ମଶା ବିରୁଦ୍ଧରେ ପରିବେଶ ଅନୁକୂଳ ଲାର୍ଭିସାଇଡ ଭାବରେ ବନ୍ଧାକୋବି ବିହନ ପାଉଡର ଏବଂ ଏହାର ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକର ଜୈବିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ

ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଭାବରେମଶା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବାଏବଂ ସେମାନଙ୍କ ଦ୍ୱାରା ବହନ କରାଯାଉଥିବା ରୋଗର ପ୍ରକୋପକୁ ହ୍ରାସ କରିବା ପାଇଁ, ରାସାୟନିକ କୀଟନାଶକର ରଣନୈତିକ, ସ୍ଥାୟୀ ଏବଂ ପରିବେଶ ଅନୁକୂଳ ବିକଳ୍ପ ଆବଶ୍ୟକ। ଆମେ କିଛି ବ୍ରାସିକାସି (ପରିବାର ବ୍ରାସିକା) ରୁ ବିହନ ଖାଦ୍ୟକୁ ଇଜିପ୍ଟୀୟ ଏଡିସ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରଣରେ ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ଜୈବିକ ଭାବରେ ନିଷ୍କ୍ରିୟ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସର ଏନଜାଇମାଟିକ୍ ହାଇଡ୍ରୋଲିସିସ୍ ଦ୍ୱାରା ଉତ୍ପାଦିତ ଉଦ୍ଭିଦ-ଉତ୍ପନ୍ନ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ସର ଏକ ଉତ୍ସ ଭାବରେ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିଥିଲୁ (L., 1762)। ପାଞ୍ଚ-ଡିଫ୍ୟାଟେଡ୍ ବିହନ ମିଲ୍ (ବ୍ରାସିକା ଜନ୍ସିଆ (L) ଜରନ୍., 1859, ଲେପିଡିୟମ ସାଟିଭମ୍ ଏଲ୍., 1753, ସିନାପିସ୍ ଆଲବା ଏଲ୍., 1753, ଥ୍ଲାସ୍ପି ଆର୍ଭେନ୍ସ ଏଲ୍., 1753 ଏବଂ ଥ୍ଲାସ୍ପି ଆର୍ଭେନ୍ସ - ତିନୋଟି ମୁଖ୍ୟ ପ୍ରକାରର ତାପଜ ନିଷ୍କ୍ରିୟତା ଏବଂ ଏନଜାଇମାଟିକ୍ ଅବନତି ରାସାୟନିକ ଉତ୍ପାଦ 24 ଘଣ୍ଟା ଏକ୍ସପୋଜରରେ ଏଡିସ୍ ଏଜିପ୍ଟି ଲାର୍ଭାକୁ ଆଲାଇଲ୍ ଆଇସୋଥାୟୋସାଇନେଟ୍, ବେଞ୍ଜାଇଲ୍ ଆଇସୋଥାୟୋସାଇନେଟ୍ ଏବଂ 4-ହାଇଡ୍ରୋକ୍ସିବେଞ୍ଜାଇଲିସୋଥାୟୋସାଇନେଟ୍ ର ବିଷାକ୍ତତା (LC50) ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ପାଇଁ = 0.04 ଗ୍ରାମ/120 ମିଲି dH2O)। ସୋରିଷ, ଧଳା ସୋରିଷ ଏବଂ ଘୋଡ଼ାପୁଞ୍ଜ ପାଇଁ LC50 ମୂଲ୍ୟ। ଆଲିଲ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ (LC50 = 19.35 ppm) ଏବଂ 4 ତୁଳନାରେ ବିହନ ମିଲ୍ ଯଥାକ୍ରମେ 0.05, 0.08 ଏବଂ 0.05 ଥିଲା। -ହାଇଡ୍ରୋକ୍ସିବେଞ୍ଜାଇଲିସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ (LC50 = 55.41 ppm) ଯଥାକ୍ରମେ 0.1 g/120 ml dH2O ଅପେକ୍ଷା ଚିକିତ୍ସା ପରେ 24 ଘଣ୍ଟା ମଧ୍ୟରେ ଲାର୍ଭା ପାଇଁ ଅଧିକ ବିଷାକ୍ତ ଥିଲା। ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡ଼ିକ ଆଲଫାଲଫା ବିହନ ମିଲ୍ ଉତ୍ପାଦନ ସହିତ ସୁସଙ୍ଗତ। ବେଞ୍ଜାଇଲ୍ ଏଷ୍ଟରଗୁଡ଼ିକର ଉଚ୍ଚ ଦକ୍ଷତା ଗଣନା କରାଯାଇଥିବା LC50 ମୂଲ୍ୟ ସହିତ ମେଳ ଖାଏ। ବିହନ ମିଲ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବା ଦ୍ୱାରା ମଶା ନିୟନ୍ତ୍ରଣର ଏକ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ପଦ୍ଧତି ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇପାରିବ। ମଶା ଲାର୍ଭା ବିରୁଦ୍ଧରେ କ୍ରୁସିଫେରସ୍ ବିହନ ପାଉଡର ଏବଂ ଏହାର ମୁଖ୍ୟ ରାସାୟନିକ ଉପାଦାନର ପ୍ରଭାବଶାଳୀତା ଏବଂ କ୍ରୁସିଫେରସ୍ ବିହନ ପାଉଡରରେ ଥିବା ପ୍ରାକୃତିକ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକ ମଶା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରତିଶ୍ରୁତିପୂର୍ଣ୍ଣ ପରିବେଶ ଅନୁକୂଳ ଲାର୍ଭିସାଇଡ ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରିପାରିବ ତାହା ଦର୍ଶାଏ।
ଏଡିସ୍ ମଶା ଦ୍ୱାରା ହେଉଥିବା ଭେକ୍ଟର-ବାହିତ ରୋଗଗୁଡ଼ିକ ଏକ ପ୍ରମୁଖ ବିଶ୍ୱସ୍ତରୀୟ ଜନସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ସମସ୍ୟା ହୋଇ ରହିଛି। ମଶା-ବାହିତ ରୋଗଗୁଡ଼ିକର ପ୍ରକୋପ ଭୌଗୋଳିକ ଭାବରେ ବ୍ୟାପିଥାଏ1,2,3 ଏବଂ ପୁନର୍ବାର ଦେଖାଯାଏ, ଯାହା ଫଳରେ ଗମ୍ଭୀର ରୋଗର ପ୍ରାଦୁର୍ଭାବ 4,5,6,7 ହୁଏ। ମଣିଷ ଏବଂ ପଶୁମାନଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ ରୋଗର ପ୍ରସାର (ଯଥା, ଚିକୁନଗୁନିଆ, ଡେଙ୍ଗୁ, ରିଫ୍ଟ ଭ୍ୟାଲି ଜ୍ୱର, ହଳଦିଆ ଜ୍ୱର ଏବଂ ଜିକା ଭାଇରସ) ଅଭୂତପୂର୍ବ। କେବଳ ଡେଙ୍ଗୁ ଜ୍ୱର ଗ୍ରୀଷ୍ମମଣ୍ଡଳରେ ପ୍ରାୟ 3.6 ବିଲିୟନ ଲୋକଙ୍କୁ ସଂକ୍ରମଣର ବିପଦରେ ପକାଇଥାଏ, ବାର୍ଷିକ ପ୍ରାୟ 390 ନିୟୁତ ସଂକ୍ରମଣ ଘଟେ, ଯାହାର ଫଳସ୍ୱରୂପ ପ୍ରତିବର୍ଷ 6,100-24,300 ମୃତ୍ୟୁ ହୁଏ8। ସଂକ୍ରମିତ ମହିଳାଙ୍କ ଗର୍ଭରେ ଜନ୍ମିତ ପିଲାମାନଙ୍କ ମସ୍ତିଷ୍କ କ୍ଷତି ହେତୁ ଦକ୍ଷିଣ ଆମେରିକାରେ ଜିକା ଭାଇରସର ପୁନର୍ବାର ଆବିର୍ଭାବ ଏବଂ ପ୍ରାଦୁର୍ଭାବ ବିଶ୍ୱବ୍ୟାପୀ ଦୃଷ୍ଟି ଆକର୍ଷଣ କରିଛି2। କ୍ରେମର ଏବଂ ଅନ୍ୟ 3 ଭବିଷ୍ୟବାଣୀ କରିଛନ୍ତି ଯେ ଏଡିସ୍ ମଶାର ଭୌଗୋଳିକ ପରିସର ବିସ୍ତାରିତ ହେବ ଏବଂ 2050 ସୁଦ୍ଧା, ବିଶ୍ୱର ଅଧା ଜନସଂଖ୍ୟା ମଶା-ବାହିତ ଆର୍ବୋଭାଇରସ ଦ୍ୱାରା ସଂକ୍ରମଣର ବିପଦରେ ରହିବ।
ଡେଙ୍ଗୁ ଏବଂ ହଳଦିଆ ଜ୍ୱର ବିରୁଦ୍ଧରେ ସମ୍ପ୍ରତି ବିକଶିତ ଟିକା ବ୍ୟତୀତ, ଅଧିକାଂଶ ମଶାବାହିତ ରୋଗ ବିରୁଦ୍ଧରେ ଟିକା ଏପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ବିକଶିତ ହୋଇନାହିଁ9,10,11। ଟିକା ଏବେ ବି ସୀମିତ ପରିମାଣରେ ଉପଲବ୍ଧ ଏବଂ କେବଳ କ୍ଲିନିକାଲ୍ ପରୀକ୍ଷଣରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ। ମଶାବାହିତ ରୋଗର ପ୍ରସାରକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ କୃତ୍ରିମ କୀଟନାଶକ ବ୍ୟବହାର କରି ମଶାବାହକଙ୍କ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏକ ପ୍ରମୁଖ ରଣନୀତି ହୋଇଛି12,13। ଯଦିଓ କୃତ୍ରିମ କୀଟନାଶକ ମଶା ହତ୍ୟା କରିବାରେ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ, କୃତ୍ରିମ କୀଟନାଶକର ନିରନ୍ତର ବ୍ୟବହାର ଲକ୍ଷ୍ୟହୀନ ଜୀବମାନଙ୍କୁ ନକାରାତ୍ମକ ଭାବରେ ପ୍ରଭାବିତ କରେ ଏବଂ ପରିବେଶକୁ ପ୍ରଦୂଷିତ କରେ14,15,16। ଆହୁରି ଚିନ୍ତାଜନକ ହେଉଛି ରାସାୟନିକ କୀଟନାଶକ ପ୍ରତି ମଶା ପ୍ରତିରୋଧ ବୃଦ୍ଧି କରିବାର ଧାରା17,18,19। କୀଟନାଶକ ସହିତ ଜଡିତ ଏହି ସମସ୍ୟାଗୁଡ଼ିକ ରୋଗବାହକଙ୍କୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଏବଂ ପରିବେଶ ଅନୁକୂଳ ବିକଳ୍ପ ଖୋଜିବାକୁ ତ୍ୱରାନ୍ୱିତ କରିଛି।
