ଉଦ୍ଭିଦ ମାଇକ୍ରୋଟୁବୁଲ୍ସକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରୁଥିବା ଉପନ୍ୟାସ ଉଦ୍ଭିଦ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ନିରୋଧକ ଭାବରେ ଉର୍ସା ମୋନୋମାଇଡ୍ସର ଆବିଷ୍କାର, ଚରିତ୍ର ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟକାରିତା ଉନ୍ନତି |

Nature.com ପରିଦର୍ଶନ କରିଥିବାରୁ ଧନ୍ୟବାଦ |ଆପଣ ବ୍ୟବହାର କରୁଥିବା ବ୍ରାଉଜରର ସଂସ୍କରଣରେ ସୀମିତ CSS ସମର୍ଥନ ଅଛି |ସର୍ବୋତ୍ତମ ଫଳାଫଳ ପାଇଁ, ଆମେ ପରାମର୍ଶ ଦେଉଛୁ ଯେ ଆପଣ ଆପଣଙ୍କର ବ୍ରାଉଜରର ଏକ ନୂତନ ସଂସ୍କରଣ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ (କିମ୍ବା ଇଣ୍ଟରନେଟ୍ ଏକ୍ସପ୍ଲୋରରରେ ସୁସଙ୍ଗତତା ମୋଡ୍ ଅକ୍ଷମ କରନ୍ତୁ) |ମ meantime ିରେ ମ ongoing ିରେ, ଚାଲୁଥିବା ସମର୍ଥନ ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ, ଆମେ ଷ୍ଟାଇଲ୍ କିମ୍ବା ଜାଭାସ୍କ୍ରିପ୍ଟ ବିନା ସାଇଟ୍ ଦେଖାଉଛୁ |
ପ୍ରାକୃତିକ ଦ୍ରବ୍ୟର ଆବିଷ୍କାର ଏବଂ ଉପକାରୀ ବ୍ୟବହାର ମାନବ ଜୀବନରେ ଉନ୍ନତି ଆଣିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିଥାଏ |ତୃଣକକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ ଉଦ୍ଭିଦ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ନିରୋଧକ ରାସାୟନିକ ପଦାର୍ଥଗୁଡିକ ହରବାଇସିଡ୍ ଭାବରେ ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର ହରବାଇସିଡ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବାର ଆବଶ୍ୟକତା ହେତୁ, ନୂତନ କାର୍ଯ୍ୟ ପ୍ରଣାଳୀ ସହିତ ଯ ounds ଗିକ ଚିହ୍ନଟ କରିବାର ଆବଶ୍ୟକତା ଅଛି |ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ, ଆମେ ଷ୍ଟ୍ରେପଟୋମିସେସ୍ ୱେରେନସିସ୍ MK493-CF1 ରୁ ଏକ ଉପନ୍ୟାସ N -alkoxypyrrole ଯ ound ଗିକ, କୁମାମୋନାମାଇଡ୍ ଆବିଷ୍କାର କରି ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ସିନ୍ଥେସିସ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟା ପ୍ରତିଷ୍ଠା କରିଥିଲୁ |ଜ bi ବିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଅନୁଧ୍ୟାନ ମାଧ୍ୟମରେ, ଆମେ ଆବିଷ୍କାର କଲୁ ଯେ urs-monoamic acid ହେଉଛି urs-monoamide ର ଏକ ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ମଧ୍ୟବର୍ତ୍ତୀ ଏବଂ ଏକ ସମ୍ଭାବନା |ଉଦ୍ଭିଦ ବୃଦ୍ଧି ପ୍ରତିବନ୍ଧକ |।ଏହା ସହିତ, ଆମେ ଉର୍ବେନିଲୋକ୍ସି ଡେରିଭେଟିଭ୍ (UDA) କୁ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରି ବିଭିନ୍ନ ୟୁର୍ବେନୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଡେରିଭେଟିକ୍ସ ବିକଶିତ କରିଛୁ, ଯାହାର ଉଚ୍ଚ ହରବାଇସିଡାଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ରହିଛି, ଯାହା ହେଲା କୋଷର ବୃଦ୍ଧି ଉପରେ କ negative ଣସି ପ୍ରଭାବ ପକାଇବ ନାହିଁ |ଆମେ ଏହା ମଧ୍ୟ ପାଇଲୁ ଯେ ଉର୍ମୋଟୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଉତ୍ପାଦନ ଉଦ୍ଭିଦ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍କୁ ବ୍ୟାହତ କରେ;ଏହା ସହିତ, KAND ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରେ ଏବଂ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁକୁ ପ୍ରବର୍ତ୍ତାଏ |ଏହି ବହୁମୁଖୀ ପ୍ରଭାବଗୁଡିକ ଜଣାଶୁଣା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଇନିବିବିଟର୍ସ ଠାରୁ ଭିନ୍ନ ଏବଂ ୟୁରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ପାଇଁ ଏକ ନୂତନ କାର୍ଯ୍ୟର ପ୍ରଣାଳୀ ପରାମର୍ଶ ଦେଇଥାଏ, ଯାହା ନୂତନ b ଷଧୀୟ ବିକାଶରେ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ସୁବିଧାକୁ ପ୍ରତିପାଦିତ କରେ |
ଉପକାରୀ ପ୍ରାକୃତିକ ଦ୍ରବ୍ୟର ଆବିଷ୍କାର ଏବଂ ବ୍ୟବହାରିକ ପ୍ରୟୋଗ ହେଉଛି ମାନବ ଜୀବନର ଗୁଣରେ ଉନ୍ନତି ଆଣିବାର ଏକ ମାଧ୍ୟମ |ମାଇକ୍ରୋ ଅର୍ଗାନ୍ସ, ଉଦ୍ଭିଦ ଏବଂ କୀଟପତଙ୍ଗ ଦ୍ produced ାରା ଉତ୍ପାଦିତ ଦ୍ Secondary ିତୀୟ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ medicine ଷଧ ଏବଂ କୃଷି କ୍ଷେତ୍ରରେ ପ୍ରମୁଖ ଅଗ୍ରଗତି କରିଛି |ପ୍ରାକୃତିକ ଦ୍ରବ୍ୟରୁ ଅନେକ ଆଣ୍ଟିବାୟୋଟିକ୍ ଏବଂ ଆଣ୍ଟି-ଲ୍ୟୁକେମିଆ drugs ଷଧ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇଛି |ଏହା ସହିତ, ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର |କୀଟନାଶକକୃଷିରେ ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ଏହି ପ୍ରାକୃତିକ ଦ୍ରବ୍ୟରୁ ଫଙ୍ଗିସାଇଡ୍ ଏବଂ ହରବାଇସିଡ୍ ବାହାର କରାଯାଏ |ବିଶେଷ ଭାବରେ, ଆଧୁନିକ କୃଷିରେ ଫସଲ ଅମଳ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଁ ତୃଣକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ହରବାଇସିଡ୍ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଉପକରଣ ଅଟେ ଏବଂ ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର ଯ ounds ଗିକ ବ୍ୟବସାୟିକ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇସାରିଛି |ଉଦ୍ଭିଦଗୁଡିକରେ ଅନେକ ସେଲୁଲାର୍ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଯେପରିକି ଫଟୋସାଇନ୍ଥେସିସ୍, ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍, କୋଷ ପ୍ରାଚୀର ସିନ୍ଥେସିସ୍, ମାଇଟୋସିସ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ, ଫାଇଟୋହର୍ମୋନ୍ ସିଗନାଲ୍ କିମ୍ବା ପ୍ରୋଟିନ୍ ସିନ୍ଥେସିସ୍, ହରବାଇସିଡ୍ସର ସାଧାରଣ ଲକ୍ଷ୍ୟ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଏ |ଯ mic ଗିକ ଯାହା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ପ୍ରତିବନ୍ଧିତ କରେ, ତାହା ହେଉଛି ଏକ ସାଧାରଣ ଶ୍ରେଣୀର ହରବାଇସିଡ୍ ଯାହା ମାଇଟୋଟିକ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରଣକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରି ଉଦ୍ଭିଦ ବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିଥାଏ |
ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ସ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନର ଉପାଦାନ ଏବଂ ଇଉକାରିଓଟିକ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ବହୁଳ ଭାବରେ ସଂରକ୍ଷିତ |ଟ୍ୟୁବୁଲିନ୍ ହେଟେରୋମିଡର୍ α- ଟୁବୁଲିନ୍ ଏବଂ β- ଟୁବୁଲିନ୍ ଗଠନ କରେ ଯାହାକି ର line ଖ୍ୟ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ପ୍ରୋଟୋଫିଲାମେଣ୍ଟ ଗଠନ କରେ, 13 ଟି ପ୍ରୋଟୋଫିଲାମେଣ୍ଟ ଏକ ସିଲିଣ୍ଡ୍ରିକ୍ ଗଠନ କରିଥାଏ |ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଉଦ୍ଭିଦ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଏକାଧିକ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିଥାଏ, କୋଷର ଆକୃତି, କୋଷ ବିଭାଜନ ଏବଂ ଇଣ୍ଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ପରିବହନ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ସହିତ |ଉଦ୍ଭିଦ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଇଣ୍ଟରଫେଜ୍ ପ୍ଲାଜମା ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ତଳେ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଥାଏ, ଏବଂ ଏହି ତଥାକଥିତ କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଗୁଡିକ ସେଲୁଲୋଜ୍ ସିନ୍ଥେଜ୍ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସଗୁଡିକର ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ମାଧ୍ୟମରେ ସେଲୁଲୋଜ୍ ମାଇକ୍ରୋଫାଇବ୍ରିଲଗୁଡିକର ସଂଗଠନକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବାକୁ ଚିନ୍ତା କରାଯାଏ |ମୂଳ ଏପିଡର୍ମାଲ୍ କୋଷଗୁଡିକର କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍, ମୂଳ ଟିପ୍ ର ଦ୍ରୁତ ବିସ୍ତାରର ଜୋନ୍ରେ ଅବସ୍ଥିତ, ପାର୍ଶ୍ୱରେ ଅବସ୍ଥିତ, ଏବଂ ସେଲୁଲୋଜ୍ ମାଇକ୍ରୋଫାଇବର ଏହି ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ଅନୁସରଣ କରେ ଏବଂ କୋଷ ବିସ୍ତାରର ଦିଗକୁ ସୀମିତ କରେ, ଯାହା ଦ୍ an ାରା ଆନିସୋଟ୍ରୋପିକ୍ କୋଷ ବିସ୍ତାରକୁ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କରେ |ତେଣୁ, ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟ ଉଦ୍ଭିଦ ମର୍ଫୋଲୋଜି ସହିତ ନିବିଡ ଭାବରେ ଜଡିତ |ଜିନ୍ ଏନକୋଡିଂ ଟ୍ୟୁବଲିନ୍ରେ ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ପ୍ରତିସ୍ଥାପନ କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଆରେ ଏବଂ ଆରାବିଡୋପସିସ୍ 6,7 ରେ ବାମ କିମ୍ବା ଡାହାଣ ପାର୍ଶ୍ୱରେ ବୃଦ୍ଧି ଘଟାଏ |ସେହିପରି ଭାବରେ, ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍-ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଗୁଡିକରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ, ଯାହା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଗତିଶୀଳତାକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରିତ କରେ, ମୂଳ ବିକୃତକୁ ମଧ୍ୟ ବିକୃତ କରିପାରେ 8,9,10,11,12,13 |ଏଥିସହ, ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍-ବ୍ୟାଘାତକାରୀ ହରବାଇସିଡ୍ ସହିତ ଚିକିତ୍ସା ଯେପରିକି ଡିସୋପିରାମାଇଡ୍, ଯାହା ପ୍ରିଟିଲାକ୍ଲୋର ଭାବରେ ମଧ୍ୟ ଜଣାଶୁଣା, ବାମ ପାର୍ଶ୍ ob ର ଓଲିକ୍ ମୂଳ ବୃଦ୍ଧି ମଧ୍ୟ କରିଥାଏ |ଏହି ତଥ୍ୟ ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ ଉଦ୍ଭିଦ ବୃଦ୍ଧିର ଦିଗ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ପାଇଁ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟର ସଠିକ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ |
ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଇନହିବିଟର ଆବିଷ୍କୃତ ହୋଇଛି ଏବଂ ଏହି drugs ଷଧଗୁଡିକ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟାଲ୍ ଗବେଷଣା ତଥା କୃଷି ଏବଂ medicine ଷଧ ପାଇଁ ମହତ୍ contributions ପୂର୍ଣ ଯୋଗଦାନ ଦେଇଛନ୍ତି |ବିଶେଷ ଭାବରେ, ଅରିଜାଲିନ୍, ଡାଇନିଟ୍ରୋଏନିଲିନ୍ ଯ ounds ଗିକ, ଡିସୋପିରାମାଇଡ୍, ବେନଜାମାଇଡ୍ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଯ ounds ଗିକ ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର ଅନୁରୂପ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିପାରେ ଏବଂ ଏହା ଦ୍ plant ାରା ଉଦ୍ଭିଦ ବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିପାରିବ |ତେଣୁ, ସେଗୁଡିକ ହର୍ବାସିସାଇଡ୍ ଭାବରେ ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |ଅବଶ୍ୟ, ଯେହେତୁ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଉଦ୍ଭିଦ ଏବଂ ପ୍ରାଣୀ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଉପାଦାନ, ଅଧିକାଂଶ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଇନହିବିଟର ଉଭୟ କୋଷ ପ୍ରକାର ପାଇଁ ସାଇଟୋଟକ୍ସିକ୍ |ତେଣୁ, ହରବାଇସିଡ୍ ଭାବରେ ସେମାନଙ୍କର ସ୍ୱୀକୃତିପ୍ରାପ୍ତ ଉପଯୋଗିତା ସତ୍ତ୍ a େ, ସୀମିତ ସଂଖ୍ୟକ ଆଣ୍ଟିମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଏଜେଣ୍ଟ ବ୍ୟବହାରିକ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |
ଷ୍ଟ୍ରେପ୍ଟୋମିସେସ୍ ହେଉଛି ପରିବାରର ଷ୍ଟ୍ରେପ୍ଟୋମିସେସ୍, ଯେଉଁଥିରେ ଏରୋବିକ୍, ଗ୍ରାମ-ପଜିଟିଭ୍, ଚିଲାମାଣ୍ଟ ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ ଏବଂ ଏହା ଦ୍ secondary ିତୀୟ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ଉତ୍ପାଦନ କରିବାର କ୍ଷମତା ପାଇଁ ବହୁ ଜଣାଶୁଣା |ତେଣୁ, ଏହା ନୂତନ ଜ olog ବଗତ ସକ୍ରିୟ ପ୍ରାକୃତିକ ଦ୍ରବ୍ୟର ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଉତ୍ସ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଏ |ସାମ୍ପ୍ରତିକ ଅଧ୍ୟୟନରେ, ଆମେ କୁମାମୋନାମାଇଡ୍ ନାମକ ଏକ ନୂତନ ଯ ound ଗିକ ଆବିଷ୍କାର କଲୁ, ଯାହା ଷ୍ଟ୍ରେପଟୋମିସେସ୍ ୱେରେନ୍ସିସ୍ MK493-CF1 ଏବଂ S. werraensis ISP 5486 ରୁ ପୃଥକ ହୋଇଥିଲା | ସ୍ଥିର କରାଯାଇଥିଲାସିନ୍ଥେସିସ୍ |ଉର୍ସମୋନିକ୍ ଏସିଡ୍, ୟୁରସମୋନାମାଇଡ୍ ଏବଂ ଏହାର ଉତ୍ପାଦକମାନଙ୍କର ଏକ ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ମଧ୍ୟବର୍ତ୍ତୀ, ଲୋକପ୍ରିୟ ମଡେଲ୍ ଉଦ୍ଭିଦ ଆରାବିଡୋପସିସ୍ ଥାଲିଆନାର ବୃଦ୍ଧି ଏବଂ ଅଙ୍କୁରିତ କରିବାରେ ବାଧା ସୃଷ୍ଟି କରିଥିଲା ​​|ଏକ ଗଠନ-କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସମ୍ପର୍କ ଅଧ୍ୟୟନରେ, ଆମେ ଜାଣିଲୁ ଯେ C9 ସହିତ ଏକ ଯ ound ଗିକ ୟୁରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ରେ ରୂପାନ୍ତରିତ ହୋଇଛି, ଯାହାକୁ ୟୁରୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ (KAND) ର ନନ୍ଲୋକ୍ସି ଡେରିଭେଟିଭ୍ କୁହାଯାଏ, ବୃଦ୍ଧି ଏବଂ ଅଙ୍କୁର ଉପରେ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ପ୍ରଭାବକୁ ଯଥେଷ୍ଟ ବ ances ାଇଥାଏ |ଉଲ୍ଲେଖଯୋଗ୍ୟ, ନୂତନ ଆବିଷ୍କୃତ ଉଦ୍ଭିଦ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ମଧ୍ୟ ତମାଖୁ ଏବଂ ଲିଭରୱର୍ଟର ବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିଥିଲା ​​ଏବଂ ଜୀବାଣୁ କିମ୍ବା ହେଲା କୋଷ ପାଇଁ ସାଇଟୋଟକ୍ସିକ୍ ନୁହେଁ |ଅଧିକନ୍ତୁ, କିଛି ଉର୍ମୋଟୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଡେରିଭେଟିଭ୍ ଏକ ବିକୃତ ମୂଳ ଫେନୋଟାଇପ୍ ସୃଷ୍ଟି କରେ, ଏହା ଦର୍ଶାଏ ଯେ ଏହି ଡେରିଭେଟିଭ୍ ଗୁଡିକ ପ୍ରତ୍ୟକ୍ଷ ବା ପରୋକ୍ଷ ଭାବରେ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ |ଏହି ଧାରଣା ସହିତ ସ୍ଥିର, ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲଗୁଡିକ ଉପରେ ଆମର ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣଗୁଡିକ ଇମ୍ୟୁନୋହୋଷ୍ଟୋକେମିକାଲ୍ କିମ୍ବା ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସହିତ ସୂଚିତ କରେ ଯେ KAND ଚିକିତ୍ସା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ଡିପୋଲାଇମେରାଇଜ୍ କରେ |ଏଥିସହ, କୁମାମୋଟୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଡେରିଭେଟିଭ୍ ସହିତ ଚିକିତ୍ସା ଆକ୍ଟିନ୍ ମାଇକ୍ରୋଫିଲାମେଣ୍ଟଗୁଡିକୁ ବ୍ୟାହତ କଲା |ଏହିପରି, ଆମେ ଏକ ନୂତନ ଉଦ୍ଭିଦ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଆବିଷ୍କାର କରିଛୁ, ଯାହାର ଅନନ୍ୟ କାର୍ଯ୍ୟର ପ୍ରଣାଳୀ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ ଧ୍ୱଂସ ସହିତ ଜଡିତ |
ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ MK493-CF1 ଟୋକିଓର ଶିନାଗାୱା-କୁ ମାଟିରୁ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ହୋଇଥିଲା |ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ MK493-CF1 ଭଲ ଶାଖା ବିଶିଷ୍ଟ ଷ୍ଟ୍ରୋମାଲ୍ ମାଇସେଲିୟମ୍ ଗଠନ କଲା |16S ରାଇବୋସୋମାଲ୍ RNA ଜିନ୍ (1422 ବିପି) ର ଆଂଶିକ କ୍ରମ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା |ଏହି ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ S. werraensis (NBRC 13404T = ISP 5486, 1421/1422 bp, T: ସାଧାରଣ ଷ୍ଟ୍ରେନ୍, 99.93%) ସହିତ ସମାନ |ଏହି ଫଳାଫଳକୁ ଭିତ୍ତିକରି, ଏହା ସ୍ଥିର ହେଲା ଯେ ଏହି ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ ଏସ୍ ୱେରେନସିସ୍ ପ୍ରକାରର ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ ସହିତ ନିବିଡ ଭାବରେ ଜଡିତ |ତେଣୁ, ଆମେ ସାମୟିକ ଭାବରେ ଏହି ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ S. werraensis MK493-CF1 ନାମକରଣ କରିଛୁ |S. werraensis ISP 5486T ମଧ୍ୟ ସମାନ ଜ o ବ ସକ୍ରିୟ ଯ ounds ଗିକ ଉତ୍ପାଦନ କରେ |ଯେହେତୁ ଏହି ଅଣୁଜୀବରୁ ପ୍ରାକୃତିକ ଦ୍ରବ୍ୟ ପାଇବା ପାଇଁ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଅନୁସନ୍ଧାନ ହୋଇ ନଥିଲା, ପରବର୍ତ୍ତୀ ରାସାୟନିକ ଅନୁସନ୍ଧାନ କରାଯାଇଥିଲା |14 ଦିନ ପାଇଁ 30 ° C ରେ କଠିନ ସ୍ଥିତ ଫେଣ୍ଟେସନ ଦ୍ bar ାରା ବାର୍ ମିଡିୟମରେ S. werraensis MK493-CF1 ଚାଷ ପରେ, ଏହି ମାଧ୍ୟମକୁ 50% EtOH ସହିତ ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା |59.5 ମିଗ୍ରା ଅଶୋଧିତ ନିର୍ବାହ ପାଇବା ପାଇଁ 60 ମିଲି ନମୁନା ଶୁଖାଯାଇଥିଲା |ଅଶୋଧିତ ନିର୍ବାହକୁ N-mitoxy-1H-pyrrole-2-carboxamide (1, coumamonamide, 36.0 mg) ଦେବା ପାଇଁ ଓଲଟା ପର୍ଯ୍ୟାୟ HPLC ଅଧୀନରେ ରହିଥିଲା ​​|ସମୁଦାୟ ପରିମାଣ ହେଉଛି ଅଶୋଧିତ ନିର୍ବାହର ପ୍ରାୟ 60% |ତେଣୁ, ଆମେ କୁମାମୋଟାମାଇଡ୍ 1 ର ଗୁଣ ବିଷୟରେ ବିସ୍ତୃତ ଭାବରେ ଅଧ୍ୟୟନ କରିବାକୁ ସ୍ଥିର କଲୁ |
କୁମାମୋନାମାଇଡ୍ 1 ହେଉଛି ଏକ ଧଳା ଆମୋରଫସ୍ ପାଉଡର୍ ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ରେଜୋଲୁସନ୍ ମାସ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମେଟ୍ରି (HRESIMS) C6H8N2O2 (ଚିତ୍ର 1) କୁ ନିଶ୍ଚିତ କରେ |ଏହି ଯ ound ଗିକର C2- ପ୍ରତିସ୍ଥାପିତ ପାଇରୋଲ୍ ଖଣ୍ଡ δH 6.94 (1H, t, J = 2.8, 4.8 Hz, H-4), δH 6.78 (1H, d, J = 2.5, δH 1H NMR ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରମରେ ବର୍ଣ୍ଣିତ: 4.5 Hz , H-5) ଏବଂ δH 6.78 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-6), ଏବଂ 13C NMR ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରମ୍ ଚାରୋଟି sp2 କାର୍ବନ ପରମାଣୁର ଉପସ୍ଥିତି ଦର୍ଶାଏ |C2 ସ୍ଥିତିରେ ଏକ ଆମିଡ୍ ଗୋଷ୍ଠୀର ଉପସ୍ଥିତି HMBC ସମ୍ପର୍କ ଦ୍ୱାରା C-3 ପ୍ରୋଟନ୍ ଠାରୁ δC 161.1 ରେ ଆମାଇଡ୍ କାର୍ବନିଲ୍ କାର୍ବନ୍ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା |ଏହା ସହିତ, 1 H ଏବଂ 13 C NMR ଶିଖର δH 4.10 (3H, S) ଏବଂ δC 68.3 ଅଣୁରେ N- ମିଥୋକ୍ସି ଗୋଷ୍ଠୀର ଉପସ୍ଥିତି ସୂଚାଇଥାଏ |ଯଦିଓ ମେଟୋକ୍ସି ଗୋଷ୍ଠୀର ସଠିକ୍ ସ୍ଥିତି ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରସ୍କୋପିକ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ବ୍ୟବହାର କରି ସ୍ଥିର କରାଯାଇ ନାହିଁ ଯେପରିକି ବର୍ଦ୍ଧିତ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରସ୍କୋପି ଏବଂ ଆଣବିକ ଓଭରହାଉଜର୍ ସଂକ୍ଷିପ୍ତକରଣ (NOEDF), N-methoxy-1H-pyrrole-2-carboxamide ପ୍ରଥମ ପ୍ରାର୍ଥୀ ଯ ound ଗିକ |
1 ର ସଠିକ୍ ଗଠନ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବାକୁ, ସମୁଦାୟ ସିନ୍ଥେସିସ୍ କରାଯାଇଥିଲା (ଚିତ୍ର 2a) |M-CPBA ସହିତ ବାଣିଜ୍ୟିକ ଭାବରେ ଉପଲବ୍ଧ 2-ଆମିନୋପିରିଡାଇନ୍ 2 ର ଚିକିତ୍ସା ପରିମାଣିକ ଅମଳରେ ସମ୍ପୃକ୍ତ N-oxide 3 ଫଳାଫଳ ପାଇଲା |2 ର 2-ଆମିନୋଏଜିଡେସନ୍ ପରେ, ଅବ୍ରାମୋଭିଚ୍ ଦ୍ୱାରା ବର୍ଣ୍ଣିତ ସାଇକ୍ଲୋକୋଣ୍ଡେନ୍ସେସନ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା 90 ଗ୍ରାମରେ ଇଚ୍ଛିତ 1-ହାଇଡ୍ରୋକ୍ସି -1 ଏଚ୍-ପାଇରୋଲ୍-୨-କାର୍ବନାଇଟ୍ରିଲ୍ 5 ପାଇବା ପାଇଁ 90 ° C ରେ ବେନଜେନରେ କରାଯାଇଥିଲା |ଗତି 60% (ଦୁଇଟି ପର୍ଯ୍ୟାୟ) |15,164 ର ମିଥାଇଲେସନ୍ ଏବଂ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇସିସ୍ ତା’ପରେ 1-ମିଥୋକ୍ସି -1 ଏଚ୍-ପାଇରୋଲ୍-୨-କାର୍ବକ୍ସିଲିକ୍ ଏସିଡ୍ (“କୁମୋଟୋନିକ୍ ଏସିଡ୍” କୁହାଯାଏ, 6) ଭଲ ଅମଳରେ (70%, ଦୁଇଟି ସୋପାନ) ଦେଇଥିଲା |ଶେଷରେ, ଜଳୀୟ ଆମୋନିଆ ବ୍ୟବହାର କରି ଏସିଡ୍ କ୍ଲୋରାଇଡ୍ ମଧ୍ୟବର୍ତ୍ତୀ 6 ମାଧ୍ୟମରେ ଆମିଡେସନ୍ କୁମାମୋଟୋ ଆମାଇଡ୍ 1 କୁ 98% ଅମଳରେ ଦେଲା |ସିନ୍ଥାଇଜଡ୍ 1 ର ସମସ୍ତ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରାଲ୍ ତଥ୍ୟ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ 1 ସହିତ ସମାନ ଥିଲା, ତେଣୁ 1 ର ଗଠନ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ହେଲା;
ଉର୍ବେନାମାଇଡ୍ ଏବଂ ଉର୍ବେନିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ଜ bi ବିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର ସାଧାରଣ ସିନ୍ଥେସିସ୍ ଏବଂ ବିଶ୍ଳେଷଣ |(କ) କୁମାମୋଟୋ ଆମାଇଡ୍ ର ସମୁଦାୟ ସିନ୍ଥେସିସ୍ |)ମାପ ଦଣ୍ଡ = 1 ସେମି |
