍ ଏକ ଅନନ୍ୟ ଯନ୍ତ୍ର ମାଧ୍ୟମରେ ନାନ୍-ଆଇଏଭି ଜଟିଳକୁ ଉତ୍ତେଜିତ କରନ୍ତି, ଶେଷରେ ପ୍ରୋପ୍ରିଓସେପ୍ଟିଭ୍ ସିଗନାଲ ଟ୍ରାନ୍ସଡକ୍ସନକୁ ବାଧା ଦିଅନ୍ତି।୧୩,୧୬,୨୩ଭେଦକାରୀ ଶୋଷକ କୀଟପତଙ୍ଗ (ହେମିପ୍ଟେରାନ୍) ଯେପରିକି ଏଫିଡ୍ ଏବଂ ଧଳାମାଛିଙ୍କଠାରେ, ପ୍ରୋପ୍ରିଓସେପ୍ସନର କ୍ଷତି ସେମାନଙ୍କର ଖାଦ୍ୟ କ୍ଷମତାକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରେ, ଯାହା ଶେଷରେ ମୃତ୍ୟୁର କାରଣ ହୁଏ।୧୩,୨୪ଆଶ୍ଚର୍ଯ୍ୟଜନକ ଭାବରେ, AP ନାନ-ଆଇଏଭି ଜଟିଳ ପାଇଁ ଉଚ୍ଚ ଏବଂ କେବଳ ନାନ ପାଇଁ କମ୍ ଆକର୍ଷକତା ପ୍ରଦର୍ଶନ କରେ। AP କୁ ନାନ-ଆଇଏଭି ସହିତ ବାନ୍ଧିବା ଦ୍ଵାରା ଏକ ବୈଦ୍ୟୁତିକ ପ୍ରବାହ ପ୍ରେରିତ ହୁଏ, କିନ୍ତୁ କେବଳ ନାନ ସହିତ ବାନ୍ଧିବା ଦ୍ଵାରା ଚ୍ୟାନେଲ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ଉତ୍ତେଜିତ କରାଯାଏ ନାହିଁ। Iav ନିଜେ AP ସହିତ ଆଦୌ ବାନ୍ଧେ ନାହିଁ।16ଏହା ସୂଚାଇ ଦିଏ ଯେ ନାନ୍ ଏବଂ ଇଆଭ୍ ଭିନ୍ନ ନାନ୍-ଇଆଭ୍ ଚ୍ୟାନେଲ୍ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ ଗଠନ କରିବାକୁ ବାନ୍ଧି ହୋଇପାରନ୍ତି (ଯଥା, ଭିନ୍ନ ଷ୍ଟୋଇକିଓମେଟ୍ରିକ୍ ଅନୁପାତ କିମ୍ବା ସମାନ ଷ୍ଟୋଇକିଓମେଟ୍ରିକ୍ ଅନୁପାତ ମଧ୍ୟରେ ଭିନ୍ନ ବ୍ୟବସ୍ଥା ସହିତ) କିମ୍ବା ଏପି ଏକାଧିକ ସ୍ଥାନରେ ବାନ୍ଧି ହୋଇପାରେ। ଏହା ବ୍ୟତୀତ, ପ୍ରାକୃତିକ ଆଗୋନିଷ୍ଟ ନିକୋଟିନାମାଇଡ୍ (NAM) ମାଇକ୍ରୋମୋଲାର୍ ଆଫିନିଟି ସହିତ ଡ୍ରୋସୋଫିଲା ନାନ୍-ଇଆଭ୍ ସହିତ ବାନ୍ଧି ହୁଏ, ଯାହା ଇନ ଭିଟ୍ରୋରେ ଏଫିଡ୍ସ (AP) ପରି ପ୍ରଭାବ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରେ।୧୬,୨୫ଏବଂ ଏଫଡ୍ ପ୍ରଜନନ ଏବଂ ଖାଦ୍ୟକୁ ବାଧା ଦେଇଥାଏ, ଯାହା ଶେଷରେ ସେମାନଙ୍କ ମୃତ୍ୟୁର କାରଣ ହୋଇଥାଏ୨୫,୨୬। ଏହି ତଥ୍ୟ ଅନେକ ପ୍ରଶ୍ନ ଉଠାଇଥାଏ। ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ନାନ-ଆଇଏଭି ହେଟେରୋଡାଇମର କିପରି ଗଠିତ ହୁଏ, ଛୋଟ ଅଣୁଗୁଡ଼ିକୁ ମଡ୍ୟୁଲେଟ୍ କରିବା ପାଇଁ କେଉଁ ବନ୍ଧନ ସ୍ଥାନଗୁଡ଼ିକ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଏ ଏବଂ ଏହି ଛୋଟ ଅଣୁଗୁଡ଼ିକ ପ୍ରୋପ୍ରିଓସେପ୍ସନକୁ ଦମନ କରି ଚ୍ୟାନେଲ କାର୍ଯ୍ୟକୁ କିପରି ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରନ୍ତି ତାହା ଅସ୍ପଷ୍ଟ ରହିଛି। ଏହା ବ୍ୟତୀତ, ନାନ ନିଜେ ନିଷ୍କ୍ରିୟ ଏବଂ AP ପାଇଁ କମ୍ ଆକର୍ଷିତ ହେବାର କାରଣ, ଯେତେବେଳେ ନାନ-ଆଇଏଭି ହେଟେରୋଡାଇମର ସକ୍ରିୟ ଏବଂ AP କୁ ଅଧିକ ଆକର୍ଷିତ ସହିତ ବାନ୍ଧିଥାଏ, ତାହା ଅସ୍ପଷ୍ଟ ରହିଛି। ଶେଷରେ, ନାନ-ଆଇଏଭି କାର୍ଯ୍ୟର Ca2+-ନିର୍ଭରଶୀଳ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏବଂ ଏହା ନ୍ୟୁରୋନାଲ୍ ସିଗନାଲିଂ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ କିପରି ସଂହତ ହୁଏ ସେ ବିଷୟରେ ବହୁତ କମ୍ ଜଣା ନାହିଁ।୧୩,୨୧
ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ, କ୍ରାଇଓ-ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି, ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫିଜିଓଲୋଜି ଏବଂ ରେଡିଓଲିଗାଣ୍ଡ ବାଇଣ୍ଡିଂ କୌଶଳକୁ ମିଶ୍ରଣ କରି, ଆମେ ନାନ-ଆଇଏଭିର ସମାବେଶ ଏବଂ କ୍ଷୁଦ୍ର ଅଣୁ ନିୟାମକ ସହିତ ଏହାର ବନ୍ଧନର ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ସ୍ପଷ୍ଟ କରିଥିଲୁ। ଏହା ବ୍ୟତୀତ, ଆମେ Iav ଏବଂ AP-ସ୍ଥିର ନାନ ପେଣ୍ଟାମର ସହିତ ସାଂଗଠନିକ ଭାବରେ ବନ୍ଧିତ କାଲମୋଡୁଲିନ୍ (CaM) ଚିହ୍ନଟ କରିଥିଲୁ। ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡ଼ିକ ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡ଼ିକରେ କ୍ୟାଲସିୟମ ଆୟନର ନିୟନ୍ତ୍ରଣ, ଚ୍ୟାନେଲ ଆସେମ୍ବଲି ଏବଂ ଲିଗାଣ୍ଡ ବାଇଣ୍ଡିଂ ଆଫିନିଟି ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରୁଥିବା କାରକଗୁଡ଼ିକ ବିଷୟରେ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଅନ୍ତର୍ଦୃଷ୍ଟି ପ୍ରଦାନ କରେ। ଅଧିକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ କଥା ହେଉଛି, ଆମେ ନିଶ୍ଚିତ କରିଛୁ ଯେ ARD ଏହି ପ୍ରକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକରେ ଏକ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରେ। ପ୍ରାସଙ୍ଗିକ କୃଷି କୀଟନାଶକ ସହିତ ବନ୍ଧିତ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ କୀଟନାଶକ ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡ଼ିକର ଆମର ଅଧ୍ୟୟନ।୨୭, ୨୮, ୨୯ଏହା କୀଟନାଶକ ଶିଳ୍ପର ବିକାଶ ପାଇଁ ସମ୍ଭାବନା ସୃଷ୍ଟି କରେ, କୀଟନାଶକର ପ୍ରଭାବ ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତାରେ ଉନ୍ନତି ଆଣେ, ଏବଂ ବିଶ୍ୱ ଖାଦ୍ୟ ସୁରକ୍ଷା ଏବଂ ଭେକ୍ଟର-ବାହିତ ରୋଗ ପ୍ରସାରକୁ ସମାଧାନ କରିବା ପାଇଁ TRPV-ଲକ୍ଷ୍ୟଯୁକ୍ତ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକୁ ଅନ୍ୟ ପ୍ରଜାତିରେ ପ୍ରୟୋଗ କରିବାକୁ ସକ୍ଷମ କରେ।
ଆମେ ଏହା ମଧ୍ୟ ପାଇଲୁ ଯେ ନାନ-ଆଇଏଭ Ca2+ ଦ୍ୱାରା ନିୟନ୍ତ୍ରିତ, ଏବଂ ନିୟନ୍ତ୍ରଣର ଯନ୍ତ୍ରପାତି ସାଂଗଠନିକ ଭାବରେ ଆବଦ୍ଧ CaM ଦ୍ୱାରା ମଧ୍ୟସ୍ଥତା କରେ। ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭାବରେ, CaM ଦ୍ୱାରା Navର ଏହି Ca2+-ନିର୍ଭରଶୀଳ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଅନ୍ୟ ଆୟନ ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡ଼ିକର ନିୟନ୍ତ୍ରଣର ଯନ୍ତ୍ରପାତି (ଯଥା, ଭୋଲଟେଜ-ଗେଟେଡ Na+ ଚ୍ୟାନେଲ ଏବଂ TRPV5/6 ଚ୍ୟାନେଲ) ଠାରୁ ଯଥେଷ୍ଟ ଭିନ୍ନ।