କୀଟ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପାଇଁ ଫାଇଟୋପେଷ୍ଟିସାଇଡର ଉତ୍ସ ଭାବରେ ବିଭିନ୍ନ ଉଦ୍ଭିଦ ବିକଶିତ ହୋଇଛି20,21। ଉଦ୍ଭିଦ ପଦାର୍ଥଗୁଡ଼ିକ ସାଧାରଣତଃ ପରିବେଶ ଅନୁକୂଳ କାରଣ ଏଗୁଡ଼ିକ ଜୈବବିଘଟନଶୀଳ ଏବଂ ସ୍ତନ୍ୟପାୟୀ, ମାଛ ଏବଂ ଉଭୟଚର ଭଳି ଅଣ-ଲକ୍ଷ୍ୟ ଜୀବମାନଙ୍କ ପାଇଁ କମ୍ କିମ୍ବା ନଗଣ୍ୟ ବିଷାକ୍ତତା ରହିଛି20,22। ଔଷଧୀୟ ପ୍ରସ୍ତୁତି ମଶାଙ୍କ ବିଭିନ୍ନ ଜୀବନ ପର୍ଯ୍ୟାୟକୁ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଭାବରେ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ ବିଭିନ୍ନ କାର୍ଯ୍ୟ ପ୍ରଣାଳୀ ସହିତ ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର ଜୈବ ସକ୍ରିୟ ଯୌଗିକ ଉତ୍ପାଦନ କରିବାକୁ ଜଣାଶୁଣା23,24,25,26। ଉଦ୍ଭିଦରୁ ପ୍ରାପ୍ତ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକ ଯେପରିକି ଅତ୍ୟାବଶ୍ୟକ ତେଲ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ସକ୍ରିୟ ଉଦ୍ଭିଦ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ ଧ୍ୟାନ ଆକର୍ଷଣ କରିଛି ଏବଂ ମଶା ବାହକମାନଙ୍କୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ ଅଭିନବ ଉପକରଣ ପାଇଁ ପଥ ପ୍ରଶସ୍ତ କରିଛି। ଅତ୍ୟାବଶ୍ୟକ ତେଲ, ମନୋଟରପେନ୍ସ ଏବଂ ସେସ୍କ୍ୱିଟରପେନ୍ସ ପ୍ରତିରୋଧକ, ଖାଦ୍ୟ ପ୍ରତିରୋଧକ ଏବଂ ଓଭିସାଇଡ୍ ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରେ27,28,29,30,31,32,33। ଅନେକ ଉଦ୍ଭିଦ ତେଲ ମଶା ଲାର୍ଭା, ପ୍ୟୁପା ଏବଂ ବୟସ୍କଙ୍କ ମୃତ୍ୟୁ ଘଟାଇଥାଏ34,35,36, ସ୍ନାୟୁ, ଶ୍ୱାସକ୍ରିୟା, ଅନ୍ତଃସ୍ରାବୀ ଏବଂ କୀଟପତଙ୍ଗର ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରଣାଳୀକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିଥାଏ37।
ସାମ୍ପ୍ରତିକ ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ ଜୈବିକ ସକ୍ରିୟ ଯୌଗିକର ଉତ୍ସ ଭାବରେ ସୋରିଷ ଗଛ ଏବଂ ଏହାର ବିହନର ସମ୍ଭାବ୍ୟ ବ୍ୟବହାର ବିଷୟରେ ଅନ୍ତର୍ଦୃଷ୍ଟି ପ୍ରଦାନ କରିଛି। ସୋରିଷ ବିହନ ମିଲ୍ ଏକ ଜୈବିକ ଫ୍ୟୁମିଗାଣ୍ଟ38,39,40,41 ଭାବରେ ପରୀକ୍ଷିତ ହୋଇଛି ଏବଂ ଘାସ ଦମନ42,43,44 ଏବଂ ମାଟି-ବାହିତ ଉଦ୍ଭିଦ ରୋଗଜୀବାଣୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ45,46,47,48,49,50, ଉଦ୍ଭିଦ ପୁଷ୍ଟି ପାଇଁ ମାଟି ସଂଶୋଧନ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଛି। ନେମାଟୋଡ୍ସ 41,51, 52, 53, 54 ଏବଂ କୀଟପତଙ୍ଗ 55, 56, 57, 58, 59, 60। ଏହି ବିହନ ପାଉଡରର କବକନାଶକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଆଇସୋଥିଓସାଇନାଟେସ38,42,60 ନାମକ ଉଦ୍ଭିଦ ସୁରକ୍ଷା ଯୌଗିକକୁ ଦାୟୀ କରାଯାଏ। ଉଦ୍ଭିଦରେ, ଏହି ସୁରକ୍ଷା ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକ ଅଣ-ଜୈବିକ ସକ୍ରିୟ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସ ଭାବରେ ଉଦ୍ଭିଦ କୋଷରେ ସଂରକ୍ଷଣ କରାଯାଏ। ତଥାପି, ଯେତେବେଳେ ଗଛଗୁଡ଼ିକ କୀଟପତଙ୍ଗ ଖାଇବା କିମ୍ବା ରୋଗ ସୃଷ୍ଟିକାରୀ ସଂକ୍ରମଣ ଦ୍ୱାରା କ୍ଷତିଗ୍ରସ୍ତ ହୁଏ, ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍‌ଗୁଡ଼ିକୁ ମାଇରୋସିନେଜ୍ ଦ୍ୱାରା ଜୈବିକ ସକ୍ରିୟ ଆଇସୋଥିଓସାଇନାଟେସ୍‌ରେ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜ୍ କରାଯାଏ55,61। ଆଇସୋଥିଓସାଇନାଟେସ୍ ହେଉଛି ଅସ୍ଥିର ଯୌଗିକ ଯାହାର ବ୍ରଡ-ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରମ୍ ଆଣ୍ଟିମାଇକ୍ରୋବାୟଲ୍ ଏବଂ କୀଟନାଶକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଅଛି ବୋଲି ଜଣାଯାଏ, ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର ଗଠନ, ଜୈବିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ ବିଷୟବସ୍ତୁ ବ୍ରାସିକାସି ପ୍ରଜାତି ମଧ୍ୟରେ ବ୍ୟାପକ ଭାବରେ ଭିନ୍ନ ହୋଇଥାଏ42,59,62,63।
ଯଦିଓ ସୋରିଷ ବିହନ ମିଲ୍ ରୁ ପ୍ରାପ୍ତ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ସ କୀଟନାଶକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ପାଇଁ ଜଣାଶୁଣା, ଚିକିତ୍ସା ଦୃଷ୍ଟିରୁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଆର୍ଥ୍ରୋପଡ୍ ଭେକ୍ଟର ବିରୁଦ୍ଧରେ ଜୈବିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଉପରେ ତଥ୍ୟର ଅଭାବ ଅଛି। ଆମର ଅଧ୍ୟୟନରେ ଏଡିସ୍ ମଶା ବିରୁଦ୍ଧରେ ଚାରୋଟି ଡିଫ୍ୟାଟେଡ୍ ବିହନ ପାଉଡରର ଲାର୍ଭିସାଇଡାଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇଥିଲା। ଏଡିସ୍ ଏଜିପ୍ଟିର ଲାର୍ଭା। ଅଧ୍ୟୟନର ଲକ୍ଷ୍ୟ ଥିଲା ମଶା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପାଇଁ ପରିବେଶ ଅନୁକୂଳ ଜୈବିକ କୀଟନାଶକ ଭାବରେ ସେମାନଙ୍କର ସମ୍ଭାବ୍ୟ ବ୍ୟବହାର ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିବା। ମଶା ଲାର୍ଭା ଉପରେ ଏହି ରାସାୟନିକ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକର ଜୈବିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ବିହନ ମିଲ୍ ର ତିନୋଟି ପ୍ରମୁଖ ରାସାୟନିକ ଉପାଦାନ, ଆଲିଲ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ (AITC), ବେଞ୍ଜାଇଲ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ (BITC), ଏବଂ 4-ହାଇଡ୍ରୋକ୍ସିବେଞ୍ଜାଇଲିସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ (4-HBITC) ମଧ୍ୟ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇଥିଲା। ମଶା ଲାର୍ଭା ବିରୁଦ୍ଧରେ ଚାରୋଟି ବନ୍ଧାକୋବି ବିହନ ପାଉଡର ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର ମୁଖ୍ୟ ରାସାୟନିକ ଉପାଦାନର ପ୍ରଭାବ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିବା ପାଇଁ ଏହା ପ୍ରଥମ ରିପୋର୍ଟ।