ପ୍ରଥମେ, ଉଦ୍ଭିଦ ବୃଦ୍ଧିକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିବାର କ୍ଷମତା ପାଇଁ ଆମେ ଉର୍ବେନାମାଇଡ୍ ଏବଂ ଏହାର ମଧ୍ୟସ୍ଥିମାନଙ୍କର ଜ bi ବିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିଥିଲୁ |ଆମେ ଏହି ମାଧ୍ୟମରେ ଉର୍ସମୋନାମାଇଡ୍ or କିମ୍ବା ଉର୍ସମୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ of ର ବିଭିନ୍ନ ଏକାଗ୍ରତା ଏବଂ ଏହି ମାଧ୍ୟମରେ ସାଂସ୍କୃତିକ ଆରାବିଡୋପସିସ୍ ଥାଲିଆନା ବିହନ ଯୋଗ କରିଥିଲୁ |ଏହି ଅନୁଧ୍ୟାନଗୁଡିକ ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ 6 ର ମୂଳ ଏକାଗ୍ରତା (ଚିତ୍ର 2 ବି) ର ଉଚ୍ଚ ଏକାଗ୍ରତା (500 μM) |ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ, ଆମେ 6 ର N1 ସ୍ଥିତିକୁ ବଦଳାଇ ବିଭିନ୍ନ ଉତ୍ପାଦନ ସୃଷ୍ଟି କରିଥିଲୁ ଏବଂ ସେମାନଙ୍କ ଉପରେ ସଂରଚନା - କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସମ୍ପର୍କ ଅଧ୍ୟୟନ କରିଥିଲୁ (ଆନାଗୁଲ୍ ସିନ୍ଥେସିସ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟା ସହାୟକ ସୂଚନା (SI) ରେ ବର୍ଣ୍ଣନା କରାଯାଇଛି) |ଆରାବିଡୋପସିସ୍ ବିହନ 50 μM ୟୁରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଡେରିଭେଟିଭ୍ ଧାରଣ କରିଥିବା ଏକ ମାଧ୍ୟମରେ ବ grown ଼ାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ମୂଳ ଦ length ର୍ଘ୍ୟ ମାପ କରାଯାଇଥିଲା |ଯେପରି ଏହା ଚିତ୍ରରେ ଦେଖାଯାଇଛି |ଚିତ୍ର 3a, b, ଏବଂ S1 ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, କୁମାମୋ ଏସିଡଗୁଡିକର ବିଭିନ୍ନ ଲମ୍ବ ର line ଖ୍ୟ ଆଲକୋକ୍ସି ଚେନ୍ (9, 10, 11, 12, ଏବଂ 13) କିମ୍ବା N1 ସ୍ଥିତିରେ ବଡ଼ ଆଲକୋକ୍ସି ଚେନ୍ (15, 16, ଏବଂ 17) ଥାଏ |ଉତ୍ପତ୍ତିଗୁଡ଼ିକ ମୂଳ ଅଭିବୃଦ୍ଧିର ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଦେଖାଇଲେ |ଏହା ସହିତ, ଆମେ ପାଇଲୁ ଯେ 200 μM 10, 11, କିମ୍ବା 17 ର ପ୍ରୟୋଗ ପ୍ରତିବନ୍ଧିତ ବୀଜାଣୁ (ଚିତ୍ର 3c ଏବଂ S2) |
କୁମାମୋଟୋ ଆମାଇଡ୍ ଏବଂ ଆନୁଷଙ୍ଗିକ ଯ ounds ଗିକର ଗଠନ-କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସମ୍ପର୍କର ଅଧ୍ୟୟନ |(କ) ଅନୁରୂପ ଗଠନ ଏବଂ ସିନ୍ଥେସିସ୍ ସ୍କିମ୍ |)ଆଷ୍ଟେରିସ୍କ ଶ୍ୟାମ ଚିକିତ୍ସା ସହିତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସୂଚାଇଥାଏ (t ପରୀକ୍ଷା, ପି<0.05) |n>18. ଡାଟା ହାରାହାରି ± SD ଭାବରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି |nt ଅର୍ଥ “ପରୀକ୍ଷିତ ନୁହେଁ” କାରଣ 50% ରୁ ଅଧିକ ମଞ୍ଜି ଅଙ୍କୁରିତ ହୋଇନଥିଲା |)ଆଷ୍ଟେରିସ୍କ ଶ୍ୟାମ ଚିକିତ୍ସା (ଚି-ବର୍ଗ ପରୀକ୍ଷା) ସହିତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସୂଚାଇଥାଏ |n = 96
କ Interest ତୁହଳର ବିଷୟ, C9 ଠାରୁ ଅଧିକ ଆଲକିଲ୍ ପାର୍ଶ୍ୱ ଶୃଙ୍ଖଳର ଯୋଗ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରତିବନ୍ଧକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ହ୍ରାସ ପାଇଲା, ପରାମର୍ଶ ଦେଇଥାଏ ଯେ କୁମାମୋଟିକ୍ ଏସିଡ୍ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଯ ounds ଗିକଗୁଡିକ ସେମାନଙ୍କର ଜ ological ବିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିବା ପାଇଁ ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଆକାରର ପାର୍ଶ୍ୱ ଶୃଙ୍ଖଳା ଆବଶ୍ୟକ କରନ୍ତି |
କାରଣ ଗଠନ-କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସମ୍ପର୍କ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ C9 କୁ ୟୁରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ରେ ରୂପାନ୍ତରିତ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ୟୁରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ନନ୍ଲୋକ୍ସି ଡେରିଭେଟିଭ୍ (ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ KAND 11 ଭାବରେ କୁହାଯାଏ) ହେଉଛି ସବୁଠାରୁ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଉଦ୍ଭିଦ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ନିରୋଧକ, ଆମେ KAND 11 ର ଏକ ବିସ୍ତୃତ ବର୍ଣ୍ଣନା କରିଥିଲୁ | ଆରାବିଡୋପସିସ୍ ଚିକିତ୍ସା | 50 μM KAND 11 ସହିତ ଅଙ୍କୁରକୁ ପ୍ରାୟ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ ପ୍ରତିରୋଧ କରାଯାଇଥିଲା, ଯେତେବେଳେ କି KAND 11 ର ନିମ୍ନ ଏକାଗ୍ରତା (40, 30, 20, କିମ୍ବା 10 μM) ଏକ ଡୋଜ-ନିର୍ଭରଶୀଳ root ଙ୍ଗରେ ମୂଳ ବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିଥିଲା ​​(ଚିତ୍ର 4a, b) |KAND 11 ରୁଟ୍ ମେରିଷ୍ଟେମ୍ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମତା ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଉଛି କି ନାହିଁ ପରୀକ୍ଷା କରିବାକୁ, ଆମେ ପ୍ରୋପିଡିୟମ୍ ଆୟୋଡିଡ୍ (PI) ସହିତ ଦାଗଯୁକ୍ତ ମୂଳ ମେରିଷ୍ଟେମ୍ ପରୀକ୍ଷା କରି ମେରିଷ୍ଟେମ୍ କ୍ଷେତ୍ର ଆକାର ମାପ କରିଛୁ |25 μM KAND-11 ଧାରଣ କରିଥିବା ଏକ ମାଧ୍ୟମରେ ବ grown ଼ାଯାଇଥିବା ବିହନଗୁଡିକର ମେରିଷ୍ଟେମର ଆକାର ଥିଲା 151.1 ± 32.5 μm, ଯେତେବେଳେ DMSO ଧାରଣ କରିଥିବା ଏକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ମାଧ୍ୟମରେ ବ grown ଼ାଯାଇଥିବା ବିହନଗୁଡିକର ମେରିଷ୍ଟେମ୍ 264.7 ± 30.8 μm (ଚିତ୍ର 4c, d) | , ଯାହା ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ KAND-11 ସେଲୁଲାର୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ପୁନରୁଦ୍ଧାର କରେ |ବିସ୍ତାରମୂଳ ମେରିଷ୍ଟମ୍ |ଏହା ସହିତ ସ୍ଥିର, KAND 11 ଚିକିତ୍ସା ସେଲ୍ ଡିଭିଜନ୍ ମାର୍କର CDKB2 ର ପରିମାଣକୁ ହ୍ରାସ କଲା; 1p :: CDKB2; ମୂଳ ମେରିଷ୍ଟମରେ 1-GUS ସଙ୍କେତ (ଚିତ୍ର 4e) 17 |ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ KAND 11 କୋଷ ବିସ୍ତାର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ହ୍ରାସ କରି ମୂଳ ବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିଥାଏ |
ଅଭିବୃଦ୍ଧିରେ ଉର୍ବେନୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଡେରିଭେଟିକ୍ସ (urbenyloxy derivatives) ର ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ପ୍ରଭାବର ବିଶ୍ଳେଷଣ |(କ) 7 ଦିନର ପୁରୁଣା ବନ୍ୟ ପ୍ରକାର କୋଲ୍ ବିହନ ଏମଏସ ପ୍ଲେଟରେ KAND 11 ର ସୂଚୀତ ଏକାଗ୍ରତା ସହିତ ବ grown ଼ିଥାଏ | ମାପ ଦଣ୍ଡ = 1 ସେମି |(ଖ) ମୂଳ ଦ length ର୍ଘ୍ୟର ପରିମାଣ |ଅକ୍ଷରଗୁଡ଼ିକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସୂଚାଇଥାଏ (ଟୁକି HSD ପରୀକ୍ଷା, ପି<0.05) |n>16. ଡାଟା ହାରାହାରି ± SD ଭାବରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି |(ଗ) ପ୍ରୋପିଡିୟମ୍ ଆୟୋଡିଡ୍-ଦାଗିତ ବନ୍ୟ ପ୍ରକାରର କୋଲ୍ ମୂଳର କନଫୋକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି 25 μM KAND ସହିତ କିମ୍ବା ବିନା MS ପ୍ଲେଟରେ ବ grown ଼ିଥାଏ | ଧଳା ବ୍ରାକେଟ୍ ମୂଳ ମେରିଷ୍ଟେମ୍ କୁ ସୂଚିତ କରେ |ମାପ ଦଣ୍ଡ = 100 µm |(ଘ) ମୂଳ ମେରିଷ୍ଟେମ୍ ଆକାରର ପରିମାଣ (n = 10 ରୁ 11) |ଟି-ଟେଷ୍ଟ (p) ବ୍ୟବହାର କରି ପରିସଂଖ୍ୟାନିକ ପାର୍ଥକ୍ୟ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା |<0.05) |ବାରଗୁଡ଼ିକ ହାରାହାରି ମେରିଷ୍ଟେମ୍ ଆକାରକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ |()) CDKB2 ନିର୍ମାଣ ଧାରଣ କରିଥିବା ଏକ ମୂଳ ମେରିଷ୍ଟେମର ଭିନ୍ନ ଭିନ୍ନ ହସ୍ତକ୍ଷେପ ବିପରୀତ (DIC) ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି;1pro: CDKB2;25-MM KAND ଆସେ ସହିତ କିମ୍ବା ବିନା MS ପ୍ଲେଟରେ ବ grown ଼ିଥିବା 5-ଦିନର ବିହନ ଉପରେ 1-GUS ଦାଗିତ ଏବଂ ଦାଗଯୁକ୍ତ |
KAND 11 ର ଫାଇଟୋଟକ୍ସାଇସିଟି ଅନ୍ୟ ଏକ ଡିକୋଟିଲଡୋନସ୍ ପ୍ଲାଣ୍ଟ, ତମାଖୁ (ନିକୋଟିନା ଟ୍ୟାବାକମ୍) ଏବଂ ଏକ ପ୍ରମୁଖ ଭୂମି ଉଦ୍ଭିଦ ମଡେଲ୍ ଜୀବ, ଲିଭରୱର୍ଟ (ମାର୍ଚାଣ୍ଟିଆ ପଲିମୋର୍ଫା) ବ୍ୟବହାର କରି ପରୀକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |ଆରାବିଡୋପସିସ୍ ପରି, 25 μM KAND 11 ଧାରଣ କରିଥିବା ମଧ୍ୟମ ଉପରେ ବ grown ୁଥିବା ତମାଖୁ SR-1 ବିହନ ଛୋଟ ମୂଳ ଉତ୍ପାଦନ କଲା (ଚିତ୍ର 5a) |ଅତିରିକ୍ତ ଭାବରେ, 48 ମଞ୍ଜି ମଧ୍ୟରୁ 40 ଟି 200 μM KAND 11 ଧାରଣ କରିଥିବା ପ୍ଲେଟରେ ଅଙ୍କୁରିତ ହୋଇଥିଲା, ଯେତେବେଳେ କି ସମସ୍ତ 48 ମଞ୍ଜି ମକ୍-ଟ୍ରିଟ ମିଡିଆରେ ବ inated ିଥିଲା, ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ KAND ର ଅଧିକ ଏକାଗ୍ରତା ମହତ୍ p ପୂର୍ଣ୍ଣ (p)<0.05;chi test -square) ତମାଖୁର ଉର୍ବରତାକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କଲା |(ଚିତ୍ର 5 ବି)ଏହା ସହିତ, KAND 11 ର ଏକାଗ୍ରତା ଯାହା ଲିଭରୱର୍ଟରେ ଜୀବାଣୁ ବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିଥିଲା, ଆରାବିଡୋପସିସ୍ (ଚିତ୍ର 5c) ରେ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଏକାଗ୍ରତା ସହିତ ସମାନ ଥିଲା |ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ KAND 11 ବିଭିନ୍ନ ଉଦ୍ଭିଦର ବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିପାରିବ |ତା’ପରେ ଆମେ ଅନ୍ୟ ଜୀବମାନଙ୍କରେ ଭାଲୁ ମୋନୋମାଇଡ୍ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଯ ounds ଗିକର ସମ୍ଭାବ୍ୟ ସାଇଟୋଟକ୍ସାଇସିଟି ଯଥା ଯଥା ମାନବ ହେଲା କୋଷ ଏବଂ ଇଚେରିଚିଆ କୋଲି ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ DH5α ଅନୁସନ୍ଧାନ କରି ଯଥାକ୍ରମେ ଉଚ୍ଚ ପ୍ରାଣୀ ଏବଂ ଜୀବାଣୁ କୋଷର ପ୍ରତିନିଧୀ ଭାବରେ ଅନୁସନ୍ଧାନ କଲୁ |କୋଷ ବିସ୍ତାର ଅନୁଧ୍ୟାନର ଏକ କ୍ରମରେ, ଆମେ ଦେଖିଲୁ ଯେ କୁମାମୋନାମାଇଡ୍ 1, କୁମୁନାମିଡିକ୍ ଏସିଡ୍ 6, ଏବଂ KAND 11 100 μM (ଚିତ୍ର 5d, e) ର ଏକାଗ୍ରତାରେ ହେଲା କିମ୍ବା ଇ କୋଲି କୋଷର ବୃଦ୍ଧି ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇ ନାହିଁ |