୫୨,୫୩,୫୪,୫୫,୫୬,୫୭। Nav1.2 ଚ୍ୟାନେଲରେ, CaM ର C-ଟର୍ମିନାଲ ଡୋମେନ୍ ହେଲିକାଲି C-ଟର୍ମିନାଲ ଡୋମେନ୍ (CTD) ସହିତ ଜଡିତ ହୁଏ, ଏବଂ Ca2+ ଏହାର N-ଟର୍ମିନାଲ ଡୋମେନ୍ କୁ CTD ର ଦୂରବର୍ତ୍ତୀ ଅଂଶ ସହିତ ବାଇଣ୍ଡିଂ କରାଏ।56। TRPV5/6 ଚ୍ୟାନେଲରେ, CaM ର C-ଟର୍ମିନାଲ ଡୋମେନ୍ CTH ସହିତ ଯୋଡି ହୁଏ, ଏବଂ Ca2+ ଏହାର N-ଟର୍ମିନାଲ ଡୋମେନ୍ ର ଊର୍ଦ୍ଧ୍ୱଗାମୀ ପ୍ରସାରଣକୁ ଛିଦ୍ରରେ ପ୍ରେରଣା ଦିଏ, ଯାହା ଦ୍ଵାରା କ୍ୟାଟେସନ୍ ପାରଗମ୍ୟତାକୁ ଅବରୋଧ କରେ।୫୩,୫୪। ଆମେ ନାନ-ଆଇଭ-ସିଏମ୍ (ଚିତ୍ର 4h) ର Ca2+-ନିୟନ୍ତ୍ରିତ କାର୍ଯ୍ୟ ପାଇଁ ଏକ ମଡେଲ ପ୍ରସ୍ତାବ କରୁଛୁ। ଏହି ମଡେଲରେ, CaM ର N-ଟର୍ମିନାଲ ଡୋମେନ୍ Iav ର C-ଟର୍ମିନାଲ ଡୋମେନ୍ (CTH) ସହିତ ସଂଗଠିତ ହୁଏ। ବିଶ୍ରାମ ଅବସ୍ଥାରେ (କମ୍ [Ca2+] ସାନ୍ଦ୍ରତା), CaM ର C-ଟର୍ମିନାଲ ଡୋମେନ୍ ନାନ ସହିତ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା କରେ, ARD ରୂପାନ୍ତରଣକୁ ସ୍ଥିର କରେ ଏବଂ ଏହାଦ୍ୱାରା ଚ୍ୟାନେଲ ଖୋଲିବାକୁ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କରେ। ଚ୍ୟାନେଲରେ ଏକ ଆଗୋନିଷ୍ଟ/କୀଟନାଶକକୁ ବାନ୍ଧିବା ଦ୍ୱାରା ଛିଦ୍ର ଖୋଲାଯାଏ, ଯାହା Ca2+ ପ୍ରବାହକୁ ନେଇଯାଏ। Ca2+ ତା’ପରେ CaM ସହିତ ବାନ୍ଧି ହୁଏ, ନାନର ARD ରୁ C-ଟର୍ମିନାଲ ଡୋମେନ୍ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ହୁଏ। କାରଣ CaM ବନ୍ଧନକୁ ଅବରୋଧ କରିବା ଦ୍ୱାରା Ca2+ ର ନିରୋଧୀ ପ୍ରଭାବ ମୂଳତଃ ସମାପ୍ତ ହୁଏ, ଏହି ବିଚ୍ଛିନ୍ନତା ARD ଗତିଶୀଳତାକୁ ମଡ୍ୟୁଲେଟ୍ କରେ, ଯାହା ଫଳରେ Ca2+-ନିର୍ଭରଶୀଳ ନିରୋଧ କିମ୍ବା ଡିସେନସିଟିଲାଇଜେସନ୍ ହୁଏ। କ୍ୟାଲସିୟମ ଆୟନ୍ ଇଲୁସନ୍ (ଚିତ୍ର 4g) ପରେ ଚ୍ୟାନେଲ କରେଣ୍ଟର ଦ୍ରୁତ ପୁନରୁଦ୍ଧାର ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ ଏହି ଯନ୍ତ୍ରପାତି Ca2+-ମଧ୍ୟସ୍ଥ ନ୍ୟୁରୋନାଲ୍ ସିଗନାଲଗୁଡ଼ିକର ଦ୍ରୁତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ସହଜ କରିଥାଏ। ଅଧିକନ୍ତୁ, Iavର C-ଟର୍ମିନାଲ ଅଞ୍ଚଳ, ଯାହା ଠିକ୍ ଭାବରେ ବୁଝାପଡ଼ୁନାହିଁ, ଚ୍ୟାନେଲ ଟାର୍ଗେଟିଂ ଏବଂ ବର୍ତ୍ତମାନର ନିୟନ୍ତ୍ରଣରେ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରୁଥିବା ରିପୋର୍ଟ କରାଯାଇଛି।21
ଶେଷରେ, ଆମର ଅଧ୍ୟୟନ କୃଷି ଗୁରୁତ୍ୱର ଏକ କୀଟନାଶକ-କୀଟନାଶକ TRP ଚ୍ୟାନେଲ ଜଟିଳର ଉଚ୍ଚ-ସଂଶୋଧନ ଗଠନ ଉପସ୍ଥାପନ କରେ - ଏକ ଆବିଷ୍କାର ଯାହା ପୂର୍ବରୁ ଆମକୁ ଅଜଣା ଥିଲା। ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଯେ, ଆମେ କୀଟନାଶକ କୋଷ ବଦଳରେ ମାନବ କୋଷ (HEK293S GnTi–) ରେ କୀଟନାଶକ ଚ୍ୟାନେଲର ଗଠନ ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ବର୍ଣ୍ଣିତ କରିଛୁ। ବର୍ଦ୍ଧିତ କୀଟନାଶକ ପ୍ରତିରୋଧ ଏବଂ ଖାଦ୍ୟ ସୁରକ୍ଷା ଏବଂ ରୋଗଜୀବକମାନଙ୍କ ଉପରେ ଚାପ ପଡ଼ିବା ପରିପ୍ରେକ୍ଷୀରେ, ଆମର କାର୍ଯ୍ୟ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ସୂଚନା ପ୍ରଦାନ କରେ ଯାହା ମାନବ ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ଏବଂ ବିଶ୍ୱ ଖାଦ୍ୟ ସୁରକ୍ଷାର ଲାଭ ପାଇଁ ନୂତନ କୀଟନାଶକର ବିକାଶକୁ ସହଜ କରିବ। ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ AP ଭଳି କୀଟନାଶକ ଲେବଲ୍ ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ ଅନୁସାରେ ବ୍ୟବହାର କଲେ କିଛି କୀଟନାଶକ ବିରୁଦ୍ଧରେ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଏବଂ ଲାଭଦାୟକ ପରାଗକମାନଙ୍କ ପ୍ରତି କମ୍ ତୀବ୍ର ବିଷାକ୍ତତା ଥାଏ, ଯାହା ସେମାନଙ୍କର ପରିବେଶଗତ ସୁରକ୍ଷାକୁ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରେ।୧୩,୧୬ଅଧିକନ୍ତୁ, ମଶାଙ୍କ ଉପରେ କିଛି AP ଡେରିଭେଟିଭ୍ସର ପରୀକ୍ଷଣରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ସେମାନେ ଶେଷରେ ଉଡିବାର କ୍ଷମତା ହରାଇବେ। ଏହି ମଡ୍ୟୁଲେଟିଂ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକ ନାନ-ଆଇଏଭି ସହିତ କିପରି ଯୋଡ଼ି ହୁଅନ୍ତି ତାହା ବୁଝିବା ଦ୍ଵାରା ବିଦ୍ୟମାନ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକର ପରିବର୍ତ୍ତନ କିମ୍ବା ନୂତନ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକର ବିକାଶକୁ ଅଧିକ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଏବଂସଠିକକୀଟପତଙ୍ଗ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ। ଆମର ଅଧ୍ୟୟନ ଦର୍ଶାଉଛି ଯେ ନାନ-ଆଇଭ ଏଆରଡି ଇଣ୍ଟରଫେସ୍ କେବଳ ଅନ୍ତର୍ଜାତୀୟ ଯୌଗିକ, କୀଟନାଶକ ଏବଂ Ca2+-CaM ର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ ନୁହେଁ, ବରଂ ଚ୍ୟାନେଲ ଆସେମ୍ବଲି ପାଇଁ ମଧ୍ୟ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ। ଆମେ ପରାମର୍ଶ ଦେଉଛୁ ଯେ ଛୋଟ ଅଣୁ ସହିତ ହେଟେରୋଡାଇମର ଆସେମ୍ବଲିକୁ ବାଧା ଦେବା ଆୟନ ଚ୍ୟାନେଲ ଆସେମ୍ବଲି ବିକାଶ ପାଇଁ ଏକ ଅନନ୍ୟ ଏବଂ ପ୍ରତିଶ୍ରୁତିବଦ୍ଧ ପଦ୍ଧତି ହୋଇପାରେ।
ଆଠଟି ଅର୍ଥୋଲୋଗସ୍ ଜିନ୍ ମଧ୍ୟରୁ, ବ୍ରାଉନ୍ ବିଟଲ୍ (ହାଲିଓମୋର୍ଫା ହାଲିସ୍) ନାନଚୁଙ୍ଗ୍ ଏବଂ ଇନାକ୍ଟିଭ୍ ର ପୂର୍ଣ୍ଣ-ଲମ୍ବ ଜିନ୍ ଚୟନ କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହା ଡିଟରଜେଣ୍ଟରେ ଉତ୍କୃଷ୍ଟ ସ୍ଥିରତା ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିଥିଲା। ସଂଶ୍ଳେଷିତ ଜିନ୍ ଗୁଡ଼ିକୁ ମାନବ ପ୍ରକାଶନ ପାଇଁ କୋଡନ୍-ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ XhoI ଏବଂ EcoRI ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ସ୍ଥଳ ବ୍ୟବହାର କରି pBacMam pCMV-DEST ଭେକ୍ଟର (ଲାଇଫ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି) ରେ କ୍ଲୋନ୍ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହା ନିଶ୍ଚିତ କରିଥିଲା ଯେ କ୍ଲୋନ୍ ଗୁଡ଼ିକ C-ଟର୍ମିନାଲ GFP-FLAG-10xHis ଏବଂ mCherry-FLAG-10xHis ଟ୍ୟାଗ୍ ସହିତ ଫ୍ରେମ୍ ରେ ଥିଲେ, ଯାହା HRC-3C ପ୍ରୋଟେଜ୍ (PPX) ଦ୍ୱାରା କ୍ଲିଭ ହୋଇଛି, ସ୍ୱାଧୀନ ଭାବରେ ବିଭାଜନ କରିବାକୁ ଅନୁମତି ଦେଇଛି।