ଏଡିସ୍ ଏଜିପ୍ଟି (ରକଫେଲର ଷ୍ଟ୍ରେନ) ର ପରୀକ୍ଷାଗାର କଲୋନୀଗୁଡ଼ିକୁ 26°C, 70% ଆପେକ୍ଷିକ ଆର୍ଦ୍ରତା (RH) ଏବଂ 10:14 ଘଣ୍ଟା (L:D ଫଟୋପିରିଅଡ୍) ରେ ରଖାଯାଉଥିଲା। ମିତ୍ର ହୋଇଥିବା ମାଈମାନଙ୍କୁ ପ୍ଲାଷ୍ଟିକ୍ ପିଞ୍ଜରାରେ (ଉଚ୍ଚତା 11 ସେମି ଏବଂ ବ୍ୟାସ 9.5 ସେମି) ରଖାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ସାଇଟ୍ରେଟେଡ୍ ଗୋମାଂସ ରକ୍ତ ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ ବୋତଲ ଖାଦ୍ୟ ପ୍ରଣାଳୀ ମାଧ୍ୟମରେ ଖାଇବାକୁ ଦିଆଯାଇଥିଲା (ହେମୋଷ୍ଟାଟ୍ ଲାବୋରେଟୋରିଜ୍ ଇନକର୍ପୋରେଟେରିଜ୍, ଡିକ୍ସନ୍, CA, USA)। 37°C ତାପମାତ୍ରା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ସହିତ ଏକ ପରିଚଳିତ ଜଳ ବାଥ ଟ୍ୟୁବ୍ (HAAKE S7, Thermo-Scientific, Waltham, MA, USA) ସହିତ ସଂଯୁକ୍ତ ଏକ ମେମ୍ବ୍ରାନ୍ ମଲ୍ଟି-ଗ୍ଲାସ୍ ଫିଡର (କେମଗ୍ଲାସ୍, ଲାଇଫ୍ ସାଇନ୍ସେସ୍ LLC, ଭାଇନଲ୍ୟାଣ୍ଡ, NJ, USA) ବ୍ୟବହାର କରି ରକ୍ତ ଖାଇବାକୁ ସାଧାରଣ ଭାବରେ ଦିଆଯାଇଥିଲା। ପ୍ରତ୍ୟେକ ଗ୍ଲାସ୍ ଫିଡ୍ ଚାମ୍ବରର ତଳ ଭାଗରେ (କ୍ଷେତ୍ର 154 mm2) ପାରାଫିଲ୍ମ M ର ଏକ ଫିଲ୍ମ ବିସ୍ତାର କରନ୍ତୁ। ତା'ପରେ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଫିଡରକୁ ମିତ୍ର ମାଈ ଥିବା ପିଞ୍ଜରାକୁ ଆଚ୍ଛାଦନ କରୁଥିବା ଉପର ଗ୍ରୀଡ୍ ଉପରେ ରଖାଯାଇଥିଲା। ପାଷ୍ଟର ପିପେଟ୍ (ଫିସରବ୍ରାଣ୍ଡ, ଫିସର ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍, ୱାଲଥାମ୍, ଏମଏ, ୟୁଏସଏ) ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ ଗ୍ଲାସ୍ ଫିଡର ଫନେଲରେ ପ୍ରାୟ 350-400 μl ଗୋମାଂସ ରକ୍ତ ଯୋଡା ଯାଇଥିଲା ଏବଂ ବୟସ୍କ କୃମିଗୁଡ଼ିକୁ ଅତି କମରେ ଗୋଟିଏ ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ନିଷ୍କାସନ କରିବାକୁ ଦିଆଯାଇଥିଲା। ତା'ପରେ ଗର୍ଭବତୀ ମହିଳାମାନଙ୍କୁ 10% ସୁକ୍ରୋଜ୍ ଦ୍ରବଣ ଦିଆଯାଇଥିଲା ଏବଂ ପାଣି ସହିତ ପୃଥକ ଅଲ୍ଟ୍ରା-ସ୍ପଷ୍ଟ ସୋଫଲେ କପ୍ (1.25 ଫ୍ଲୋ oz ଆକାର, ଡାର୍ଟ କଣ୍ଟେନର କର୍ପୋରେସନ୍, ମେସନ, MI, ୟୁଏସଏ) ରେ ଧାଡ଼ିଯୁକ୍ତ ଓଦା ଫିଲ୍ଟର ପେପରରେ ଅଣ୍ଡା ଦେବାକୁ ଅନୁମତି ଦିଆଯାଇଥିଲା। ଅଣ୍ଡା ଧାରଣ କରିଥିବା ଫିଲ୍ଟର ପେପରକୁ ଏକ ସିଲ୍ ବ୍ୟାଗରେ (SC Johnsons, Racine, WI) ରଖନ୍ତୁ ଏବଂ 26°C ତାପମାତ୍ରାରେ ସଂରକ୍ଷଣ କରନ୍ତୁ। ଅଣ୍ଡା ଫୁଟାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ପ୍ରାୟ 200-250 ଲାର୍ଭା ଖରଗୋଶ ଚାଉ (ZuPreem, Premium Natural Products, Inc., Mission, KS, USA) ଏବଂ ଲିଭର ପାଉଡର (MP Biomedicals, LLC, Solon, OH, USA) ମିଶ୍ରଣ ଥିବା ପ୍ଲାଷ୍ଟିକ୍ ଟ୍ରେରେ ପାଳନ କରାଯାଇଥିଲା। ଏବଂ ମାଛ ଫିଲେଟ୍ (TetraMin, Tetra GMPH, Meer, Germany) 2:1:1 ଅନୁପାତରେ। ଆମର ଜୈବ ପରୀକ୍ଷାରେ ଶେଷ ତୃତୀୟ ଇନଷ୍ଟାର ଲାର୍ଭା ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା।
ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ ବ୍ୟବହୃତ ଉଦ୍ଭିଦ ବିହନ ସାମଗ୍ରୀ ନିମ୍ନଲିଖିତ ବାଣିଜ୍ୟିକ ଏବଂ ସରକାରୀ ଉତ୍ସରୁ ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା: ବ୍ରାସିକା ଜନ୍ସିଆ (ବାଦାମୀ ସୋରିଷ-ପାସିଫିକ୍ ଗୋଲ୍ଡ) ଏବଂ ବ୍ରାସିକା ଜନ୍ସିଆ (ଧଳା ସୋରିଷ-ଇଡା ଗୋଲ୍ଡ) ପାସିଫିକ୍ ନର୍ଥୱେଷ୍ଟ ଫାର୍ମର୍ସ କୋଅପରେଟିଭ୍, ୱାଶିଂଟନ୍ ଷ୍ଟେଟ୍, ୟୁଏସଏରୁ; (ଗାର୍ଡେନ୍ କ୍ରେସ୍) କେଲି ସିଡ୍ ଆଣ୍ଡ୍ ହାର୍ଡୱେୟାର କୋ., ପିଓରିଆ, ଆଇଏଲ, ୟୁଏସଏରୁ ଏବଂ ଥ୍ଲାସ୍ପି ଆର୍ଭେନ୍ସ (ଫିଲ୍ଡ ପେନିକ୍ରେସ୍-ଏଲିଜାବେଥ୍) USDA-ARS, ପିଓରିଆ, ଆଇଏଲ, ୟୁଏସଏରୁ; ଅଧ୍ୟୟନରେ ବ୍ୟବହୃତ କୌଣସି ବିହନକୁ କୀଟନାଶକ ସହିତ ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଇ ନଥିଲା। ସମସ୍ତ ବିହନ ସାମଗ୍ରୀ ସ୍ଥାନୀୟ ଏବଂ ଜାତୀୟ ନିୟମାବଳୀ ଅନୁସାରେ ଏବଂ ସମସ୍ତ ପ୍ରାସଙ୍ଗିକ ସ୍ଥାନୀୟ ରାଜ୍ୟ ଏବଂ ଜାତୀୟ ନିୟମାବଳୀ ଅନୁସାରେ ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ ଏବଂ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ ଟ୍ରାନ୍ସଜେନିକ୍ ଉଦ୍ଭିଦ କିସମ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇ ନଥିଲା।
ବ୍ରାସିକା ଜନ୍ସିଆ (PG), ଆଲଫାଲଫା (Ls), ଧଳା ସୋରିଷ (IG), ଥ୍ଲାସ୍ପି ଆର୍ଭେନ୍ସ (DFP) ବିହନକୁ 0.75 mm ଜାଲ ଏବଂ ଷ୍ଟେନଲେସ୍ ଷ୍ଟିଲ୍ ରୋଟର, 12 ଟି ଦାନ୍ତ, 10,000 rpm (ସାରଣୀ 1) ସହିତ ସଜ୍ଜିତ ଏକ Retsch ZM200 ଅଲ୍ଟ୍ରାସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଗାଲ୍ ମିଲ୍ (Retsch, Haan, ଜର୍ମାନୀ) ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ ସୂକ୍ଷ୍ମ ପାଉଡରରେ ପେଡ଼ି କରାଯାଇଥିଲା। ଭୂମି ବିହନ ପାଉଡରକୁ ଏକ କାଗଜ ଥିମ୍ବଲ୍‌କୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 24 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ Soxhlet ଉପକରଣରେ ହେକ୍ସେନ ସହିତ ଡିଫ୍ୟାଟ୍ କରାଯାଇଥିଲା। ଡିଫ୍ୟାଟ୍ ହୋଇଥିବା କ୍ଷେତ୍ର ସୋରିଷର ଏକ ଉପନମୁନାକୁ 1 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 100 °C ରେ ଉତ୍ତାପ ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଇଥିଲା ଯାହା ଦ୍ୱାରା ମାଇରୋସିନେଜ୍ ବିକୃତ ହୋଇଯାଏ ଏବଂ ଜୈବିକ ଭାବରେ ସକ୍ରିୟ ଆଇସୋଥିଓସାଇନାଟ୍ସ ଗଠନ ପାଇଁ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସର ଜଳବିକରଣକୁ ରୋକାଯାଇପାରିବ। ମାଇରୋସିନେଜ୍ ବିକୃତ ହୋଇ ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଭାବରେ ତାପ-ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଇଥିବା ହର୍ସଟେଲ୍ ବିହନ ପାଉଡର (DFP-HT) ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା।