ଅଣ ଆରବିଡୋପିସ୍ ଜୀବମାନଙ୍କରେ KAND 11 ର ଅଭିବୃଦ୍ଧି ପ୍ରତିବନ୍ଧକ |(କ) ଦୁଇ ସପ୍ତାହ ପୁରୁଣା ବନ୍ୟ ପ୍ରକାର SR-1 ତମାଖୁ ବିହନ ଭୂଲମ୍ବ ସ୍ଥିତ MS ପ୍ଲେଟରେ 25 μM KAND 11 ଧାରଣ କରିଥିବା ବ grown ଼ିଥିଲା ​​(ଖ) ଦୁଇ ସପ୍ତାହ ପୁରୁଣା ବନ୍ୟ ପ୍ରକାର SR-1 ତମାଖୁ ବିହନ ଭୂସମାନ୍ତର ଅବସ୍ଥାରେ ବ grown ଼ିଥିଲା ​​| 200 μM KAND 11. ଧାରଣ କରିଥିବା MS ପ୍ଲେଟଗୁଡିକ ଅବଧି(ଘ) ହେଲା କୋଷଗୁଡ଼ିକର କୋଷ ବିସ୍ତାର ଅନୁଧ୍ୟାନ |ଏକ ସେଲ୍ ଗଣନା କିଟ୍ 8 (ଡୋଜିଣ୍ଡୋ) ବ୍ୟବହାର କରି ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ସମୟ ବ୍ୟବଧାନରେ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ସଂଖ୍ୟା ମାପ କରାଯାଇଥିଲା |ଏକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଭାବରେ, ହେଲା କୋଷଗୁଡିକ 5 μg / ml ଆକ୍ଟିନୋମାଇସିନ୍ ଡି (ଆକ୍ଟ ଡି) ସହିତ ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଉଥିଲା, ଯାହା RNA ପଲିମେରେଜ୍ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ କୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିଥାଏ ଏବଂ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁକୁ କାରଣ କରିଥାଏ |ତ୍ରିଗୁଣରେ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |()) ଇ କୋଲି କୋଷ ବିସ୍ତାର ଅନୁଧ୍ୟାନ |E. coli ଅଭିବୃଦ୍ଧି OD600 ମାପ କରି ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |ଏକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଭାବରେ, କୋଷଗୁଡିକ 50 μg / ml ampicillin (Amp) ସହିତ ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଉଥିଲା, ଯାହା ଜୀବାଣୁ କୋଷ ପ୍ରାଚୀର ସିନ୍ଥେସିସ୍ ପ୍ରତିରୋଧ କରିଥାଏ |ତ୍ରିଗୁଣରେ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |
ୟୁରାମାଇଡ୍ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଯ ounds ଗିକ ଦ୍ caused ାରା ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା ସାଇଟୋଟକ୍ସାଇସିଟିର କାର୍ଯ୍ୟର ଯନ୍ତ୍ରକ dec ଶଳକୁ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରିବାକୁ, ଆମେ ମଧ୍ୟମ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ପ୍ରଭାବ ସହିତ ଉର୍ବେନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଡେରିଭେଟିକ୍ସକୁ ପୁନ an ବିଶ୍ aly ାସ କରିଥିଲୁ |ଯେପରି ଏହା ଚିତ୍ରରେ ଦେଖାଯାଇଛି |ଚିତ୍ର 2b, 6a ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, ଉରାମୋଟୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ 6 ର ଉଚ୍ଚ ଏକାଗ୍ରତା (200 μM) ଧାରଣ କରିଥିବା ଅଗର ପ୍ଲେଟରେ ବ grown ଼ାଯାଇଥିବା ବିହନଗୁଡିକ କ୍ଷୁଦ୍ର ଏବଂ ବାମ-ବକ୍ର ମୂଳ (θ = - 23.7 ± 6.1) ଉତ୍ପାଦନ କରିଥାଏ, ଯେଉଁଠାରେ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ମାଧ୍ୟମରେ ବ grown ଼ୁଥିବା ବିହନ, ବିହନ ପ୍ରାୟ ସିଧା ମୂଳ ଉତ୍ପାଦନ କଲା (θ = - 3.8 ± 7.1) |ଏହି ଚରିତ୍ରିକ ଓଲିକ୍ ଅଭିବୃଦ୍ଧି କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ସର ଅସହଯୋଗରୁ ଜଣା ପଡିଛି 14,18 |ଏହି ଅନୁସନ୍ଧାନ ସହିତ କ୍ରମାଗତ ଭାବରେ, ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍-ଅସ୍ଥିରକାରୀ drugs ଷଧ ଡିସୋପିରାମାଇଡ୍ ଏବଂ ଅରିଜାଲିନ୍ ଆମ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ଅବସ୍ଥାରେ ସମାନ ମୂଳ ting ୁଲିବାକୁ ପ୍ରବର୍ତ୍ତାଇଲା (ଚିତ୍ର 2b, 6a) |ସେହି ସମୟରେ, ଆମେ ଉର୍ମୋଟୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଡେରିଭେଟିକ୍ସ ପରୀକ୍ଷା କଲୁ ଏବଂ ସେଥିମଧ୍ୟରୁ ଅନେକକୁ ବାଛିଲୁ, ଯାହାକି ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଏକାଗ୍ରତାରେ, ଓଲିକ୍ ମୂଳ ବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରବର୍ତ୍ତାଇଲା |ଯ ounds ଗିକ 8, 9, ଏବଂ 15 ଯଥାକ୍ରମେ 75 μM, 50 μM, ଏବଂ 40 μM ରେ ମୂଳ ଅଭିବୃଦ୍ଧିର ଦିଗ ବଦଳାଇଲା, ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ ଏହି ଯ ounds ଗିକଗୁଡିକ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍କୁ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଭାବରେ ଅସ୍ଥିର କରିପାରେ (ଚିତ୍ର 2b, 6a) |ଆମେ ମଧ୍ୟ ଅତ୍ୟଧିକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ୟୁରୋସୋଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଡେରିଭେଟିଭ୍, KAND 11 କୁ ନିମ୍ନ ଏକାଗ୍ରତା (15 µM) ରେ ପରୀକ୍ଷା କରିଥିଲୁ ଏବଂ ଜାଣିଲୁ ଯେ KAND 11 ର ପ୍ରୟୋଗ ମୂଳ ଅଭିବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରତିବନ୍ଧିତ କଲା ଏବଂ ମୂଳ ଅଭିବୃଦ୍ଧିର ଦିଗ ଅସମାନ ଥିଲା, ଯଦିଓ ସେମାନେ ବାମ ପଟକୁ ଖସିବାକୁ ଲାଗିଲେ ( ଚିତ୍ର C3) |।କାରଣ ମାଇକ୍ରୋଟୁବୁଲ୍-ଅସ୍ଥିରକାରୀ drugs ଷଧର ଅଧିକ ଏକାଗ୍ରତା ମୂଳର ting ୁଲିବା ପରିବର୍ତ୍ତେ ଉଦ୍ଭିଦ ବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିଥାଏ, ଆମେ ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ ସମ୍ଭାବନାକୁ ଆକଳନ କରିଥିଲୁ ଯେ ମୂଳ ଏପିଡର୍ମାଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଦେଖିବା ଦ୍ୱାରା KAND 11 ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ |25 μM KAND 11 ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ ବିହନ ମୂଳର ଏପିଡର୍ମାଲ୍ କୋଷରେ ଆଣ୍ଟି- tub- ଟୁବୁଲିନ୍ ଆଣ୍ଟିବଡି ବ୍ୟବହାର କରି ଇମ୍ୟୁନୋହୋଷ୍ଟୋକେମିଷ୍ଟ୍ରି ବ ong ଼ିବା ଜୋନ୍ରେ ଏପିଡର୍ମାଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ପ୍ରାୟ ସମସ୍ତ କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଅଦୃଶ୍ୟ ହୋଇଥିବାର ଦେଖାଇଲା (ଚିତ୍ର 6b) |ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ କୁମାମୋଟୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଏବଂ ଏହାର ଉତ୍ପତ୍ତିଗୁଡ଼ିକ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଉପରେ ସିଧାସଳଖ କିମ୍ବା ପରୋକ୍ଷ ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରନ୍ତି ଏବଂ ଏହି ଯ ounds ଗିକଗୁଡିକ ଉପନ୍ୟାସ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଇନହିବିଟର |
ଉରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଏବଂ ଏହାର ଉତ୍ପାଦକଗୁଡିକ ଆରାବିଡୋପସିସ୍ ଥାଲିଆନାରେ କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରନ୍ତି |(କ) ସୂଚିତ ଏକାଗ୍ରତାରେ ବିଭିନ୍ନ ଉର୍ମୋଟୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଉତ୍ପାଦକଙ୍କ ଉପସ୍ଥିତିରେ ମାପାଯାଇଥିବା ମୂଳ ପ୍ରବୃତ୍ତି କୋଣ |ମାଇକ୍ରୋଟ୍ରୁବୁଲ୍ ରୋକିବା ପାଇଁ ଜଣାଶୁଣା ଦୁଇଟି ଯ ounds ଗିକର ପ୍ରଭାବ: ଡିସୋପିରାମାଇଡ୍ ଏବଂ ଅରିଜାଲିନ୍ ମଧ୍ୟ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |ମୂଳ ଅଭିବୃଦ୍ଧି କୋଣ ମାପିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ମାନକକୁ ଇନସେଟ ଦର୍ଶାଏ |ଆଷ୍ଟେରିସ୍କ ଶ୍ୟାମ ଚିକିତ୍ସା ସହିତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସୂଚାଇଥାଏ (t ପରୀକ୍ଷା, ପି<0.05) |n>19. ମାପ ଦଣ୍ଡ = 1 ସେମି |(ଖ) ବିସ୍ତାର ଜୋନ୍ରେ ଏପିଡର୍ମାଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ |25 μM KAND 11 ସହିତ କିମ୍ବା ବିନା MS ପ୍ଲେଟରେ ବ grown ଼ୁଥିବା ବନ୍ୟ ପ୍ରକାର ଆରାବିଡୋପସିସ୍ କୋଲ୍ ମୂଳରେ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ β- ଟୁବୁଲିନ୍ ପ୍ରାଥମିକ ଆଣ୍ଟିବଡି ଏବଂ ଆଲେକ୍ସା ଫ୍ଲୋର-କଞ୍ଜୁଗେଟେଡ୍ ସେକେଣ୍ଡାରୀ ଆଣ୍ଟିବଡି ବ୍ୟବହାର କରି ଇମ୍ୟୁନୋହୋଷ୍ଟୋକେମିକାଲ୍ ଦାଗ ଦ୍ୱାରା ଭିଜୁଆଲ୍ କରାଯାଇଥିଲା |ମାପ ଦଣ୍ଡ = 10 µ ମି।(ଗ) ମୂଳ ମେରିଷ୍ଟେମରେ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ସର ମାଇଟୋଟିକ୍ ଗଠନ |ଇମ୍ୟୁନୋହୋଷ୍ଟୋକେମିକାଲ୍ ଦାଗ ବ୍ୟବହାର କରି ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲଗୁଡିକ ଭିଜୁଆଲ୍ କରାଯାଇଥିଲା |ପ୍ରୋଫେଜ୍ ଜୋନ୍, ସ୍ପିଣ୍ଡଲ୍ସ, ଏବଂ ଫ୍ରାଗମୋପ୍ଲାଷ୍ଟ ସହିତ ମାଇଟୋଟିକ୍ ଗଠନଗୁଡିକ କନଫୋକାଲ୍ ଚିତ୍ରରୁ ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା |ତୀରଗୁଡିକ ମାଇଟୋଟିକ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଗଠନକୁ ସୂଚିତ କରେ |ଆଷ୍ଟେରିସ୍କ ଶ୍ୟାମ ଚିକିତ୍ସା ସହିତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସୂଚାଇଥାଏ (t ପରୀକ୍ଷା, ପି<0.05) |n>9. ମାପ ଦଣ୍ଡ = 50 µm |
ଯଦିଓ ଉର୍ସାଙ୍କର ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ବ୍ୟାହତ କରିବାର କ୍ଷମତା ଅଛି, ଏହାର କାର୍ଯ୍ୟ ପ୍ରଣାଳୀ ସାଧାରଣ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଡିପୋଲାଇମେରାଇଜ୍ ଏଜେଣ୍ଟଠାରୁ ଭିନ୍ନ ହେବ ବୋଲି ଆଶା କରାଯାଏ |ଉଦାହରଣ ସ୍ .ରୁପ, ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଡିପୋଲାଇମେରାଇଜ୍ ଏଜେଣ୍ଟଗୁଡିକର ଅଧିକ ଏକାଗ୍ରତା ଯେପରିକି ଡିସୋପିରାମାଇଡ୍ ଏବଂ ଅରିଜାଲିନ୍ ଏପିଡର୍ମାଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଆନିସୋଟ୍ରୋପିକ୍ ବିସ୍ତାରକୁ ପ୍ରବର୍ତ୍ତାଏ, ଯେତେବେଳେ କି KAND 11 ତାହା କରେ ନାହିଁ |ଏଥିସହ, KAND 11 ଏବଂ ଡିସୋପିରାମାଇଡ୍ର ମିଳିତ ପ୍ରୟୋଗରେ ମିଳିତ ଡିସୋପିରାମାଇଡ୍-ପ୍ରବର୍ତ୍ତିତ ମୂଳ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଏବଂ KAND 11-ପ୍ରେରିତ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଦେଖାଗଲା (ଚିତ୍ର S4) |ଆମେ ମଧ୍ୟ KAND 11 ରେ ହାଇପରସେନ୍ସିଟିଭ୍ ଡିସୋପିରାମାଇଡ୍ 1-1 (phs1-1) ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟର ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରିଥିଲୁ |phs1-1 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ବିହନ, KAND 11 ଧାରଣ କରିଥିବା ଅଗର ମାଧ୍ୟମରେ ବ grown ଼ିଥିବା ଛୋଟ ମୂଳଗୁଡିକ ଡିସୋପିରାମିଡ୍ (ଡିମ୍। S5) ରେ ବ grown ଼ିଥିବା ସମାନ ମୂଳ ଥିଲା |
ଏହା ସହିତ, ଆମେ KAND 11 ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ ବିହନର ମୂଳ ମେରିଷ୍ଟେମ୍ରେ ପ୍ରୋଫେଜ୍ ଜୋନ୍, ସ୍ପିଣ୍ଡଲ୍, ଏବଂ ଫ୍ରାଗମୋପ୍ଲାଷ୍ଟ ପରି ମାଇଟୋଟିକ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ସଂରଚନାକୁ ଦେଖିଲୁ, CDKB2; 1p :: CDKB2; 1-GUS, ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ହ୍ରାସ; ମାଇଟୋଟିକ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ସଂଖ୍ୟା ଦେଖାଗଲା (ଚିତ୍ର .6c) |