ପ୍ରକାଶନ। pBacMam ଭେକ୍ଟରରେ ନାନଚୁଙ୍ଗ ଏବଂ ଇନାକ୍ଟିଭକୁ କ୍ଲୋନ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ପ୍ରାଇମରଗୁଡ଼ିକ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଥିଲା:
K3 କ୍ୟାମେରା ଏବଂ Gatan BioQuantum ଶକ୍ତି ଫିଲ୍ଟର ସହିତ ସଜ୍ଜିତ ଏକ Titan Krios G2 ଟ୍ରାନ୍ସମିସନ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପିକ୍ ପ୍ରତିଛବିଗୁଡ଼ିକ ପ୍ରାପ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା। ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପଟି 300 keV ରେ ପରିଚାଳିତ ହୋଇଥିଲା, 20 eV ର ଶକ୍ତି ସେଟିଂ, 1.08 Å/ପିକ୍ସେଲର ଏକ ନମୁନା ପିକ୍ସେଲ ଆକାର (81,000x ର ନାମମାତ୍ର ବୃଦ୍ଧି), ଏବଂ -0.8 ରୁ -2.2 μm ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଏକ ଡିଫୋକସ୍ ଗ୍ରାଡିଏଣ୍ଟ ଥିଲା। 25 e–px−1 s−1 ର ନାମମାତ୍ର ଡୋଜ୍ ହାର, 2.4 s ର ଏକ୍ସପୋଜର୍ ସମୟ ଏବଂ ପ୍ରାୟ 60 e–Å−2 ର ମୋଟ ଡୋଜ୍ ସହିତ ଏକ Latitude S ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ (Gatan) ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରତି ସେକେଣ୍ଡରେ 40 ଫ୍ରେମ୍ ରେ ଭିଡିଓ ରେକର୍ଡିଂ କରାଯାଇଥିଲା।
RELION 4.061 ରେ MotionCor2 ବ୍ୟବହାର କରି ଫିଲ୍ମରେ ବିମ୍-ପ୍ରେରିତ ଗତି ସଂଶୋଧନ ଏବଂ ଡୋଜ୍ ଓଜନ କରାଯାଇଥିଲା। ପ୍ୟାଚ୍-ଆଧାରିତ CTF ଆକଳନ ପଦ୍ଧତି 62 ବ୍ୟବହାର କରି cryoSPARC ରେ କଣ୍ଟ୍ରାଷ୍ଟ ଟ୍ରାନ୍ସଫର ଫଙ୍କସନ୍ (CTF) ପାରାମିଟର ଆକଳନ କରାଯାଇଥିଲା। CTF ଫିଟିଂ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ≥4 Å ସହିତ ଫଟୋମାଇକ୍ରୋଗ୍ରାଫ୍ ପରବର୍ତ୍ତୀ ବିଶ୍ଳେଷଣରୁ ବାଦ ଦିଆଯାଇଥିଲା। ସାଧାରଣତଃ, cryoSPARC ରେ ପଏଣ୍ଟ ଚୟନ ପାଇଁ 500-1000 ଫଟୋମାଇକ୍ରୋଗ୍ରାଫ୍ ର ଏକ ସବସେଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା, ତା'ପରେ ଟେମ୍ପଲେଟ୍-ଆଧାରିତ କଣିକା ଚୟନ ପାଇଁ ଏକ ସ୍ପଷ୍ଟ ସନ୍ଦର୍ଭ ପ୍ରତିଛବି ପାଇବା ପାଇଁ ଫିଲ୍ଟରିଂ ପରେ 2D ବର୍ଗୀକରଣର ଅନେକ ପର୍ଯ୍ୟାୟ କରାଯାଇଥିଲା। ତା'ପରେ 64-ପିକ୍ସେଲ୍ ବାଉଣ୍ଡିଂ ବାକ୍ସ ଏବଂ 4-ଫୋଲ୍ଡ ବିନିଂ ବ୍ୟବହାର କରି କଣିକାଗୁଡ଼ିକୁ ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା। ଅନାବଶ୍ୟକ କଣିକା ବର୍ଗଗୁଡ଼ିକୁ ଅପସାରଣ କରିବା ପାଇଁ 2D ବର୍ଗୀକରଣର ଅନେକ ପର୍ଯ୍ୟାୟ କରାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରାରମ୍ଭିକ 3D