ପୂର୍ବରୁ ପ୍ରକାଶିତ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ 64 ଅନୁଯାୟୀ ଉଚ୍ଚ-କର୍ମଦକ୍ଷତା ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି (HPLC) ବ୍ୟବହାର କରି ଡିଫ୍ୟାଟେଡ୍ ବିହନ ଭୋଜନର ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ପରିମାଣ ତ୍ରିପ୍ରତିକୃତିରେ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା। ସଂକ୍ଷେପରେ, ଡିଫ୍ୟାଟେଡ୍ ବିହନ ପାଉଡରର 250 ମିଗ୍ରା ନମୁନାରେ 3 ମିଲି ମିଥାନଲ୍ ଯୋଡା ଯାଇଥିଲା। ପ୍ରତ୍ୟେକ ନମୁନାକୁ 30 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଜଳ ସ୍ନାନରେ ସୋନିକେଟ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 23°C ତାପମାତ୍ରାରେ 16 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଅନ୍ଧାରରେ ଛାଡି ଦିଆଯାଇଥିଲା। ଜୈବିକ ସ୍ତରର 1 ମିଲି ଆଲିକୋଟ୍ ତା'ପରେ ଏକ 0.45 μm ଫିଲ୍ଟର ମାଧ୍ୟମରେ ଏକ ଅଟୋସାମ୍ପଲରରେ ଫିଲ୍ଟର କରାଯାଇଥିଲା। ଏକ ଶିମାଡଜୁ HPLC ସିଷ୍ଟମ (ଦୁଇଟି LC 20AD ପମ୍ପ; SIL 20A ଅଟୋସାମ୍ପଲର; DGU 20A ଡିଗାସେର୍ସ; 237 nm ରେ ନିରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ SPD-20A UV-VIS ଡିଟେକ୍ଟର; ଏବଂ CBM-20A ଯୋଗାଯୋଗ ବସ୍ ମଡ୍ୟୁଲ୍) ଉପରେ ଚାଲିବା ସହିତ, ବିହନ ଭୋଜନର ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ପରିମାଣ ତ୍ରିପ୍ରତିକୃତିରେ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା। ଶିମାଡଜୁ LC ସମାଧାନ ସଫ୍ଟୱେର୍ ସଂସ୍କରଣ 1.25 (ଶିମାଡଜୁ କର୍ପୋରେସନ୍, କଲମ୍ବିଆ, MD, USA) ବ୍ୟବହାର କରି। ସ୍ତମ୍ଭଟି ଏକ C18 ଇନର୍ଟସିଲ୍ ରିଭର୍ସ ଫେଜ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ଥିଲା (250 mm × 4.6 mm; RP C-18, ODS-3, 5u; GL ସାଇନ୍ସେସ୍, Torrance, CA, USA)। ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ମୋବାଇଲ୍ ଫେଜ୍ ଅବସ୍ଥା 12% ମିଥାନଲ୍/88% 0.01 M ଟେଟ୍ରାବ୍ୟୁଟିଲାମୋନିୟମ୍ ହାଇଡ୍ରୋକ୍ସାଇଡ୍ ପାଣିରେ (TBAH; ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍, ସେଣ୍ଟ ଲୁଇସ୍, MO, USA) ରେ 1 mL/ମିନିଟ୍ ପ୍ରବାହ ହାର ସହିତ ସ୍ଥିର କରାଯାଇଥିଲା। 15 μl ନମୁନା ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ପରେ, ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଅବସ୍ଥା 20 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ବଜାୟ ରଖାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ ତା’ପରେ ଦ୍ରାବକ ଅନୁପାତ 100% ମିଥାନଲ୍ ରେ ଆଡଜଷ୍ଟ କରାଯାଇଥିଲା, ମୋଟ ନମୁନା ବିଶ୍ଳେଷଣ ସମୟ 65 ମିନିଟ୍ ଥିଲା। ଡିଫ୍ୟାଟେଡ୍ ବିହନ ଭୋଜନର ସଲଫର ପରିମାଣ ଆକଳନ କରିବା ପାଇଁ ସଦ୍ୟ ପ୍ରସ୍ତୁତ ସିନାପାଇନ୍, ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ଏବଂ ମାଇରୋସିନ୍ ମାନକ (ସିଗ୍ମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍, ସେଣ୍ଟ ଲୁଇସ୍, MO, USA) ର ସିରିଏଲ୍ ଡାଇଲ୍ୟୁସନ୍ ଦ୍ୱାରା ଏକ ମାନକ କର୍ଭ (nM/mAb ଆଧାରିତ) ସୃଷ୍ଟି କରାଯାଇଥିଲା। ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସ। ନମୁନାରେ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ସାନ୍ଦ୍ରତାକୁ OpenLAB CDS ChemStation ସଂସ୍କରଣ (C.01.07 SR2 [255]) ବ୍ୟବହାର କରି ସମାନ ସ୍ତମ୍ଭ ସହିତ ସଜ୍ଜିତ ଏବଂ ପୂର୍ବରୁ ବର୍ଣ୍ଣିତ ପଦ୍ଧତି ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ Agilent 1100 HPLC (Agilent, Santa Clara, CA, USA) ରେ ପରୀକ୍ଷିତ କରାଯାଇଥିଲା। ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ସାନ୍ଦ୍ରତା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା; HPLC ସିଷ୍ଟମ ମଧ୍ୟରେ ତୁଳନୀୟ ହେବ।
ଆଲିଲ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନାଟ୍ (୯୪%, ସ୍ଥିର) ଏବଂ ବେଞ୍ଜାଇଲ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନାଟ୍ (୯୮%) ଫିଶର୍ ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍ (ଥର୍ମୋ ଫିଶର୍ ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍, ୱାଲଥାମ୍, ଏମଏ, ୟୁଏସ୍ଏ) ରୁ କିଣାଯାଇଥିଲା। ୪-ହାଇଡ୍ରୋକ୍ସିବେଞ୍ଜାଇଲିସୋଥିଓସାଇନାଟ୍ କେମକ୍ରୁଜ୍ (ସାଣ୍ଟା କ୍ରୁଜ୍ ବାୟୋଟେକ୍ନୋଲୋଜି, ସିଏ, ୟୁଏସ୍ଏ) ରୁ କିଣାଯାଇଥିଲା। ମାଇରୋସିନେଜ୍ ଦ୍ୱାରା ଏନଜାଇମାଟିକ୍ ଭାବରେ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜ୍ ହେଲେ, ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସ, ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସ ଏବଂ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସ ଯଥାକ୍ରମେ ଆଲିଲ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନାଟ୍, ବେଞ୍ଜାଇଲ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନାଟ୍ ଏବଂ ୪-ହାଇଡ୍ରୋକ୍ସିବେଞ୍ଜାଇଲିସୋଥିଓସାଇନାଟ୍ ଗଠନ କରନ୍ତି।
Muturi et al. 32 ପଦ୍ଧତି ଅନୁଯାୟୀ ପରିବର୍ତ୍ତନ ସହିତ ପ୍ରୟୋଗଶାଳା ଜୈବ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇଥିଲା। ଅଧ୍ୟୟନରେ ପାଞ୍ଚଟି କମ୍ ଚର୍ବି ବିଶିଷ୍ଟ ବିହନ ଖାଦ୍ୟ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା: DFP, DFP-HT, IG, PG ଏବଂ Ls। 120 mL ଡିଆୟୋନାଇଜଡ୍ ପାଣି (dH2O) ଧାରଣ କରିଥିବା ଏକ 400 mL ଡିସପୋଜେବଲ୍ ତିନି-ପଥ ବିକର (VWR ଇଣ୍ଟରନ୍ୟାସନାଲ୍, LLC, ରାଡନର୍, PA, USA) ରେ କୋଡ଼ିଏଟି ଲାର୍ଭା ରଖାଯାଇଥିଲା। ମଶା ଲାର୍ଭା ବିଷାକ୍ତତା ପାଇଁ ସାତଟି ବିହନ ଖାଦ୍ୟ ସାନ୍ଦ୍ରତା ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇଥିଲା: 0.01, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1 ଏବଂ 0.12 ଗ୍ରାମ ବିହନ ଖାଦ୍ୟ/120 ml dH2O DFP ବିହନ ଖାଦ୍ୟ, DFP-HT, IG ଏବଂ PG ପାଇଁ। ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଜୈବ ପରୀକ୍ଷା ସୂଚିତ କରେ ଯେ ଡିଫ୍ୟାଟେଡ୍ Ls ବିହନ ଅଟା ପରୀକ୍ଷିତ ଅନ୍ୟ ଚାରୋଟି ବିହନ ଅଟା ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ ବିଷାକ୍ତ। ତେଣୁ, ଆମେ Ls ବିହନ ଭୋଜନର ସାତଟି ଚିକିତ୍ସା ସାନ୍ଦ୍ରତାକୁ ନିମ୍ନଲିଖିତ ସାନ୍ଦ୍ରତା ସହିତ ସଜାଡ଼ିଛୁ: 0.015, 0.025, 0.035, 0.045, 0.055, 0.065, ଏବଂ 0.075 g/120 mL dH2O।