ସବ୍ସେଲୁଲାର୍ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ରେ KAND 11 ର ସାଇଟୋଟକ୍ସାଇସିଟି ବର୍ଣ୍ଣିତ କରିବାକୁ, ଆମେ KAND 11 ସହିତ ତମାଖୁ BY-2 ସସପେନ୍ସନ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଚିକିତ୍ସା କରିଥିଲୁ ଏବଂ ସେମାନଙ୍କ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ଦେଖିଲୁ |କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଉପରେ KAND 11 ର ପ୍ରଭାବ ଆକଳନ କରିବାକୁ ଆମେ ପ୍ରଥମେ TANDRFP-TUA6 କୁ ପ୍ରକାଶ କରୁଥିବା BY-2 କୋଷରେ KAND 11 ଯୋଡିଥିଲୁ |ଚିତ୍ର ବିଶ୍ଳେଷଣ ବ୍ୟବହାର କରି କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ସାନ୍ଧ୍ରତାକୁ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହା ସାଇଟୋପ୍ଲାଜାମିକ୍ ପିକ୍ସେଲ ମଧ୍ୟରେ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟାଲ୍ ପିକ୍ସେଲର ଶତକଡ଼ା ପରିମାଣ କରିଥିଲା ​​|ଅନୁସନ୍ଧାନ ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ 50 μM କିମ୍ବା 100 μM KAND 11 ସହିତ 1 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଚିକିତ୍ସା ପରେ, ଘନତା ଯଥାକ୍ରମେ 0.94 ± 0.74% କିମ୍ବା 0.23 ± 0.28% କୁ ହ୍ରାସ ପାଇଥିବାବେଳେ DMSO ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଘନତା 1.61 ± 0.34 ଥିଲା | % (ଚିତ୍ର 7a)ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ଆରାବିଡୋପସିସ୍ ରେ ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ ସହିତ ସମାନ ଅଟେ ଯେ KAND 11 ଚିକିତ୍ସା କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ସର ଡିପୋଲାଇମେରାଇଜେସନ୍ ସୃଷ୍ଟି କରିଥାଏ (ଚିତ୍ର 6b) |KAND 11 ର ସମାନ ଏକାଗ୍ରତା ସହିତ ଚିକିତ୍ସା ପରେ ଆମେ GFP-ABD- ଲେବଲ୍ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟ ସହିତ BY-2 ଲାଇନକୁ ମଧ୍ୟ ପରୀକ୍ଷା କରିଥିଲୁ ଏବଂ ଦେଖିଲୁ ଯେ KAND 11 ଚିକିତ୍ସା ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟକୁ ବ୍ୟାହତ କରିଛି |1 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 50 μM କିମ୍ବା 100 μM KAND 11 ସହିତ ଚିକିତ୍ସା ଯଥାକ୍ରମେ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମାଣ୍ଟ ସାନ୍ଧ୍ରତାକୁ ଯଥାକ୍ରମେ 1.20 ± 0.62% କିମ୍ବା 0.61 ± 0.26% କୁ ହ୍ରାସ କରିଥିଲା, ଯେଉଁଠାରେ DMSO- ଚିକିତ୍ସିତ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଘନତା 1.69 ± 0.51% ଥିଲା (ଚିତ୍ର 2) |7 ବି) |ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ପ୍ରୋପାଇଜାମାଇଡ୍ ର ପ୍ରଭାବ ସହିତ ବିପରୀତ, ଯାହା ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରେ ନାହିଁ, ଏବଂ ଲାଟ୍ରଙ୍କଲିନ୍ ବି, ଏକ ଆକ୍ଟିନ୍ ଡିପୋଲାଇମେରାଇଜର ଯାହା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ସ ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇବ ନାହିଁ (SI ଚିତ୍ର S6) |ଏଥିସହ, କୁମାମୋନାମାଇଡ୍ 1, କୁମାମୋନାମାଇଡ୍ ଏସିଡ୍ 6, କିମ୍ବା KAND 11 ସହିତ ଚିକିତ୍ସା ହେଲା କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଥିବା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇ ନଥିଲା (SI ଚିତ୍ର S7) |ଏହିପରି, KAND 11 ର କାର୍ଯ୍ୟର ପ୍ରଣାଳୀ ଜଣାଶୁଣା ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ ବ୍ୟାଘାତକାରୀଙ୍କଠାରୁ ଭିନ୍ନ ବୋଲି ବିଶ୍ୱାସ କରାଯାଏ |ଏଥିସହ, KAND 11 ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ BY-2 କୋଷଗୁଡିକ ଉପରେ ଆମର ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପିକ୍ ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ KAND 11 ଚିକିତ୍ସା ସମୟରେ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁର ଆରମ୍ଭ ବିଷୟରେ ପ୍ରକାଶ କରିଥିଲା ​​ଏବଂ ଦର୍ଶାଇଥିଲା ଯେ KAND 11 ଚିକିତ୍ସାର 30 ମିନିଟ୍ ପରେ ଇଭାନ୍ସ ନୀଳ ରଙ୍ଗର ମୃତ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଅନୁପାତ ଯଥେଷ୍ଟ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା ନାହିଁ | 50 μM କିମ୍ବା 100 μM KAND ସହିତ 90 ମିନିଟର ଚିକିତ୍ସା ପରେ, ମୃତ କୋଷ ସଂଖ୍ୟା ଯଥାକ୍ରମେ 43.7% କିମ୍ବା 80.1% କୁ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା (ଚିତ୍ର 7c) |ଏକାଠି ନିଆଗଲା, ଏହି ତଥ୍ୟ ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ ଉପନ୍ୟାସ ୟୁରୋସୋଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଡେରିଭେଟିଭ୍ KAND 11 ହେଉଛି ଏକ ଉଦ୍ଭିଦ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟାଲ୍ ଇନହିବିଟର ଯାହାକି ପୂର୍ବରୁ ଅଜ୍ଞାତ କାର୍ଯ୍ୟ ପ୍ରଣାଳୀ |
KAND କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍, ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟ ଏବଂ ତମାଖୁ BY-2 କୋଷଗୁଡ଼ିକର କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମତା ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ |(କ) TagRFP-TUA6 ର ଉପସ୍ଥିତିରେ BY-2 କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲଗୁଡିକର ଭିଜୁଆଲାଇଜେସନ୍ |KAND 11 (50 μM କିମ୍ବା 100 μM) କିମ୍ବା DMSO ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ BY-2 କୋଷଗୁଡିକ କନଫୋକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ଦ୍ୱାରା ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇଥିଲା |25 ସ୍ independent ାଧୀନ କୋଷର ମାଇକ୍ରୋଗ୍ରାଫ୍ ରୁ କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ସାନ୍ଦ୍ରତା ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା |ଅକ୍ଷରଗୁଡ଼ିକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସୂଚାଇଥାଏ (ଟୁକି HSD ପରୀକ୍ଷା, ପି<0.05) |ମାପ ଦଣ୍ଡ = 10 µ ମି।(ଖ) BY-2 କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ କର୍ଟିକାଲ୍ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟଗୁଡିକ GFP-ABD2 ର ଉପସ୍ଥିତିରେ ଭିଜୁଆଲ୍ ହୋଇଛି |KAND 11 (50 μM କିମ୍ବା 100 μM) କିମ୍ବା DMSO ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ BY-2 କୋଷଗୁଡିକ କନଫୋକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ଦ୍ୱାରା ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇଥିଲା |25 ସ୍ independent ାଧୀନ କୋଷର ମାଇକ୍ରୋଗ୍ରାଫ୍ ରୁ କର୍ଟିକାଲ୍ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟର ଘନତା ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା |ଅକ୍ଷରଗୁଡ଼ିକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସୂଚାଇଥାଏ (ଟୁକି HSD ପରୀକ୍ଷା, ପି<0.05) |ମାପ ଦଣ୍ଡ = 10 µ ମି।(ଗ) ଇଭାନ୍ସ ନୀଳ ଦାଗ ଦ୍ୱାରା ମୃତ BY-2 କୋଷଗୁଡ଼ିକର ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ |KAND 11 (50 μM କିମ୍ବା 100 μM) କିମ୍ବା DMSO ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ BY-2 କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଉଜ୍ଜ୍ୱଳ କ୍ଷେତ୍ର ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ଦ୍ୱାରା ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇଥିଲା |n = 3ମାପ ଦଣ୍ଡ = 100 µm |
ନୂତନ ପ୍ରାକୃତିକ ଦ୍ରବ୍ୟର ଆବିଷ୍କାର ଏବଂ ପ୍ରୟୋଗ ମାନବ ଜୀବନର ବିଭିନ୍ନ ଦିଗରେ medicine ଷଧ ଏବଂ କୃଷି କ୍ଷେତ୍ରରେ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଅଗ୍ରଗତି କରିଛି |ପ୍ରାକୃତିକ ସମ୍ପଦରୁ ଉପଯୋଗୀ ଯ ounds ଗିକ ପାଇବା ପାଇଁ Histor ତିହାସିକ ଅନୁସନ୍ଧାନ କରାଯାଇଛି |ବିଶେଷ ଭାବରେ, ଆକ୍ଟିନୋମାଇସେଟ୍ସ ନେମାଟୋଡ ପାଇଁ ଆଣ୍ଟିପାରାସିଟିକ୍ ଆଣ୍ଟିବାୟୋଟିକ୍ ଭାବରେ ଉପଯୋଗୀ ବୋଲି ଜଣାଶୁଣା, ବିଭିନ୍ନ ସେକେଣ୍ଡାରୀ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ଉତ୍ପାଦନ କରିବାର କ୍ଷମତା ହେତୁ ଆଭର୍ମେକ୍ଟିନ୍, ଆଇଭର୍ମେକ୍ଟିନ୍ ଏବଂ ବ୍ଲୋମାଇସିନ୍ ର ଲିଡ୍ ଯ ound ଗିକ ଏବଂ ଏହାର ଉତ୍ପାଦକ, ic ଷଧୀୟ ଭାବରେ ଆଣ୍ଟିକାନ୍ସର୍ ଏଜେଣ୍ଟ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା |ସେହିଭଳି, ଆକ୍ଟିନୋମାଇସେଟ୍ସରୁ ବିଭିନ୍ନ ହରବାଇସିଡାଲ୍ ଯ ounds ଗିକ ଆବିଷ୍କୃତ ହୋଇଛି, ଯାହା ମଧ୍ୟରୁ କେତେକ ବ୍ୟବସାୟିକ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଛି |ତେଣୁ, ପ୍ରାକୃତିକ ଦ୍ରବ୍ୟକୁ ଇଚ୍ଛିତ ଜ bi ବିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସହିତ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ ଆକ୍ଟିନୋମାଇସେଟ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଏକ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ରଣନୀତି ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଏ |ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ, ଆମେ S. werraensis ରୁ ଏକ ନୂତନ ଯ ound ଗିକ, କୁମାମୋନାମାଇଡ୍ ଆବିଷ୍କାର କରି ଏହାକୁ ସଫଳତାର ସହିତ ସିନ୍ଥାଇଜ୍ କରିଛୁ |ଉର୍ସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ହେଉଛି ଉର୍ବେନାମାଇଡ୍ ଏବଂ ଏହାର ଉତ୍ପାଦକମାନଙ୍କର ଏକ ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ମଧ୍ୟବର୍ତ୍ତୀ |ଏହା ଚରିତ୍ରିକ ମୂଳ କୁର୍ଲିଙ୍ଗ୍ ସୃଷ୍ଟି କରିପାରେ, ମଧ୍ୟମରୁ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ହରବାଇସିଡାଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରେ ଏବଂ ଉଦ୍ଭିଦ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ପ୍ରତ୍ୟକ୍ଷ କିମ୍ବା ପରୋକ୍ଷ ଭାବରେ କ୍ଷତି ପହଞ୍ଚାଇପାରେ |ଅବଶ୍ୟ, ଉର୍ମୋଟୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ର କାର୍ଯ୍ୟ ପ୍ରଣାଳୀ ବିଦ୍ୟମାନ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଇନହିବିଟରଠାରୁ ଭିନ୍ନ ହୋଇପାରେ, କାରଣ KAND 11 ମଧ୍ୟ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟକୁ ବ୍ୟାହତ କରିଥାଏ ଏବଂ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁକୁ କାରଣ କରିଥାଏ, ଯାହା ଦ୍ ur ାରା ଉର୍ମୋଟୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଏବଂ ଏହାର ଉତ୍ପାଦକ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟାଲ୍ ଗଠନ ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ |।