ମଡେଲ୍ ab initio ପୁନଃନିର୍ମାଣ ବ୍ୟବହାର କରି ପୁନଃନିର୍ମାଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ cryoSPARC ରେ ନନୟୁନିଫର୍ମ ରିଫାଇନିମେଣ୍ଟ ବ୍ୟବହାର କରି ପରିଷ୍କୃତ କରାଯାଇଥିଲା। ARD ବିଷମତା ଉପରେ ଆଧାରିତ cryoSPARC କିମ୍ବା RELION ରେ 3D ବର୍ଗୀକରଣ କରାଯାଇଥିଲା। ମେମ୍ବ୍ରାନ୍ ଡୋମେନ୍ଗୁଡ଼ିକର କୌଣସି ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ବିଷମତା ପରିଲକ୍ଷିତ ହୋଇନଥିଲା। କଣିକାଗୁଡ଼ିକୁ C1 ଏବଂ C2 ପଦ୍ଧତି ବ୍ୟବହାର କରି ପରିଷ୍କାର କରାଯାଇଥିଲା; ଅଧିକ C2 ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ଥିବା କଣିକାଗୁଡ଼ିକୁ C2 ତୁଳନାରେ ପ୍ରତିସମ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ବାୟେସିଆନ୍ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ପାଇଁ RELION ରେ ଆମଦାନୀ କରାଯାଇଥିଲା। ତା'ପରେ କଣିକାଗୁଡ଼ିକୁ ଅନ୍ତିମ ଅଣ-ସମାନ ଏବଂ ସ୍ଥାନୀୟ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ପାଇଁ କ୍ରାଇଓଏସପିଆରସିକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ କରାଯାଇଥିଲା। ଅନ୍ତିମ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ଏବଂ କଣିକା ଗଣନା ସାରଣୀ 1 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି।
ନାନ+ଏପି ପେଣ୍ଟାମର୍ସ ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ କରିବା ସମୟରେ, ଆମେ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଡୋମେନ୍ (ବିଶେଷକରି ପୋର୍ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍) ର ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ଉନ୍ନତ କରିବା ପାଇଁ ବିଭିନ୍ନ ପଦ୍ଧତି ଅନୁସନ୍ଧାନ କରିଥିଲୁ, ଯେପରିକି ସିଗନାଲ ବିଯୋଗ ଏବଂ TMD ମାସ୍କିଂ। ତଥାପି, ପୋର୍ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ରେ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ଅତ୍ୟଧିକ ବିକୃତି ଏବଂ TMD ର ସାମଗ୍ରିକ ବିଷମତା ଯୋଗୁଁ ଏହି ପ୍ରୟାସଗୁଡ଼ିକ ବିଫଳ ହୋଇଥିଲା। କ୍ରାଇଓଏସପିଆରସିରେ ଅଣ-ସମାନ ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ ପଦ୍ଧତି ଦ୍ୱାରା ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ ଭାବରେ ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା ଏକ ମାସ୍କ ବ୍ୟବହାର କରି ଚୂଡ଼ାନ୍ତ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହା ମୁଖ୍ୟତଃ ARD କ୍ଷେତ୍ରକୁ ଲକ୍ଷ୍ୟ କରି କରାଯାଇଥିଲା। ଏହା ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଡୋମେନ୍ (ବିଶେଷକରି VSLD ଅଞ୍ଚଳ) ତୁଳନାରେ ଯଥେଷ୍ଟ ଅଧିକ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ହାସଲ କରିଥିଲା।