ପରୀକ୍ଷା ପରିସ୍ଥିତିରେ ସାଧାରଣ କୀଟପତଙ୍ଗ ମୃତ୍ୟୁହାର ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ ପାଇଁ ଏକ ଚିକିତ୍ସାହୀନ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଗୋଷ୍ଠୀ (dH20, କୌଣସି ବିହନ ଖାଦ୍ୟ ପରିପୂରକ ନାହିଁ) ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରତ୍ୟେକ ବିହନ ଖାଦ୍ୟ ପାଇଁ ବିଷାକ୍ତ ଜୈବ ପରୀକ୍ଷାରେ ତିନୋଟି ପ୍ରତିକୃତି ତିନି-ଢାଲ ବିକର (ପ୍ରତି ବିକରରେ 20 ବିଳମ୍ବ ତୃତୀୟ ଇନଷ୍ଟାର ଲାର୍ଭା) ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ ଥିଲା, ମୋଟ 108 ଭାଏଲ ପାଇଁ। ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଇଥିବା ପାତ୍ରଗୁଡ଼ିକୁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ (20-21°C) ସଂରକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଚିକିତ୍ସା ସାନ୍ଦ୍ରତା ସହିତ 24 ଏବଂ 72 ଘଣ୍ଟା ନିରନ୍ତର ସଂସ୍ପର୍ଶରେ ଲାର୍ଭା ମୃତ୍ୟୁହାର ରେକର୍ଡ କରାଯାଇଥିଲା। ଯଦି ମଶାଙ୍କ ଶରୀର ଏବଂ ଉପାଙ୍ଗଗୁଡ଼ିକୁ ଏକ ପତଳା ଷ୍ଟେନଲେସ୍ ଷ୍ଟିଲ୍ ସ୍ପାଟୁଲା ସହିତ ଛିଣ୍ଡାଇ କିମ୍ବା ସ୍ପର୍ଶ କଲେ ଗତି ନହୁଏ, ତେବେ ମଶା ଲାର୍ଭାକୁ ମୃତ ବୋଲି ବିବେଚନା କରାଯାଏ। ମୃତ ଲାର୍ଭା ସାଧାରଣତଃ ପାତ୍ରର ତଳ ଭାଗରେ କିମ୍ବା ପାଣି ପୃଷ୍ଠରେ ଏକ ପୃଷ୍ଠ କିମ୍ବା ଭେଣ୍ଟ୍ରାଲ୍ ସ୍ଥିତିରେ ଗତିହୀନ ରହିଥାଏ। ଲାର୍ଭାର ବିଭିନ୍ନ ଗୋଷ୍ଠୀ ବ୍ୟବହାର କରି ପରୀକ୍ଷଣକୁ ଭିନ୍ନ ଭିନ୍ନ ଦିନରେ ତିନିଥର ପୁନରାବୃତ୍ତି କରାଯାଇଥିଲା, ପ୍ରତ୍ୟେକ ଚିକିତ୍ସା ସାନ୍ଦ୍ରତା ସହିତ ସମ୍ପ୍ରସାରିତ ମୋଟ 180 ଲାର୍ଭା ପାଇଁ।
ମଶା ଲାର୍ଭା ପ୍ରତି AITC, BITC, ଏବଂ 4-HBITC ର ବିଷାକ୍ତତା ସମାନ ବାୟୋପରୀକ୍ଷଣ ପଦ୍ଧତି ବ୍ୟବହାର କରି କିନ୍ତୁ ଭିନ୍ନ ଚିକିତ୍ସା ସହିତ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରତ୍ୟେକ ରାସାୟନିକ ପଦାର୍ଥ ପାଇଁ 100,000 ppm ଷ୍ଟକ୍ ଦ୍ରବଣ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ ଯାହା 2-mL ସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଜ୍ ଟ୍ୟୁବ୍‌ରେ 900 µL ପରମ ଇଥାନଲ୍‌ରେ 100 µL ରାସାୟନିକ ପଦାର୍ଥ ମିଶାଇ ଏବଂ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ମିଶ୍ରଣ ପାଇଁ 30 ସେକେଣ୍ଡ ପାଇଁ ହଲାଇ ପୂର୍ଣ୍ଣ ଭାବରେ ମିଶ୍ରଣ କରିଥାଏ। ଆମର ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ବାୟୋପରୀକ୍ଷଣ ଆଧାରରେ ଚିକିତ୍ସା ସାନ୍ଦ୍ରତା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହା BITC କୁ AITC ଏବଂ 4-HBITC ଅପେକ୍ଷା ବହୁତ ଅଧିକ ବିଷାକ୍ତ ବୋଲି ପାଇଥିଲା। ବିଷାକ୍ତତା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ପାଇଁ, BITC ର 5 ସାନ୍ଦ୍ରତା (1, 3, 6, 9 ଏବଂ 12 ppm), AITC ର 7 ସାନ୍ଦ୍ରତା (5, 10, 15, 20, 25, 30 ଏବଂ 35 ppm) ଏବଂ 4-HBITC ର 6 ସାନ୍ଦ୍ରତା (15, 15, 20, 25, 30 ଏବଂ 35 ppm) ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ। 30, 45, 60, 75 ଏବଂ 90 ppm)। ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଚିକିତ୍ସାରେ 108 μL ପରମ ଇଥାନଲ୍ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦିଆଯାଇଥିଲା, ଯାହା ରାସାୟନିକ ଚିକିତ୍ସାର ସର୍ବାଧିକ ପରିମାଣ ସହିତ ସମାନ। ଉପରୋକ୍ତ ପରି ବାୟୋଏସେସ୍ ପୁନରାବୃତ୍ତି କରାଯାଇଥିଲା, ପ୍ରତି ଚିକିତ୍ସା ସାନ୍ଦ୍ରତାରେ ମୋଟ 180 ଲାର୍ଭା ପ୍ରକାଶିତ ହୋଇଥିଲା। 24 ଘଣ୍ଟା ନିରନ୍ତର ଏକ୍ସପୋଜର ପରେ AITC, BITC, ଏବଂ 4-HBITC ର ପ୍ରତ୍ୟେକ ସାନ୍ଦ୍ରତା ପାଇଁ ଲାର୍ଭା ମୃତ୍ୟୁହାର ରେକର୍ଡ କରାଯାଇଥିଲା।
ଲଗ୍-ପରିବର୍ତ୍ତିତ ସାନ୍ଦ୍ରତା ଏବଂ ଡୋଜ୍-ମୃତ୍ୟୁ ବକ୍ର ପାଇଁ ଘାତକ ଡୋଜ୍ ଅନୁପାତ ପାଇଁ ଆତ୍ମବିଶ୍ୱାସ ଅନ୍ତରାଳ ଉପରେ ଆଧାରିତ 50% ଘାତକ ସାନ୍ଦ୍ରତା (LC50), 90% ଘାତକ ସାନ୍ଦ୍ରତା (LC90), ସ୍ଲୋପ୍, ଘାତକ ଡୋଜ୍ ଗୁଣାଙ୍କ ଏବଂ 95% ଘାତକ ସାନ୍ଦ୍ରତା ଗଣନା କରିବା ପାଇଁ ପୋଲୋ ସଫ୍ଟୱେର୍ (ପୋଲୋ ପ୍ଲସ୍, ଲିଓରା ସଫ୍ଟୱେର୍, ସଂସ୍କରଣ 1.0) ବ୍ୟବହାର କରି 65 ଡୋଜ୍-ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ମୃତ୍ୟୁହାର ତଥ୍ୟର ପ୍ରୋବିଟ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। ମୃତ୍ୟୁହାର ତଥ୍ୟ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଚିକିତ୍ସା ସାନ୍ଦ୍ରତାରେ ପ୍ରକାଶିତ 180 ଲାର୍ଭାର ମିଳିତ ପ୍ରତିକୃତି ତଥ୍ୟ ଉପରେ ଆଧାରିତ। ପ୍ରତ୍ୟେକ ବିହନ ଭୋଜନ ଏବଂ ପ୍ରତ୍ୟେକ ରାସାୟନିକ ଉପାଦାନ ପାଇଁ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପୃଥକ ଭାବରେ କରାଯାଇଥିଲା। ଘାତକ ଡୋଜ୍ ଅନୁପାତର 95% ଆତ୍ମବିଶ୍ୱାସ ଅନ୍ତରାଳ ଉପରେ ଆଧାରିତ, ମଶା ଲାର୍ଭା ପ୍ରତି ବିଷାକ୍ତତାକୁ ଯଥେଷ୍ଟ ଭିନ୍ନ ବୋଲି ବିବେଚନା କରାଯାଇଥିଲା, ତେଣୁ 1 ମୂଲ୍ୟ ଧାରଣ କରିଥିବା ଏକ ଆତ୍ମବିଶ୍ୱାସ ଅନ୍ତରାଳ ଯଥେଷ୍ଟ ଭିନ୍ନ ନଥିଲା, P = 0.0566।
ଡିଫ୍ୟାଟେଡ୍ ବିହନ ମଇଦା DFP, IG, PG ଏବଂ Ls ରେ ପ୍ରମୁଖ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ପାଇଁ HPLC ଫଳାଫଳଗୁଡ଼ିକ ସାରଣୀ 1 ରେ ତାଲିକାଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଛି। ପରୀକ୍ଷିତ ବିହନ ମଇଦାରେ ପ୍ରମୁଖ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ଗୁଡ଼ିକ DFP ଏବଂ PG ବ୍ୟତୀତ ଭିନ୍ନ ଥିଲା, ଯେଉଁଥିରେ ଉଭୟ ମାଇରୋସିନେଜ୍ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ଥାଏ। PG ରେ ମାଇରୋସିନିନ୍ ପରିମାଣ DFP ତୁଳନାରେ ଅଧିକ ଥିଲା, ଯଥାକ୍ରମେ 33.3 ± 1.5 ଏବଂ 26.5 ± 0.9 mg/g। Ls ବିହନ ପାଉଡରରେ 36.6 ± 1.2 mg/g ଗ୍ଲୁକୋଗ୍ଲାଇକୋନ୍ ଥାଏ, ଯେତେବେଳେ IG ବିହନ ପାଉଡରରେ 38.0 ± 0.5 mg/g ସିନାପିନ୍ ଥାଏ।