ଉର୍ବେନୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ଅଧିକ ବିସ୍ତୃତ ବର୍ଣ୍ଣନା, ଉର୍ବେନୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ର କ mechanism ଶଳକୁ ଭଲ ଭାବରେ ବୁ understand ିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିବ |ବିଶେଷ ଭାବରେ, ପରବର୍ତ୍ତୀ ଲକ୍ଷ୍ୟ ହେଉଛି ୟୁରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଏବଂ ଏହାର ଉତ୍ପାଦକଗୁଡ଼ିକ ସିଧାସଳଖ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଉପରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରନ୍ତି କି ନାହିଁ, କିମ୍ବା ସେମାନଙ୍କର କାର୍ଯ୍ୟ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଅସ୍ଥିରତା ସୃଷ୍ଟି କରେ କି ନାହିଁ ତାହା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ପାଇଁ ୟୁରସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ର କ୍ଷମତାକୁ ଆକଳନ କରିବା |ଏଥିସହ, ଯେଉଁଠାରେ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲଗୁଡିକ ପ୍ରତ୍ୟକ୍ଷ ଲକ୍ଷ୍ୟ ନୁହେଁ, ଉଦ୍ଭିଦ କୋଷରେ ଥିବା ୟୁରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ର କାର୍ଯ୍ୟର ସ୍ଥାନ ଏବଂ ମଲିକୁଲାର୍ ଟାର୍ଗେଟ୍ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଯ ounds ଗିକର ଗୁଣ ଏବଂ ହରବାଇସିଡାଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପରେ ଉନ୍ନତି ଆଣିବା ପାଇଁ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ଉପାୟଗୁଡ଼ିକୁ ବୁ understand ିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିବ |ଆମର ଜ o ବ ସକ୍ରିୟତା ଅନୁସନ୍ଧାନରେ ଆରବୋଡୋପସିସ୍ ଥାଲିଆନା, ତମାଖୁ ଏବଂ ଲିଭରୱର୍ଟ ଭଳି ଉଦ୍ଭିଦର ବୃଦ୍ଧିରେ ୟୁରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ଅନନ୍ୟ ସାଇଟୋଟକ୍ସିକ୍ କ୍ଷମତା ପ୍ରକାଶ ପାଇଥିଲାବେଳେ ଇ.କୋଲି କିମ୍ବା ହେଲା କୋଷଗୁଡ଼ିକ ପ୍ରଭାବିତ ହୋଇନଥିଲେ |ପଶୁ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ପାଇଁ ସାମାନ୍ୟ କିମ୍ବା କ to ଣସି ବିଷାକ୍ତତା ୟୁରସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଉତ୍ପାଦନର ଏକ ସୁବିଧା, ଯଦି ସେଗୁଡିକ ଖୋଲା କୃଷି କ୍ଷେତ୍ରରେ ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ହରବାଇସିଡ୍ ଭାବରେ ବିକଶିତ ହୁଏ |ପ୍ରକୃତରେ, ଯେହେତୁ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲଗୁଡିକ ଇଉକାରିଓଟ୍ସରେ ସାଧାରଣ ସଂରଚନା, ଉଦ୍ଭିଦଗୁଡିକରେ ସେମାନଙ୍କର ମନୋନୀତ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ହରବାଇସିଡ୍ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରମୁଖ ଆବଶ୍ୟକତା |ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ପ୍ରୋପାଇଜାମାଇଡ୍, ଏକ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଡିପୋଲାଇମେରାଇଜ୍ ଏଜେଣ୍ଟ ଯାହା ଟ୍ୟୁବୁଲିନ୍ ସହିତ ସିଧାସଳଖ ବାନ୍ଧେ ଏବଂ ପଲିମେରାଇଜେସନ୍ କୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରେ, ପଶୁ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ କମ୍ ବିଷାକ୍ତତା ହେତୁ ଏକ ହରବାଇସିଡ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |ଡିସୋପିରାମାଇଡର ବିପରୀତରେ, ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ବେନଜାମାଇଡ୍ସର ଭିନ୍ନ ଲକ୍ଷ୍ୟ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଅଛି |ଉଦ୍ଭିଦ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ବ୍ୟତୀତ, RH-4032 କିମ୍ବା ବେନୋଜକ୍ସାମାଇଡ୍ ମଧ୍ୟ ଯଥାକ୍ରମେ ପଶୁ କୋଷ କିମ୍ବା ଓମାଇସେଟ୍ସର ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍କୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିଥାଏ, ଏବଂ ଜାଲିଲାମାଇଡ୍ ଏହାର ଫାଇଟୋଟକ୍ସାଇସିଟି କାରଣରୁ ଫଙ୍ଗିସାଇଡ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ 25,26,27 |ନୂତନ ଆବିଷ୍କୃତ ଭାଲୁ ଏବଂ ଏହାର ଉତ୍ପତ୍ତି ଉଦ୍ଭିଦ ବିରୁଦ୍ଧରେ ମନୋନୀତ ସାଇଟୋଟକ୍ସାଇସିଟି ପ୍ରଦର୍ଶିତ କରେ, କିନ୍ତୁ ଏହା ମନେ ରଖିବାକୁ ହେବ ଯେ ପରବର୍ତ୍ତୀ ପରିବର୍ତ୍ତନଗୁଡିକ ସେମାନଙ୍କର ଲକ୍ଷ୍ୟ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତାକୁ ବଦଳାଇପାରେ, ସମ୍ଭବତ pat ପାଥୋଜେନିକ୍ ଫଙ୍ଗି କିମ୍ବା ଓମାଇସେଟ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପାଇଁ ଅତିରିକ୍ତ ଡେରିଭେଟିଭ୍ ପ୍ରଦାନ କରିପାରନ୍ତି |
ଉର୍ବେନୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ଅନନ୍ୟ ଗୁଣ ଏବଂ ଏହାର ଉତ୍ପାଦକଗୁଡିକ ହର୍ବାସିସାଇଡ୍ ଭାବରେ ବିକାଶ ଏବଂ ଅନୁସନ୍ଧାନ ଉପକରଣ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ଉପଯୋଗୀ |ଉଦ୍ଭିଦ କୋଷର ଆକାରକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବାରେ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନର ଗୁରୁତ୍ୱ ବହୁଳ ଭାବରେ ସ୍ୱୀକୃତିପ୍ରାପ୍ତ |ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ମର୍ଫୋଜେନେସିସ୍କୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଡାଇନାମିକ୍ସକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରି ଉଦ୍ଭିଦଗୁଡିକ କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ସଂଗଠନର ଜଟିଳ ଯନ୍ତ୍ରକ .ଶଳର ବିକାଶ କରିଛନ୍ତି |ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପାଇଁ ବହୁ ସଂଖ୍ୟକ ଅଣୁ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଛି, ଏବଂ ଆନୁସଙ୍ଗିକ ଅନୁସନ୍ଧାନ ଜାରି ରହିଛି 3,4,28 |ଉଦ୍ଭିଦ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଗତିଶୀଳତା ବିଷୟରେ ଆମର ସାମ୍ପ୍ରତିକ ବୁ understanding ାମଣା କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ସଂଗଠନର ଯନ୍ତ୍ରକ fully ଶଳକୁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଭାବରେ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରେ ନାହିଁ |ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଯଦିଓ ଉଭୟ ଡିସୋପିରାମାଇଡ୍ ଏବଂ ଅରିଜାଲିନ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍କୁ ଡିପୋଲାଇମେରାଇଜ୍ କରିପାରନ୍ତି, ଡିସୋପିରାମାଇଡ୍ ମୂଳର ବିକୃତତା ସୃଷ୍ଟି କରୁଥିବାବେଳେ ଓରିଜାଲିନ୍ ଅପେକ୍ଷାକୃତ ସାମାନ୍ୟ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ |ଅଧିକନ୍ତୁ, ଟ୍ୟୁବଲିନ୍ରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ, ଯାହା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍କୁ ସ୍ଥିର କରିଥାଏ, ଏହା ମଧ୍ୟ ଚେରରେ ଡେକ୍ସଟ୍ରୋଟେସନ୍ ସୃଷ୍ଟି କରିଥାଏ, ଯେତେବେଳେ କି ପ୍ୟାକ୍ଲିଟାକ୍ସେଲ୍, ଯାହା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଗତିଶୀଳତାକୁ ମଧ୍ୟ ସ୍ଥିର କରିଥାଏ |ତେଣୁ, ୟୁରୋସୋଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ମଲିକୁଲାର ଲକ୍ଷ୍ୟଗୁଡିକ ଅଧ୍ୟୟନ ଏବଂ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ଉଦ୍ଭିଦ କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ସର ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ବିଷୟରେ ନୂତନ ଜ୍ଞାନ ପ୍ରଦାନ କରିବା ଉଚିତ |ସେହିଭଳି, ରାସାୟନିକ ପଦାର୍ଥର ଭବିଷ୍ୟତର ତୁଳନା, ଯାହା ବିକୃତ ଅଭିବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କରିବାରେ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ, ଯେପରିକି ଡିସୋପିରାମାଇଡ୍ ଏବଂ କମ୍ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ରାସାୟନିକ ପଦାର୍ଥ ଯେପରିକି ଓରିଜାଲିନ୍ କିମ୍ବା କୁମାମୋଟୋରିକ୍ ​​ଏସିଡ୍, ବିକୃତ ଅଭିବୃଦ୍ଧି କିପରି ଘଟେ ତାହାର ସୂଚନା ପ୍ରଦାନ କରିବ |