ନାନଚୁଙ୍ଗ ଏବଂ ନିଷ୍କ୍ରିୟ ବଗର apo ଫର୍ମର ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଡି ନୋଭୋ ମଡେଲଗୁଡ଼ିକ ପ୍ରଥମେ Coot63 ବ୍ୟବହାର କରି ସୃଷ୍ଟି କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ ନାନ ଏବଂ Iav ବଗର ମଡେଲଗୁଡ଼ିକ କମ୍-ଆତ୍ମବିଶ୍ୱାସ ଅଞ୍ଚଳଗୁଡ଼ିକୁ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ AlphaFold264 ବ୍ୟବହାର କରି ସୃଷ୍ଟି କରାଯାଇଥିଲା। କାଲମୋଡୁଲିନ୍ ମଡେଲିଂ ଯଥାକ୍ରମେ PDB ଆସେସନ୍ସ 4JPZ56 ଏବଂ 1CFD65 ରେ Ca2+-ବାଇଣ୍ଡିଂ ଏବଂ Ca2+-ମୁକ୍ତ ମଡେଲର କଠିନ-ବଡି ଫିଟ୍ ଉପରେ ଆଧାରିତ ଥିଲା। ସଠିକ୍ ଷ୍ଟେରିଓକେମିଷ୍ଟ୍ରି ଏବଂ ଭଲ ଜ୍ୟାମିତି ସୁନିଶ୍ଚିତ କରିବା ପାଇଁ ମଡେଲଗୁଡ଼ିକୁ ଗୋଲକୀୟ ପରିଷ୍କାରକରଣ ବ୍ୟବହାର କରି ପରିଷ୍କାର କରାଯାଇଥିଲା। ତା'ପରେ ଫସଫାଟିଡିଲକୋଲାଇନ୍, ଫସଫାଟିଡିଲେଥାନୋଲାମିନ୍ ଏବଂ ଫସଫାଟିଡିଲସେରିନ୍ କୁ ଭଲ ଭାବରେ ପରିଭାଷିତ ଲିପିଡ୍ ଘନତ୍ୱ ଭାବରେ ମଡେଲ କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ NAM ଏବଂ AP ଲିଗାଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକୁ ଟାଇଟ୍ ଜଙ୍କସନରେ ସମ୍ପୃକ୍ତ ଘନତ୍ୱରେ ରଖାଯାଇଥିଲା। PHENIX66 ରେ eLBOW ବ୍ୟବହାର କରି ଆଇସୋଫର୍ମଗୁଡ଼ିକର SMILES ଷ୍ଟ୍ରିଙ୍ଗରୁ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଫାଇଲଗୁଡ଼ିକ ସୃଷ୍ଟି କରାଯାଇଥିଲା। ଶେଷରେ, ମଡେଲଗୁଡ଼ିକୁ PHENIX ରେ ସ୍ଥାନୀୟ ଗ୍ରୀଡ୍ ସନ୍ଧାନ ଏବଂ ଦ୍ୱିତୀୟ ଗଠନ ସୀମାବଦ୍ଧତା ସହିତ ଗ୍ଲୋବାଲ୍ ମିନିମାଇଜେସନ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରକୃତ ସ୍ଥାନରେ ପରିଷ୍କାର କରାଯାଇଥିଲା। ମଡେଲ ପରିଷ୍କାର ଏବଂ ଗଠନାତ୍ମକ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ MolProbity ସର୍ଭର ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ PyMOL ଏବଂ UCSF Chimera X ବ୍ୟବହାର କରି ଚିତ୍ରଣ କରାଯାଇଥିଲା। 67,68,69 HOLE ସର୍ଭର ବ୍ୟବହାର କରି ଆପର୍ଚର ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା,70 ଏବଂ Consurf ସର୍ଭର ବ୍ୟବହାର କରି କ୍ରମ ସଂରକ୍ଷଣ ମ୍ୟାପିଂ କରାଯାଇଥିଲା।71
ଇଗୋର ପ୍ରୋ 6.2, ଏକ୍ସେଲ୍ ଅଫିସ୍ 365, ଏବଂ ଗ୍ରାଫପ୍ୟାଡ୍ ପ୍ରିଜମ୍ 7.0 ବ୍ୟବହାର କରି ପରିସଂଖ୍ୟାନ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। ସମସ୍ତ ପରିମାଣାତ୍ମକ ତଥ୍ୟକୁ ମଧ୍ୟମ ± ମାନକ ତ୍ରୁଟି (SEM) ଭାବରେ ଉପସ୍ଥାପନ କରାଯାଇଛି। ଛାତ୍ରଙ୍କ ଟି-ପରୀକ୍ଷା (ଦୁଇ-ଲାଞ୍ଜଯୁକ୍ତ, ଯୋଡ଼ା ହୋଇନଥିବା) ଦୁଇଟି ଗୋଷ୍ଠୀ ତୁଳନା କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା। ଭିନ୍ନତାର ଏକ-ପାଖ ବିଶ୍ଳେଷଣ (ANOVA) ପରେ ଡନେଟ୍ଙ୍କ ପୋଷ୍ଟ ହକ୍ ପରୀକ୍ଷା ଏକାଧିକ ଗୋଷ୍ଠୀ ତୁଳନା କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା। *P< ୦.