ଡିଫ୍ୟାଟେଡ୍ ବିହନ ମିଲ୍ ସହିତ ଚିକିତ୍ସା କରାଯିବା ସମୟରେ Ae. Aedes aegypti ମଶାର ଲାର୍ଭା ମରାଯାଇଥିଲା, ଯଦିଓ ଚିକିତ୍ସାର ପ୍ରଭାବ ଉଦ୍ଭିଦ ପ୍ରଜାତି ଉପରେ ନିର୍ଭର କରି ଭିନ୍ନ ଥିଲା। କେବଳ DFP-NT 24 ଏବଂ 72 ଘଣ୍ଟା ସଂସ୍ପର୍ଶରେ ଆସିବା ପରେ ମଶା ଲାର୍ଭା ପାଇଁ ବିଷାକ୍ତ ନଥିଲା (ସାରଣୀ 2)। ସକ୍ରିୟ ବିହନ ପାଉଡର ବିଷାକ୍ତତା ବର୍ଦ୍ଧିତ ସାନ୍ଦ୍ରତା ସହିତ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା (ଚିତ୍ର 1A, B)। 24-ଘଣ୍ଟା ଏବଂ 72-ଘଣ୍ଟା ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନରେ LC50 ମୂଲ୍ୟର ଘାତକ ଡୋଜ୍ ଅନୁପାତର 95% CI ଉପରେ ଆଧାର କରି ମଶା ଲାର୍ଭା ପାଇଁ ବିଷାକ୍ତତା ଯଥେଷ୍ଟ ଭିନ୍ନ ହୋଇଥିଲା (ସାରଣୀ 3)। 24 ଘଣ୍ଟା ପରେ, Ls ବିହନ ମିଲ୍ ର ବିଷାକ୍ତ ପ୍ରଭାବ ଅନ୍ୟ ବିହନ ମିଲ୍ ଚିକିତ୍ସା ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ ଥିଲା, ଲାର୍ଭା ପାଇଁ ସର୍ବାଧିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ ସର୍ବାଧିକ ବିଷାକ୍ତତା (LC50 = 0.04 g/120 ml dH2O) ସହିତ। IG, Ls ଏବଂ PG ବିହନ ପାଉଡର ଚିକିତ୍ସା ତୁଳନାରେ 24 ଘଣ୍ଟାରେ ଲାର୍ଭା DFP ପ୍ରତି କମ୍ ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ଥିଲେ, LC50 ମୂଲ୍ୟ ଯଥାକ୍ରମେ 0.115, 0.04 ଏବଂ 0.08 g/120 ml dH2O ଥିଲା, ଯାହା LC50 ମୂଲ୍ୟ ଅପେକ୍ଷା ପରିସଂଖ୍ୟାନଗତ ଭାବରେ ଅଧିକ ଥିଲା। 0.211 g/120 ml dH2O (ସାରଣୀ 3)। DFP, IG, PG ଏବଂ Ls ର LC90 ମୂଲ୍ୟ ଯଥାକ୍ରମେ 0.376, 0.275, 0.137 ଏବଂ 0.074 g/120 ml dH2O ଥିଲା (ସାରଣୀ 2)। DPP ର ସର୍ବାଧିକ ସାନ୍ଦ୍ରତା 0.12 g/120 ml dH2O ଥିଲା। 24 ଘଣ୍ଟା ମୂଲ୍ୟାୟନ ପରେ, ହାରାହାରି ଲାର୍ଭା ମୃତ୍ୟୁହାର ମାତ୍ର 12% ଥିଲା, ଯେତେବେଳେ IG ଏବଂ PG ଲାର୍ଭାର ହାରାହାରି ମୃତ୍ୟୁହାର ଯଥାକ୍ରମେ 51% ଏବଂ 82% ରେ ପହଞ୍ଚିଥିଲା। ୨୪ ଘଣ୍ଟାର ମୂଲ୍ୟାୟନ ପରେ, ସର୍ବାଧିକ Ls ବିହନ ଖାଦ୍ୟ ଚିକିତ୍ସା (୦.୦୭୫ ଗ୍ରାମ/୧୨୦ ମିଲି dH2O) ପାଇଁ ହାରାହାରି ଲାର୍ଭା ମୃତ୍ୟୁହାର ୯୯% ଥିଲା (ଚିତ୍ର ୧କ)।
Ae. ଇଜିପ୍ଟୀୟ ଲାର୍ଭା (3ୟ ଇନଷ୍ଟାର ଲାର୍ଭା) ର ଡୋଜ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା (ପ୍ରୋବିଟ୍) ରୁ ଚିକିତ୍ସା ପରେ 24 ଘଣ୍ଟା (A) ଏବଂ 72 ଘଣ୍ଟା (B) ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ବିହନ ଭୋଜନ ସାନ୍ଦ୍ରତା ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ମୃତ୍ୟୁ କର୍ଭ ଆକଳନ କରାଯାଇଥିଲା। ବିନ୍ଦୁଯୁକ୍ତ ରେଖା ବିହନ ଭୋଜନ ଚିକିତ୍ସାର LC50 କୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ। DFP Thlaspi arvense, DFP-HT ହିଟ୍ ନିଷ୍କ୍ରିୟ Thlaspi arvense, IG Sinapsis alba (Ida Gold), PG Brassica juncea (Pacific Gold), Ls Lepidium sativum।
୭୨ ଘଣ୍ଟା ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନରେ, DFP, IG ଏବଂ PG ବିହନ ଭୋଜନର LC50 ମୂଲ୍ୟ ଯଥାକ୍ରମେ 0.111, 0.085 ଏବଂ 0.051 g/120 ml dH2O ଥିଲା। Ls ବିହନ ଭୋଜନର ସଂସ୍ପର୍ଶରେ ଆସିଥିବା ପ୍ରାୟ ସମସ୍ତ ଲାର୍ଭା 72 ଘଣ୍ଟା ସଂସ୍ପର୍ଶରେ ଆସିବା ପରେ ମରିଯାଇଥିଲେ, ତେଣୁ ମୃତ୍ୟୁହାର ତଥ୍ୟ ପ୍ରୋବିଟ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ସହିତ ଅସଙ୍ଗତ ଥିଲା। ଅନ୍ୟ ବିହନ ଭୋଜନ ତୁଳନାରେ, ଲାର୍ଭା DFP ବିହନ ଭୋଜନ ଚିକିତ୍ସା ପ୍ରତି କମ୍ ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ଥିଲେ ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର LC50 ମୂଲ୍ୟ ପରିସଂଖ୍ୟାନଗତ ଭାବରେ ଅଧିକ ଥିଲା (ସାରଣୀ 2 ଏବଂ 3)। ୭୨ ଘଣ୍ଟା ପରେ, DFP, IG ଏବଂ PG ବିହନ ଭୋଜନ ଚିକିତ୍ସା ପାଇଁ LC50 ମୂଲ୍ୟ ଯଥାକ୍ରମେ 0.111, 0.085 ଏବଂ 0.05 g/120 ml dH2O ବୋଲି ଆକଳନ କରାଯାଇଥିଲା। ୭୨ ଘଣ୍ଟା ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ ପରେ, DFP, IG ଏବଂ PG ବିହନ ପାଉଡରର LC90 ମୂଲ୍ୟ ଯଥାକ୍ରମେ 0.215, 0.254 ଏବଂ 0.138 g/120 ml dH2O ଥିଲା। ୭୨ ଘଣ୍ଟା ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ ପରେ, 0.12 g/120 ml dH2O ସର୍ବାଧିକ ସାନ୍ଦ୍ରତାରେ DFP, IG ଏବଂ PG ବିହନ ଖାଦ୍ୟ ଚିକିତ୍ସା ପାଇଁ ହାରାହାରି ଲାର୍ଭା ମୃତ୍ୟୁହାର ଯଥାକ୍ରମେ ୫୮%, ୬୬% ଏବଂ ୯୬% ଥିଲା (ଚିତ୍ର ୧ଖ)। ୭୨ ଘଣ୍ଟା ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ ପରେ, PG ବିହନ ଖାଦ୍ୟ IG ଏବଂ DFP ବିହନ ଖାଦ୍ୟ ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ ବିଷାକ୍ତ ବୋଲି ଜଣାପଡିଲା।
ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ସ, ଆଲିଲ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ (AITC), ବେଞ୍ଜାଇଲ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ (BITC) ଏବଂ 4-ହାଇଡ୍ରୋକ୍ସିବେଞ୍ଜାଇଲିସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ (4-HBITC) ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଭାବରେ ମଶା ଲାର୍ଭାକୁ ହତ୍ୟା କରିପାରିବେ। ଚିକିତ୍ସା ପରେ 24 ଘଣ୍ଟାରେ, BITC ଲାର୍ଭା ପାଇଁ ଅଧିକ ବିଷାକ୍ତ ଥିଲା ଯାହାର LC50 ମୂଲ୍ୟ 5.29 ppm ଥିଲା, ଯାହା AITC ପାଇଁ 19.35 ppm ଏବଂ 4-HBITC ପାଇଁ 55.41 ppm ଥିଲା (ସାରଣୀ 4)। AITC ଏବଂ BITC ତୁଳନାରେ, 4-HBITC ର ବିଷାକ୍ତତା କମ୍ ଏବଂ LC50 ମୂଲ୍ୟ ଅଧିକ। ସବୁଠାରୁ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ବିହନ ଭୋଜନରେ ଦୁଇଟି ପ୍ରମୁଖ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ସ (Ls ଏବଂ PG) ର ମଶା ଲାର୍ଭା ବିଷାକ୍ତତାରେ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ଅଛି। AITC, BITC, ଏବଂ 4-HBITC ମଧ୍ୟରେ LC50 ମୂଲ୍ୟର ଘାତକ ଡୋଜ୍ ଅନୁପାତ ଉପରେ ଆଧାରିତ ବିଷାକ୍ତତା ଏକ ପରିସଂଖ୍ୟାନଗତ ପାର୍ଥକ୍ୟ ଦେଖାଇଥିଲା ଯେ LC50 ଘାତକ ଡୋଜ୍ ଅନୁପାତର 95% CI ରେ 1 ମୂଲ୍ୟ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ ହୋଇନଥିଲା (P = 0.05, ସାରଣୀ 4)। BITC ଏବଂ AITC ଉଭୟର ସର୍ବାଧିକ ସାନ୍ଦ୍ରତା ପରୀକ୍ଷିତ ଲାର୍ଭାର 100% ମାରିବା ପାଇଁ ଆକଳନ କରାଯାଇଥିଲା (ଚିତ୍ର 2)।