ଅନ୍ୟ ପଟେ, ପ୍ରତିରକ୍ଷା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟାଲ୍ ପୁନର୍ଗଠନ ହେଉଛି ୟୁରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ସାଇଟୋଟକ୍ସାଇସିଟି ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରିବାର ଅନ୍ୟ ଏକ ସମ୍ଭାବନା |ଏକ ଜୀବାଣୁ ସଂକ୍ରମଣ କିମ୍ବା ଉଦ୍ଭିଦ କୋଷରେ ଏକ ଏଲିସିଟରର ପରିଚୟ ବେଳେବେଳେ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ ନଷ୍ଟ ହୋଇଯାଏ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁ 29 |ଉଦାହରଣ ସ୍ .ରୁପ, ଓମାଇସେଟ୍-ଉତ୍ପାଦିତ କ୍ରିପ୍ଟୋକ୍ସାଣ୍ଟିନ୍ ତମାଖୁ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁ ପୂର୍ବରୁ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଏବଂ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟକୁ ବ୍ୟାହତ କରୁଥିବା ଜଣାଯାଇଛି, ଯାହା କି KAND ଚିକିତ୍ସା 30,31 ସହିତ ଘଟିଥାଏ |ପ୍ରତିରକ୍ଷା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଏବଂ ୟୁରୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଦ୍ uc ାରା ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା ସେଲୁଲାର୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ ସମାନତା ଆମକୁ ଅନୁମାନ କରିବାକୁ ଲାଗିଲା ଯେ ସେମାନେ ସାଧାରଣ ସେଲୁଲାର୍ ପ୍ରକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକୁ ଟ୍ରିଗର କରନ୍ତି, ଯଦିଓ କ୍ରିପ୍ଟୋକ୍ସାଣ୍ଟିନ୍ ଅପେକ୍ଷା ୟୁରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ତୀବ୍ର ଏବଂ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ପ୍ରଭାବ ସ୍ପଷ୍ଟ ଦେଖାଯାଏ |ତଥାପି, ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟଗୁଡିକର ବ୍ୟାଘାତ ସ୍ ont ତ aneous ସ୍ପୃତ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁକୁ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କରିଥାଏ, ଯାହା ସର୍ବଦା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ବ୍ୟାଘାତ ସହିତ ଆସେ ନାହିଁ |ଏହା ସହିତ, ଏହା ଦେଖିବାକୁ ବାକି ରହିଲା ଯେ ପାଥୋଜେନ କିମ୍ବା ଏଲିସିଟର ବିକୃତ ମୂଳ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ଘଟାଏ, ଯେପରି ୟୁରୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଡେରିଭେଟିକ୍ସ କରନ୍ତି |ଏହିପରି, ପ୍ରତିରକ୍ଷା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଏବଂ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ କୁ ସଂଯୋଗ କରୁଥିବା ମଲିକୁଲାର ଜ୍ଞାନ ଏକ ଆକର୍ଷଣୀୟ ସମସ୍ୟା ଅଟେ |ୟୁରୋସୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ସହିତ ଜଡିତ କମ୍ ମଲିକୁଲାର୍ ଓଜନ ଯ ounds ଗିକର ଉପସ୍ଥିତି, ଏବଂ ବିଭିନ୍ନ ଶକ୍ତି ସହିତ ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର ଉତ୍ପାଦନ, ସେମାନେ ଅଜ୍ଞାତ ସେଲୁଲାର୍ ଯନ୍ତ୍ରକ target ଶଳକୁ ଲକ୍ଷ୍ୟ କରିବାର ସୁଯୋଗ ପ୍ରଦାନ କରିପାରନ୍ତି |
ଏକତ୍ର ନିଆଗଲା, ନୂତନ ଯ ounds ଗିକର ଆବିଷ୍କାର ଏବଂ ପ୍ରୟୋଗ ଯାହା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଡାଇନାମିକ୍ସକୁ ମଡ୍ୟୁଲେଟ୍ କରେ, ଉଦ୍ଭିଦ କୋଷ ଆକୃତି ନିର୍ଣ୍ଣୟ ଅନ୍ତର୍ଗତ ଜଟିଳ ମଲିକୁଲାର ଯନ୍ତ୍ରକ address ଶଳର ସମାଧାନ ପାଇଁ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ପଦ୍ଧତି ଯୋଗାଇବ |ଏହି ପରିପ୍ରେକ୍ଷୀରେ, ନିକଟରେ ବିକଶିତ ଯ ound ଗିକ ଉର୍ମୋଟୋନିକ୍ ଏସିଡ୍, ଯାହା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଏବଂ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟ ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ ଏବଂ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁକୁ ପ୍ରବର୍ତ୍ତାଏ, ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏବଂ ଏହି ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଯନ୍ତ୍ରକ between ଶଳ ମଧ୍ୟରେ ସଂଯୋଗକୁ ବୁ ip ାଇବାକୁ ଏକ ସୁଯୋଗ ଦେଇପାରେ |ଏହିପରି, ଉର୍ବେନୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ରାସାୟନିକ ଏବଂ ଜ ological ବିକ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଆମକୁ ମଲିକୁଲାର ନିୟାମକ ପ୍ରଣାଳୀ ବୁ understand ିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିବ ଯାହା ଉଦ୍ଭିଦ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରେ |
S. werraensis MK493-CF1 କୁ 500 mL ବାଫଲେଡ୍ ଏର୍ଲେନମିୟର ଫ୍ଲାସ୍କରେ 110 ଏମଏଲ୍ ବିହନ ମାଧ୍ୟମ ଧାରଣ କରି 2% (w / v) ଗାଲାକ୍ଟୋଜ୍, 2% (w / v) ଏସେନ୍ସ ପେଷ୍ଟ, 1% (w / v) ବାକ୍ଟୋ ରଚନା ।-ସୋଏଟନ୍ (ଥର୍ମୋ ଫିସର ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍, Inc.), 0.5। %% (w / v) ମକା ନିର୍ବାହ (KOGOSTCH Co, Ltd., ଜାପାନ), 0.2% (w / v) (NH4) 2SO4 ଏବଂ 0.2% CaCO3 |(ନିରାକରଣ ପୂର୍ବରୁ pH 7.4) |ବିହନ ସଂସ୍କୃତିଗୁଡିକ 2 ଦିନ ପାଇଁ 27 ° C ରେ ଏକ ଘୂର୍ଣ୍ଣନ ଶେକର୍ (180 rpm) ରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା |କଠିନ ରାଜ୍ୟ ଫେମେଣ୍ଟେସନ୍ ମାଧ୍ୟମରେ ଉତ୍ପାଦନ ଚାଷ |ବିହନ ସଂସ୍କୃତି (7 ମିଲି) ଏକ 500 ମିଲି କେ-1 ଫ୍ଲାସ୍କରେ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ ହୋଇଥିଲା ଯେଉଁଥିରେ 40 ଗ୍ରାମ ଉତ୍ପାଦନ ମାଧ୍ୟମ ରହିଥାଏ ଯାହା 15 ଗ୍ରାମ ଚାପିତ ବାର୍ଲି (MUSO Co., Ltd., Japan) ଏବଂ 25 g deionized water (pH ଆଡଜଷ୍ଟ ହୋଇନାହିଁ) | ନିରାକରଣ ପୂର୍ବରୁ))14 ଦିନ ଅନ୍ଧାରରେ 30 ° C ରେ ଫେମେଣ୍ଟେସନ୍ କରାଯାଇଥିଲା |40 ମିଲି / ବୋତଲ EtOH ଏବଂ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେଡ୍ (1500 ଗ୍ରାମ, 4 ° C, 10 ମିନିଟ୍) ସହିତ ଫେଣ୍ଟେସନ ସାମଗ୍ରୀ ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା |10% MeOH / EtOAc ର ମିଶ୍ରଣ ସହିତ ସଂସ୍କୃତି ଅଲ ern କିକ (60 ମିଲି) ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା |ଏକ ଅବଶିଷ୍ଟ (59.5 ମିଗ୍ରା) ପାଇବା ପାଇଁ ଜ pressure ବ ସ୍ତର ବାଷ୍ପୀଭୂତ ହେଲା, ଯାହାକି ଓଲଟା ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସ୍ତମ୍ଭରେ (SHISEIDO CAPCELL PAK C18 UG120, 5 μm, ID) ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ ଏଲିଟେସନ୍ (0-10 ମିନିଟ୍: 90%) ସହିତ HPLC ଅଧୀନରେ ରହିଲା | 10 mm × ଦ length ର୍ଘ୍ୟ 250 mm) H2O / CH3CN, 10–35 ମିନିଟ୍: 90% H2O / CH3CN ରୁ 70% H2O / CH3CN (ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍), 35–45 ମିନିଟ୍: 90% H2O / EtOH, 45-155 ମିନିଟ୍: 90% H2O / EtOH ରୁ 100% EtOH (ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ (ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍), 155–200 ମିନିଟ୍: 100% EtOH) 1.5 ମିଲି / ମିନିଟ୍ ପ୍ରବାହ ହାରରେ, କୁମାମୋନାମାଇଡ୍ (1, 36.0 ମିଗ୍ରା) ଏକ ଧଳା ଆମୋରଫସ୍ ପାଉଡର ଭାବରେ ପୃଥକ କରାଯାଇଥିଲା |
କୁମାମୋଟାମାଇଡ୍ (୧);1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.93 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 6.76 (dd, J = 4.3, 1.8 Hz 1H), 6.05 (t, J = 3.8 Hz, 1H)), 4.08 (ଗୁଡିକ, 3H);13C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ 161.1, 121.0, 119.9, 112.2, 105.0, 68.3;ESI-HRMS [M + H] +:
ଗବେଷଣା ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ଅନୁମତି ସହିତ ଆରବିଡୋପିସ୍ ବାୟୋଲୋଜିକାଲ୍ ରିସୋର୍ସ ସେଣ୍ଟର (ଏବିଆରସି) ରୁ କଲମ୍ବିଆ ମ seeds ୍ଜି (କଲ-)) ମିଳିଥିଲା ​​|ଆମର ଲାବୋରେଟୋରୀ ଅବସ୍ଥାରେ କୋଲ୍ -0 ମଞ୍ଜି ବିସ୍ତାର କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ରକ୍ଷଣାବେକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ବନ୍ୟ ପ୍ରକାର ଆରାବିଡୋପସିସ୍ ଉଦ୍ଭିଦ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା |ଆରାବିଡୋପସିସ୍ ମଞ୍ଜିଗୁଡିକ ଅର୍ଦ୍ଧ-ଶକ୍ତି ମୁରାଶିଜ୍ ଏବଂ ସ୍କୋଗ୍ ମିଡିଆରେ 2% ସୁକ୍ରୋଜ୍ (ଫୁଜିଫିଲ୍ମ ୱାକୋ ଶୁଦ୍ଧ ରାସାୟନିକ), 0.05% (w / v) 2- (4-ମର୍ଫୋଲିନୋ) ଇଥାନେସୁଲଫୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ (MES) (ଫୁଜିଫିଲ୍ମ ୱାକୋ ଶୁଦ୍ଧ ରାସାୟନିକ) ଧାରଣ କରାଯାଇଥିଲା | )) ଏବଂ 1.5% ଅଗର (ଫୁଜିଫିଲ୍ମ ୱାକୋ ଶୁଦ୍ଧ କେମିକାଲ୍), pH 5.7, 23 ° C ଏବଂ କ୍ରମାଗତ ଆଲୋକ |Phs1-1 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟର ବିହନ ଟି ହାସିମୋଟୋ (ନାରା ଇନଷ୍ଟିଚ୍ୟୁଟ୍ ଅଫ୍ ସାଇନ୍ସ ଆଣ୍ଡ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି) ଦ୍ୱାରା ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଥିଲା |
ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ SR-1 ର ବିହନ ଟି ହାସିମୋଟୋ (ନାରା ଇନଷ୍ଟିଚ୍ୟୁଟ୍ ଅଫ୍ ସାଇନ୍ସ ଆଣ୍ଡ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି) ଦ୍ provided ାରା ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ବନ୍ୟ ପ୍ରକାର ତମାଖୁ ଉଦ୍ଭିଦ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା |ତମାଖୁ ମଞ୍ଜିଗୁଡିକ ଭୂପୃଷ୍ଠକୁ ନିର୍ଜଳ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ବୀଜକୁ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କରିବା ପାଇଁ ତିନି ରାତି ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ନିର୍ଜଳ ପାଣିରେ ଭିଜାଇ ଦିଆଗଲା, ତା’ପରେ 2% ସୁକ୍ରୋଜ୍, 0.05% (w / v) MES, ଏବଂ 0.8% ଜେଲାନ୍ ଗମ୍ (ଫୁଜିଫିଲ୍ମ ୱାକୋ ଶୁଦ୍ଧ ରାସାୟନିକ) ଧାରଣ କରିଥିବା ଏକ ଅର୍ଦ୍ଧ ଶକ୍ତି ସମାଧାନରେ ରଖାଗଲା | ମୁରାଶିଗେ |ଏବଂ Skoog ମାଧ୍ୟମ) pH 5.7 ସହିତ ଏବଂ କ୍ରମାଗତ ଆଲୋକରେ 23 ° C ରେ ଇନକ୍ୟୁବେଡ୍ |
ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ ଟାକ -1 ଟି କୋହଚି (କାଇଟୋ ୟୁନିଭରସିଟି) ଦ୍ provided ାରା ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଲିଭରୱର୍ଟ ଅଧ୍ୟୟନ ପାଇଁ ମାନକ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ୟୁନିଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା |ଜେମା ନିର୍ଜଳ ସଂସ୍କୃତ ଉଦ୍ଭିଦରୁ ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ ତା’ପରେ ଗାମ୍ବର୍ଗ B5 ମାଧ୍ୟମ (ଫୁଜିଫିଲ୍ମ ୱାକୋ ଶୁଦ୍ଧ କେମିକାଲ୍) ରେ 1% ସୁକ୍ରୋଜ୍ ଏବଂ 0.3% ଜେଲାନ୍ ଗମ୍ ଧାରଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ କ୍ରମାଗତ ଆଲୋକରେ 23 ° C ରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା |
ତମାଖୁ BY-2 କୋଷଗୁଡିକ (ନିକୋଟିନା ଟ୍ୟାବାକମ୍ L. cv। ଉଜ୍ଜ୍ୱଳ ହଳଦିଆ 2) ଏସ୍ ହାସେଜାୱା (ଟୋକିଓ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟ) ଦ୍ୱାରା ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଥିଲା |BY-2 କୋଷଗୁଡ଼ିକ ପରିବର୍ତ୍ତିତ ଲିନ୍ସମିୟର୍ ଏବଂ ସ୍କୋଗ୍ ମିଡିଆରେ 95 ଗୁଣା ମିଶ୍ରିତ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ସାପ୍ତାହିକ 2,4-ଡିଚ୍ଲୋରୋଫେନୋକ୍ସିଏସେଟିକ୍ ଏସିଡ୍ 32 ସହିତ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟ କରାଯାଇଥିଲା |ଅନ୍ଧାରରେ 27 ° C ରେ 130 rpm ରେ ଏକ ଘୂର୍ଣ୍ଣନ ଶେକରରେ ସେଲ୍ ନିଲମ୍ବନ ମିଶ୍ରିତ ହୋଇଥିଲା |ସତେଜ ମଧ୍ୟମ ଆକାରର 10 ଗୁଣ ସହିତ କୋଷଗୁଡିକ ଧୋଇ ଦିଅନ୍ତୁ ଏବଂ ସମାନ ମାଧ୍ୟମରେ ପୁନ us ପଠାନ୍ତୁ |BY-2 ଟ୍ରାନ୍ସଜେନିକ୍ ସେଲ୍ ଲାଇନଗୁଡିକ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ମାର୍କର TagRFP-TUA6 କିମ୍ବା ଫୁଲକୋବି ମୋଜାଇକ୍ ଭାଇରସ୍ 35S ପ୍ରୋମୋଟର୍ ଅନ୍ତର୍ଗତ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମାଣ୍ଟ ମାର୍କର GFP-ABD2 କୁ ସ୍ଥିର ଭାବରେ ଦର୍ଶାଇଥାଏ 33,34,35 |ଏହି ସେଲ୍ ଲାଇନଗୁଡିକ ମୂଳ BY-2 ସେଲ୍ ଲାଇନ୍ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ପ୍ରଣାଳୀ ବ୍ୟବହାର କରି ରକ୍ଷଣାବେକ୍ଷଣ ଏବଂ ସିଙ୍କ୍ରୋନାଇଜ୍ ହୋଇପାରିବ |