୦୫, **ପି< 0.01, ଏବଂ ***Pତଥ୍ୟ ବଣ୍ଟନ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରି < 0.001 ପରିସଂଖ୍ୟାନଗତ ଭାବରେ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ବୋଲି ବିବେଚନା କରାଯାଇଥିଲା। Kd, Ki ମୂଲ୍ୟ ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର ଅସମମ 95% ଆତ୍ମବିଶ୍ୱାସ ବ୍ୟବଧାନ ଗ୍ରାଫପ୍ୟାଡ୍ ପ୍ରିଜମ୍ 10 ବ୍ୟବହାର କରି ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା।
ଅଧ୍ୟୟନ ପଦ୍ଧତି ବିଷୟରେ ଅଧିକ ବିବରଣୀ ପାଇଁ, ଦୟାକରି ଏହି ଆର୍ଟିକିଲରେ ଲିଙ୍କ୍ ହୋଇଥିବା ପ୍ରକୃତି ପୋର୍ଟଫୋଲିଓ ରିପୋର୍ଟ ସାରାଂଶ ଦେଖନ୍ତୁ।
ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ମଡେଲଟି PDB 4JPZ ଏବଂ 1CFD ଡାଟାବେସରୁ କାଲମୋଡୁଲିନ୍ ମଡେଲ ବ୍ୟବହାର କରି ନିର୍ମିତ ହୋଇଥିଲା। ପ୍ରୋଟିନ୍ ଡାଟା ବ୍ୟାଙ୍କ (PDB) ରେ ସଂଯୋଗ ସଂଖ୍ୟା 9NVN (ଲିଗାଣ୍ଡ ବିନା Nan-Iav-CaM), 9NVO (ନିକୋଟିନାମାଇଡ୍ ସହିତ ବନ୍ଧିତ Nan-Iav-CaM), 9NVP (ନିକୋଟିନାମାଇଡ୍ ଏବଂ EDTA ସହିତ ବନ୍ଧିତ Nan-Iav-CaM), 9NVQ (ଆଫେନିଡୋଲପାଇରୋଲାଇନ୍ ଏବଂ କ୍ୟାଲସିୟମ ସହିତ ବନ୍ଧିତ Nan-Iav-CaM), 9NVR (ଆଫେନିଡୋଲପାଇରୋଲାଇନ୍ ଏବଂ EDTA ସହିତ ବନ୍ଧିତ Nan-Iav-CaM), ଏବଂ 9NVS (ଆଫେନିଡୋଲପାଇରୋଲାଇନ୍ ସହିତ ବନ୍ଧିତ Nan pentamer) ଅଧୀନରେ ସ୍ଥାନିତ ହୋଇଛି। ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ପ୍ରତିଛବିଗୁଡ଼ିକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ଡାଟାବେସ୍ (EMDB) ରେ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଆକ୍ସେସନ୍ ସଂଖ୍ୟା ଅଧୀନରେ ଜମା କରାଯାଇଛି: EMD-49844 (ଲିଗାଣ୍ଡ ବିନା ନାନ୍-Iav-CaM), EMD-49845 (ନିକୋଟିନାମାଇଡ୍ ସହିତ ନାନ୍-Iav-CaM କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ), EMD-49846 (ନିକୋଟିନାମାଇଡ୍ ଏବଂ EDTA ସହିତ ନାନ୍-Iav-CaM କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ), EMD-49847 (ଆଫିଡୋପାଇରୋଲାଇନ୍ ଏବଂ କ୍ୟାଲସିୟମ୍ ସହିତ ନାନ୍-Iav-CaM କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ), EMD-49848 (ଆଫିଡୋପାଇରୋଲାଇନ୍ ଏବଂ EDTA ସହିତ ନାନ୍-Iav-CaM କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ), ଏବଂ EMD-49849 (ଆଫିଡୋପାଇରୋଲାଇନ୍ ସହିତ ନାନ୍ ପେଣ୍ଟାମର କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ)। କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ କଞ୍ଚା ତଥ୍ୟ ଏହି ପତ୍ରରେ ଉପସ୍ଥାପିତ ହୋଇଛି।
ପୋଷ୍ଟ ସମୟ: ଜାନୁଆରୀ-୨୮-୨୦୨୬