ଚିକିତ୍ସାର 24 ଘଣ୍ଟା ପରେ, ଇଜିପ୍ଟୀୟ ଲାର୍ଭା (3ୟ ଇନଷ୍ଟାର ଲାର୍ଭା) ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ ସାନ୍ଦ୍ରତାରେ ପହଞ୍ଚିଥିବା Ae. ର ଡୋଜ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା (ପ୍ରୋବିଟ୍) ରୁ ମୃତ୍ୟୁ କର୍ଭ ଆକଳନ କରାଯାଇଥିଲା। ବିନ୍ଦୁଯୁକ୍ତ ରେଖା ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ ଚିକିତ୍ସା ପାଇଁ LC50 କୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ। ବେଞ୍ଜାଇଲ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ BITC, ଆଲିଲ୍ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ AITC ଏବଂ 4-HBITC।
ମଶା ବାହକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏଜେଣ୍ଟ ଭାବରେ ଉଦ୍ଭିଦ ଜୈବକୀଟନାଶକର ବ୍ୟବହାର ବହୁ ଦିନ ଧରି ଅଧ୍ୟୟନ କରାଯାଇଛି। ଅନେକ ଉଦ୍ଭିଦ ପ୍ରାକୃତିକ ରାସାୟନିକ ପଦାର୍ଥ ଉତ୍ପାଦନ କରନ୍ତି ଯାହାର କୀଟନାଶକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ 37। ସେମାନଙ୍କର ଜୈବ ସକ୍ରିୟ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକ ମଶା ସମେତ କୀଟପତଙ୍ଗ ନିୟନ୍ତ୍ରଣରେ ମହାନ ସମ୍ଭାବନା ସହିତ କୃତ୍ରିମ କୀଟନାଶକର ଏକ ଆକର୍ଷଣୀୟ ବିକଳ୍ପ ପ୍ରଦାନ କରନ୍ତି।
ସୋରିଷ ଗଛଗୁଡ଼ିକୁ ସେମାନଙ୍କ ବିହନ ପାଇଁ ଏକ ଫସଲ ଭାବରେ ଚାଷ କରାଯାଏ, ଏହାକୁ ମସଲା ଏବଂ ତେଲର ଉତ୍ସ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଏ। ଯେତେବେଳେ ସୋରିଷ ତେଲ ବିହନରୁ ବାହାର କରାଯାଏ କିମ୍ବା ଯେତେବେଳେ ଜୈବ ଇନ୍ଧନ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ସୋରିଷ ବାହାର କରାଯାଏ, 69 ଉପ-ଉତ୍ପାଦ ହେଉଛି ଡିଫ୍ୟାଟେଡ୍ ବିହନ ମିଲ୍। ଏହି ବିହନ ମିଲ୍ ଏହାର ଅନେକ ପ୍ରାକୃତିକ ଜୈବ ରାସାୟନିକ ଉପାଦାନ ଏବଂ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଟିକ୍ ଏନଜାଇମକୁ ବଜାୟ ରଖେ। ଏହି ବିହନ ମିଲ୍ ର ବିଷାକ୍ତତା ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ସ 55,60,61 ଉତ୍ପାଦନକୁ ଦାୟୀ କରାଯାଇଛି। ବିହନ ମିଲ୍ 38,55,70 ର ଜଳୀୟକରଣ ସମୟରେ ଏନଜାଇମ ମାଇରୋସିନେଜ୍ ଦ୍ୱାରା ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସର ଜଳବିକରଣ ଦ୍ୱାରା ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ସ ଗଠିତ ହୁଏ ଏବଂ ଏଥିରେ କବକନାଶକ, ଜୀବାଣୁନାଶକ, ନେମାଟିସାଇଡାଲ୍ ଏବଂ କୀଟନାଶକ ପ୍ରଭାବ, ଏବଂ ରାସାୟନିକ ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ପ୍ରଭାବ ଏବଂ କେମୋଥେରାପିଉଟିକ୍ ଗୁଣ ସମେତ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଗୁଣ ରହିଛି ବୋଲି ଜଣାଯାଏ। ଅନେକ ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ସୋରିଷ ଗଛ ଏବଂ ବିହନ ମିଲ୍ ମାଟି ଏବଂ ସଂରକ୍ଷିତ ଖାଦ୍ୟ କୀଟପତଙ୍ଗ ବିରୁଦ୍ଧରେ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରେ57,59,71,72। ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ, ଆମେ ଚାରି-ବୀଜ ମିଲ୍ ଏବଂ ଏହାର ତିନୋଟି ଜୈବିକ ସକ୍ରିୟ ଉତ୍ପାଦ AITC, BITC, ଏବଂ 4-HBITC ର ଏଡିସ୍ ମଶା ଲାର୍ଭା ପାଇଁ ବିଷାକ୍ତତା ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିଛୁ। ଏଡିସ୍ ଏଜିପ୍ଟି। ମଶା ଲାର୍ଭା ଧାରଣ କରିଥିବା ପାଣିରେ ସିଧାସଳଖ ବିହନ ମିଲ୍ ମିଶାଇବା ଦ୍ୱାରା ଏଞ୍ଜାଇମାଟିକ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକୁ ସକ୍ରିୟ କରିବା ଆଶା କରାଯାଉଛି ଯାହା ମଶା ଲାର୍ଭା ପାଇଁ ବିଷାକ୍ତ ଆଇସୋଥାୟୋସାଇନେଟ୍ ଉତ୍ପାଦନ କରେ। ଏହି ଜୈବିକ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଆଂଶିକ ଭାବରେ ବିହନ ମିଲ୍ ର ଲାର୍ଭିସାଇଡାଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ ବାମନ ସୋରିଷ ବିହନ ମିଲ୍ ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ ଉତ୍ତାପ ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଇଥିବା ସମୟରେ କୀଟନାଶକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର କ୍ଷତି ଦ୍ୱାରା ପ୍ରଦର୍ଶନ କରାଯାଇଥିଲା। ଉତ୍ତାପ ଚିକିତ୍ସା ଦ୍ୱାରା ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ସକ୍ରିୟ କରୁଥିବା ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଟିକ୍ ଏନଜାଇମଗୁଡ଼ିକୁ ନଷ୍ଟ କରିବାର ଆଶା କରାଯାଉଛି, ଯାହା ଦ୍ଵାରା ବାୟୋସକ୍ରିୟ ଆଇସୋଥାୟୋସାଇନେଟ୍ ଗଠନକୁ ରୋକାଯାଏ। ଜଳୀୟ ପରିବେଶରେ ମଶା ବିରୁଦ୍ଧରେ ବନ୍ଧାକୋବି ବିହନ ପାଉଡରର କୀଟନାଶକ ଗୁଣକୁ ନିଶ୍ଚିତ କରିବା ପାଇଁ ଏହା ପ୍ରଥମ ଅଧ୍ୟୟନ।
ପରୀକ୍ଷିତ ବିହନ ପାଉଡର ମଧ୍ୟରୁ, ୱାଟରକ୍ରେସ୍ ବିହନ ପାଉଡର (Ls) ସବୁଠାରୁ ବିଷାକ୍ତ ଥିଲା, ଯାହା Aedes albopictus ର ଉଚ୍ଚ ମୃତ୍ୟୁହାର ଘଟାଇଥିଲା। Aedes aegypti ଲାର୍ଭାକୁ 24 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ନିରନ୍ତର ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ କରାଯାଇଥିଲା। ବାକି ତିନୋଟି ବିହନ ପାଉଡର (PG, IG ଏବଂ DFP) ର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଧୀର ଥିଲା ଏବଂ 72 ଘଣ୍ଟା ନିରନ୍ତର ଚିକିତ୍ସା ପରେ ମଧ୍ୟ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ମୃତ୍ୟୁହାର ଘଟାଇଥିଲା। କେବଳ Ls ବିହନ ପାଉଡରରେ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସ ଯଥେଷ୍ଟ ପରିମାଣରେ ଥିଲା, ଯେତେବେଳେ PG ଏବଂ DFP ରେ ମାଇରୋସିନେଜ୍ ଏବଂ IG ରେ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ପ୍ରମୁଖ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ଭାବରେ ଥିଲା (ସାରଣୀ 1)। ଗ୍ଲୁକୋଟ୍ରୋପାଓଲିନ୍ କୁ BITC ରେ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜ୍ କରାଯାଇଛି ଏବଂ ସିନାଲବାଇନ୍ କୁ 4-HBITC61,62 ରେ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜ୍ କରାଯାଇଛି। ଆମର ବାୟୋଏସେ ଫଳାଫଳ ସୂଚାଇ ଦିଏ ଯେ Ls ବିହନ ପାଉଡର ଏବଂ ସିନ୍ଥେଟିକ୍ BITC ଉଭୟ ମଶା ଲାର୍ଭା ପାଇଁ ଅତ୍ୟନ୍ତ ବିଷାକ୍ତ। PG ଏବଂ DFP ବିହନ ପାଉଡରର ମୁଖ୍ୟ ଉପାଦାନ ହେଉଛି myrosinase glucosinolate, ଯାହା AITC ରେ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜ୍ କରାଯାଇଛି। AITC 19.35 ppm ର LC50 ମୂଲ୍ୟ ସହିତ ମଶା ଲାର୍ଭାକୁ ମାରିବାରେ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ। AITC ଏବଂ BITC ତୁଳନାରେ, 4-HBITC ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ ଲାର୍ଭା ପାଇଁ ସବୁଠାରୁ କମ୍ ବିଷାକ୍ତ। ଯଦିଓ AITC BITC ତୁଳନାରେ କମ୍ ବିଷାକ୍ତ, ସେମାନଙ୍କର LC50 ମୂଲ୍ୟ ମଶା ଲାର୍ଭା ଉପରେ ପରୀକ୍ଷିତ ଅନେକ ଅତ୍ୟାବଶ୍ୟକ ତେଲ ଅପେକ୍ଷା କମ୍ 32,73,74,75।