10% ଭ୍ରୁଣ ବୋଭାଇନ୍ ସେରମ୍, 1.2 ୟୁ / ମିଲ୍ ପେନିସିଲିନ୍ ଏବଂ 5% CO2 ସହିତ 37 ° C ଇନକ୍ୟୁବେଟରରେ 1.2% gg / ml ଷ୍ଟ୍ରେପଟୋମାଇସିନ୍ ସହିତ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟ ହୋଇଥିବା ଡୁଲବେକୋର ପରିବର୍ତ୍ତିତ ଇଗଲ୍ର ମଧ୍ୟମ (DMEM) (ଲାଇଫ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି) ରେ ହେଲା କୋଷଗୁଡିକ ସଂସ୍କୃତି ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା |
ଏହି ପାଣ୍ଡୁଲିପିରେ ବର୍ଣ୍ଣିତ ସମସ୍ତ ପରୀକ୍ଷଣ ଜାପାନର ଜ os ବ ନିରାପତ୍ତା ନିୟମାବଳୀ ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ ଅନୁଯାୟୀ କରାଯାଇଥିଲା |
ଯ ounds ଗିକଗୁଡିକ ଡାଇମେଥାଇଲ୍ ସଲଫକ୍ସାଇଡ୍ (DMSO; ଫୁଜିଫିଲ୍ମ ୱାକୋ ଶୁଦ୍ଧ କେମିକାଲ୍) ରେ ଷ୍ଟକ୍ ସଲ୍ୟୁସନ୍ ଭାବରେ ଦ୍ରବଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଆରବିଡୋପସିସ୍ ଏବଂ ତମାଖୁ କିମ୍ବା ଲିଭରୱର୍ଟ ପାଇଁ ଗାମ୍ବର୍ଗ B5 ମାଧ୍ୟମରେ MS ମାଧ୍ୟମରେ ମିଶ୍ରିତ କରାଯାଇଥିଲା |ମୂଳ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଅନୁଧ୍ୟାନ ପାଇଁ, ପ୍ଲେଟରେ ପ୍ରତି 10 ରୁ ଅଧିକ ମଞ୍ଜି ସୂଚିତ ଯ ounds ଗିକ କିମ୍ବା DMSO ଧାରଣ କରିଥିବା ଅଗର ମାଧ୍ୟମରେ ବୁଣାଯାଇଥିଲା |7 ଦିନ ପାଇଁ ଏକ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ପ୍ରକୋଷ୍ଠରେ ବିହନ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା |ବିହନଗୁଡିକ ଫଟୋଗ୍ରାଫ୍ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ମୂଳର ଲମ୍ବ ମାପ କରାଯାଇଥିଲା |ଆରାବିଡୋପସିସ୍ ଅଙ୍କୁର ଅନୁଧ୍ୟାନ ପାଇଁ, ପ୍ଲେଟରେ ପ୍ରତି 48 ଟି ମଞ୍ଜି 200 μM ଯ ound ଗିକ କିମ୍ବା DMSO ଧାରଣ କରିଥିବା ଅଗର ମାଧ୍ୟମରେ ବୁଣାଯାଇଥିଲା |ଆରାବିଡୋପସିସ୍ ମଞ୍ଜି ଏକ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ପ୍ରକୋଷ୍ଠରେ ବ were ଼ାଗଲା ଏବଂ ଅଙ୍କୁରିତ ବିହନ ସଂଖ୍ୟା ଅଙ୍କୁରିତ ହେବାର 7 ଦିନ ପରେ ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା |ତମାଖୁ ଅଙ୍କୁର ଅନୁଧ୍ୟାନ ପାଇଁ, ପ୍ଲେଟରେ ପ୍ରତି 24 ଟି ମଞ୍ଜି 200 μM KAND କିମ୍ବା DMSO ଧାରଣ କରିଥିବା ଅଗର ମାଧ୍ୟମରେ ବୁଣାଯାଇଥିଲା |ଏକ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ପ୍ରକୋଷ୍ଠରେ ତମାଖୁ ମଞ୍ଜି ବ grown ଼ାଗଲା ଏବଂ ଅଙ୍କୁରିତ ବିହନ ସଂଖ୍ୟା 14 ଦିନ ପରେ ଗଣାଗଲା |ଲିଭରୱର୍ଟ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ନିଷେଧ ଅନୁସନ୍ଧାନ ପାଇଁ, ପ୍ରତ୍ୟେକ ପ୍ଲେଟରୁ 9 ଟି ଭ୍ରୁଣ ଅଗର ମାଧ୍ୟମ ଉପରେ ଆବୃତ ହୋଇ KAND କିମ୍ବା DMSO ର ସୂଚୀତ ଏକାଗ୍ରତା ଧାରଣ କରିଥିଲା ​​ଏବଂ 14 ଦିନ ପାଇଁ ଏକ ଅଭିବୃଦ୍ଧି ପ୍ରକୋଷ୍ଠରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା |
ମୂଳ ମେରିଷ୍ଟମ ସଂଗଠନକୁ ଭିଜୁଆଲାଇଜ୍ କରିବା ପାଇଁ 5 ମିଗ୍ରା / ମିଲି ପ୍ରୋପିଡିୟମ୍ ଆୟୋଡିଡ୍ (PI) ସହିତ ଦାଗଯୁକ୍ତ ବିହନ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ |ଏକ TCS SPE କନଫୋକାଲ୍ ଲେଜର ସ୍କାନିଂ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ୍ (ଲାଇକା ମାଇକ୍ରୋ ସିଷ୍ଟମ୍) ବ୍ୟବହାର କରି ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ଦ୍ୱାରା PI ସଙ୍କେତଗୁଡିକ ଦେଖାଗଲା |
Mala- ଗ୍ଲୁକୁରୋନିଡେଜ୍ (GUS) ସହିତ ମୂଳର ହିଷ୍ଟୋକେମିକାଲ୍ ଦାଗ ମାଲାମି ଏବଂ ବେନଫେ 36 ଦ୍ୱାରା ବର୍ଣ୍ଣିତ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଅନୁଯାୟୀ କରାଯାଇଥିଲା |ରାତାରାତି 90% ଏସିଟୋନରେ ବିହନ ସ୍ଥିର କରାଯାଇଥିଲା, 0.5। Mg ମିଗ୍ରା / ମିଲି 5-ବ୍ରୋମୋ -4-କ୍ଲୋରୋ -3-ଇଣ୍ଡୋଲାଇଲ- β- ଡି-ଗ୍ଲୁକୁରୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ ସହିତ 1 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ GUS ବଫର୍ରେ ରଖାଯାଇ ଏକ ହାଇଡ୍ରେଟେଡ୍ କ୍ଲୋରାଲଡିହାଇଡ୍ ଦ୍ରବଣରେ ରଖାଯାଇଥିଲା |)
ଭୂଲମ୍ବ ଭାବରେ ରଖାଯାଇଥିବା ପ୍ଲେଟରେ ବ grown ଼ୁଥିବା 7 ଦିନର ବିହନ ଉପରେ ମୂଳ କୋଣ ମାପ କରାଯାଇଥିଲା |ଷ୍ଟେପ୍ 6 ରେ ବର୍ଣ୍ଣିତ ପରି ମାଧ୍ୟାକର୍ଷଣ ଭେକ୍ଟର ଦିଗରୁ ମୂଳର କୋଣ ମାପନ୍ତୁ |
ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ 37 ରେ ସାମାନ୍ୟ ପରିବର୍ତ୍ତନ ସହିତ ବର୍ଣ୍ଣନା ଅନୁଯାୟୀ କର୍ଟିକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ସର ବ୍ୟବସ୍ଥା ପାଳନ କରାଯାଇଥିଲା |ଆଣ୍ଟି- tub- ଟୁବୁଲିନ୍ ଆଣ୍ଟିବଡି (KMX-1, ମର୍କ ମିଲିପୋର: MAB3408) ଏବଂ ଆଲେକ୍ସା ଫ୍ଲୋର 488-କଞ୍ଜୁଗେଟେଡ୍ ଆଣ୍ଟି-ମାଉସ୍ IgG (ଥର୍ମୋ ଫିସର ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍: A32723) 1: 1000 ଏବଂ 1: 100 ଦ୍ରବଣରେ ପ୍ରାଥମିକ ଏବଂ ଦ୍ secondary ିତୀୟ ଆଣ୍ଟିବଡି ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା, ଯଥାକ୍ରମେଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ପ୍ରତିଛବିଗୁଡିକ ଏକ TCS SPE କନଫୋକାଲ୍ ଲେଜର ସ୍କାନିଂ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ୍ (ଲାଇକା ମାଇକ୍ରୋ ସିଷ୍ଟମ୍) ବ୍ୟବହାର କରି ଅର୍ଜନ କରାଯାଇଥିଲା |Z-stack ପ୍ରତିଛବିଗୁଡିକ ପ୍ରାପ୍ତ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ନିର୍ମାତାଙ୍କ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ ସର୍ବାଧିକ ତୀବ୍ରତା ପ୍ରୋଜେକ୍ଟ ସୃଷ୍ଟି କରନ୍ତୁ |
ନିର୍ମାତାଙ୍କ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ ସେଲ୍ କାଉଣ୍ଟିଂ କିଟ୍ 8 (ଡୋଜିଣ୍ଡୋ) ବ୍ୟବହାର କରି ହେଲା ସେଲ୍ ବିସ୍ତାର ଅନୁଧ୍ୟାନ କରାଯାଇଥିଲା |
ଇ.କୋଲି DH5α ର ଅଭିବୃଦ୍ଧି 600 nm (OD600) ରେ ଏକ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରଫୋଟୋମିଟର ବ୍ୟବହାର କରି ସଂସ୍କୃତିର କୋଷର ଘନତା ମାପ କରି ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |
ଟ୍ରାନ୍ସଜେନିକ୍ BY-2 କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟାଲ୍ ସଂଗଠନ ଏକ CSU-X1 କନଫୋକାଲ୍ ସ୍କାନିଂ ଡିଭାଇସ୍ (ୟୋକୋଗାୱା) ଏବଂ ଏକ sCMOS କ୍ୟାମେରା (ଜାଇଲା, ଆଣ୍ଡୋର ଟେକ୍ନୋଲୋଜି) ସହିତ ସଜ୍ଜିତ ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଦେଖାଗଲା |ଚିତ୍ର ବିଶ୍ଳେଷଣ ଦ୍ C ାରା ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟାଲ୍ ସାନ୍ଧ୍ରତାକୁ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହା ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟାଲ୍ ପିକ୍ସେଲର ସାଇଟୋପ୍ଲାଜାମିକ୍ ପିକ୍ସେଲ ମଧ୍ୟରେ କନଫୋକାଲ୍ ପ୍ରତିଛବିରେ ଶତକଡ଼ା ପରିମାଣ 38,39 ବର୍ଣ୍ଣନା କରାଯାଇଥିବା ପରି ଇମେଜ୍ ସଫ୍ଟୱେର୍ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲା ​​|
BY-2 କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ, କୋଷର ନିଲମ୍ବନର ଏକ ଆଲିକଟ୍ ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାରେ 0.05% ଇଭାନ୍ସ ନୀଳ ସହିତ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା |ମୃତ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ସିଲେକ୍ଟ ଇଭାନ୍ସ ନୀଳ ଦାଗ ଅକ୍ଷୁର୍ଣ୍ଣ ପ୍ଲାଜମା ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଦ୍ୱାରା ଜୀବନ୍ତ କୋଷରୁ ରଙ୍ଗର ନିର୍ବାହ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ |ଏକ ଉଜ୍ଜ୍ୱଳ କ୍ଷେତ୍ର ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ୍ (BX53, ଅଲିମ୍ପସ୍) ବ୍ୟବହାର କରି ଦାଗିତ କୋଷଗୁଡିକ ଦେଖାଗଲା |
37 ° C ଏବଂ 5% CO2 ରେ ଆର୍ଦ୍ରତା ଇନକ୍ୟୁବେଟରରେ 10% FBS ସହିତ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟ ହୋଇଥିବା DMEM ରେ ହେଲା କୋଷଗୁଡିକ ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଇଥିଲା |100 μM KAND 11, kumamonamic acid 6, kumamonamide 1, 100 ng / ml colcemid (Gibco), କିମ୍ବା 100 ng / ml Nocodmaze (Sigma) ସହିତ 37 ° C ରେ କୋଷଗୁଡିକ ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଇଥିଲା |କୋଷଗୁଡିକ MetOH ସହିତ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଏବଂ ପରେ ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାରେ 5 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଆସେଟେଟ୍ ସହିତ ସ୍ଥିର କରାଯାଇଥିଲା |ଫିକ୍ସଡ୍ କୋଷଗୁଡିକ tub- ଟୁବୁଲିନ୍ ପ୍ରାଥମିକ ଆଣ୍ଟିବଡି (1D4A4, ପ୍ରୋଟେଣ୍ଟେକ୍: 66240-1) ସହିତ 0.5% BSA / PBS ରେ 2 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ମିଶ୍ରିତ କରାଯାଇଥିଲା, TBST ସହିତ 3 ଥର ଧୋଇ ଦିଆଗଲା, ଏବଂ ପରେ ଆଲେକ୍ସା ଫ୍ଲୋର ଛେଳି ଆଣ୍ଟିବଡି ସହିତ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା |488 1 ଘଣ୍ଟା |- ମାଉସ୍ ଆଇଜି (ଥର୍ମୋ ଫିସର ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍: A11001) ଏବଂ 15 ng / ml 4 ′, 6-ଡାଇମିଡିନୋ-2-ଫେନିଲିଣ୍ଡୋଲ (DAPI) 0.5% BSA / PBS ରେ ମିଶ୍ରିତ |TBST ସହିତ ତିନିଥର ଧୋଇବା ପରେ, ନିକୋନ୍ ଏକ୍ଲିପ୍ସ ଟି-ଇ ଓଲଟା ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ୍ ଉପରେ ଦାଗଯୁକ୍ତ କୋଷଗୁଡିକ ଦେଖାଗଲା |ଚିତ୍ରଗୁଡ଼ିକ ମେଟାମ୍ଫର୍ ସଫ୍ଟୱେର୍ (ମଲିକୁଲାର୍ ଡିଭାଇସ୍) ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ ଥଣ୍ଡା ହାମାମାଟସୁ ORCA-R2 CCD କ୍ୟାମେରା ସହିତ କଏଦ କରାଯାଇଥିଲା |