ମଶା ଲାର୍ଭା ବିରୁଦ୍ଧରେ ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ଆମର କ୍ରୁସିଫେରସ୍ ବିହନ ପାଉଡରରେ ଗୋଟିଏ ପ୍ରମୁଖ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ଥାଏ, ଯାହା HPLC ଦ୍ୱାରା ନିର୍ଣ୍ଣିତ ମୋଟ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍‌ର 98-99% ରୁ ଅଧିକ ହୋଇଥାଏ। ଅନ୍ୟ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍‌ର ପରିମାଣ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିଲା, କିନ୍ତୁ ସେମାନଙ୍କର ସ୍ତର ମୋଟ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍‌ର 0.3% ରୁ କମ୍ ଥିଲା। ୱାଟରକ୍ରେସ୍ (L. sativum) ବିହନ ପାଉଡରରେ ଦ୍ୱିତୀୟ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ (ସିନିଗ୍ରୀନ୍) ଥାଏ, କିନ୍ତୁ ସେମାନଙ୍କର ଅନୁପାତ ମୋଟ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍‌ର 1% ଅଟେ, ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର ବିଷୟବସ୍ତୁ ଏପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ନଗଣ୍ୟ (ପ୍ରାୟ 0.4 mg/g ବିହନ ପାଉଡର)। ଯଦିଓ PG ଏବଂ DFP ସମାନ ମୁଖ୍ୟ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ (ମାଇରୋସିନ୍) ଧାରଣ କରିଥାଏ, ସେମାନଙ୍କର LC50 ମୂଲ୍ୟ ଯୋଗୁଁ ସେମାନଙ୍କର ବିହନ ଖାଦ୍ୟର ଲାର୍ଭିସାଇଡାଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଯଥେଷ୍ଟ ଭିନ୍ନ ହୋଇଥାଏ। ପାଉଡର ମିଲଡ୍ୟୁ ପାଇଁ ବିଷାକ୍ତତାରେ ଭିନ୍ନ। ଏଡିସ୍ ଏଜିପ୍ଟି ଲାର୍ଭାର ଆବିର୍ଭାବ ମାଇରୋସିନେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ କିମ୍ବା ଦୁଇଟି ବିହନ ଫିଡ୍ ମଧ୍ୟରେ ସ୍ଥିରତାରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ ହେତୁ ହୋଇପାରେ। ବ୍ରାସିକାସି ଗଛରେ ଆଇସୋଥିଓସାଇନାଟ୍ସ ଭଳି ଜଳବିଜ୍ଞାନ ଉତ୍ପାଦର ଜୈବ ଉପଲବ୍ଧତାରେ ମାଇରୋସିନେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରେ76। ପୋକକ୍ ଏଟ୍ ଅଲ୍.77 ଏବଂ ୱିଲକିନସନ୍ ଏଟ୍ ଅଲ୍.78 ଦ୍ୱାରା ପୂର୍ବ ରିପୋର୍ଟଗୁଡ଼ିକ ଦର୍ଶାଇଛି ଯେ ମାଇରୋସିନେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ ସ୍ଥିରତାରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ ମଧ୍ୟ ଜେନେଟିକ୍ ଏବଂ ପରିବେଶଗତ କାରଣ ସହିତ ଜଡିତ ହୋଇପାରେ।
ପ୍ରତ୍ୟେକ ବିହନ ଭୋଜନର LC50 ମୂଲ୍ୟ ଉପରେ ଆଧାର କରି ଆଶାକରାଯାଇଥିବା ଜୈବ ସକ୍ରିୟ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ ପରିମାଣ 24 ଏବଂ 72 ଘଣ୍ଟା (ସାରଣୀ 5) ରେ ଅନୁରୂପ ରାସାୟନିକ ପ୍ରୟୋଗ ସହିତ ତୁଳନା କରାଯାଇଥିଲା। 24 ଘଣ୍ଟା ପରେ, ବିହନ ଭୋଜନରେ ଥିବା ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ ଗୁଡିକ ଶୁଦ୍ଧ ଯୌଗିକ ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ ବିଷାକ୍ତ ଥିଲା। ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ ବିହନ ଚିକିତ୍ସାର ପ୍ରତି ମିଲିୟନ (ppm) ଅଂଶ ଉପରେ ଆଧାର କରି ଗଣନା କରାଯାଇଥିବା LC50 ମୂଲ୍ୟ BITC, AITC, ଏବଂ 4-HBITC ପ୍ରୟୋଗ ପାଇଁ LC50 ମୂଲ୍ୟ ଅପେକ୍ଷା କମ୍ ଥିଲା। ଆମେ ଲାର୍ଭା ବିହନ ଭୋଜନ ପେଲେଟ୍ (ଚିତ୍ର 3A) ଗ୍ରହଣ କରୁଥିବା ଦେଖିଲୁ। ଫଳସ୍ୱରୂପ, ଲାର୍ଭା ବିହନ ଭୋଜନ ପେଲେଟ୍ ଖାଇ ବିଷାକ୍ତ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ ପ୍ରତି ଅଧିକ ଘନୀଭୂତ ସଂସ୍ପର୍ଶ ପାଇପାରେ। ଏହା 24-ଘଣ୍ଟା ଏକ୍ସପୋଜରରେ IG ଏବଂ PG ବିହନ ଭୋଜନ ଚିକିତ୍ସାରେ ସର୍ବାଧିକ ସ୍ପଷ୍ଟ ଥିଲା, ଯେଉଁଠାରେ LC50 ସାନ୍ଦ୍ରତା ଶୁଦ୍ଧ AITC ଏବଂ 4-HBITC ଚିକିତ୍ସା ଅପେକ୍ଷା ଯଥାକ୍ରମେ 75% ଏବଂ 72% କମ୍ ଥିଲା। Ls ଏବଂ DFP ଚିକିତ୍ସା ଶୁଦ୍ଧ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ ବିଷାକ୍ତ ଥିଲା, LC50 ମୂଲ୍ୟ ଯଥାକ୍ରମେ 24% ଏବଂ 41% କମ୍ ଥିଲା। ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଚିକିତ୍ସାରେ ଲାର୍ଭା ସଫଳତାର ସହିତ ପ୍ୟୁପେଟ୍ ହୋଇଥିଲା (ଚିତ୍ର 3B), ଯେତେବେଳେ ବିହନ ଭୋଜନ ଚିକିତ୍ସାରେ ଅଧିକାଂଶ ଲାର୍ଭା ପ୍ୟୁପେଟ୍ ହୋଇନଥିଲା ଏବଂ ଲାର୍ଭା ବିକାଶ ଯଥେଷ୍ଟ ବିଳମ୍ବ ହୋଇଥିଲା (ଚିତ୍ର 3B,D)। ସ୍ପୋଡୋପ୍ଟେରାଲିଟୁରାରେ, ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ ବୃଦ୍ଧି ମନ୍ଥରତା ଏବଂ ବିକାଶଗତ ବିଳମ୍ବ ସହିତ ଜଡିତ 79।
Ae. Aedes aegypti ମଶାର ଲାର୍ଭାକୁ 24-72 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ବ୍ରାସିକା ବିହନ ପାଉଡର ସହିତ ନିରନ୍ତର ସଂସ୍ପର୍ଶରେ ରଖାଯାଇଥିଲା। (A) ମୁଖଭାଗରେ ବିହନ ମିଲ୍‌ର କଣିକା ସହିତ ମୃତ ଲାର୍ଭା (ଗୋଲାକାର); (B) ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଚିକିତ୍ସା (ବିହନ ମିଲ୍‌ ବିନା dH20) ଦର୍ଶାଏ ଯେ ଲାର୍ଭା ସାଧାରଣ ଭାବରେ ବଢ଼େ ଏବଂ 72 ଘଣ୍ଟା ପରେ ପ୍ୟୁପେଟ୍‌ ହେବା ଆରମ୍ଭ କରେ (C, D) ବିହନ ମିଲ୍‌ ସହିତ ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଇଥିବା ଲାର୍ଭା; ବିହନ ମିଲ୍‌ ବିକାଶରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ ଦେଖାଇଥିଲା ଏବଂ ପ୍ୟୁପେଟ୍‌ ହୋଇନଥିଲା।
ଆମେ ମଶା ଲାର୍ଭା ଉପରେ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ସର ବିଷାକ୍ତ ପ୍ରଭାବର କ୍ରିୟାବିଧି ଅଧ୍ୟୟନ କରିନାହୁଁ। ତଥାପି, ଲାଲ ଅଗ୍ନି ପିମ୍ପୁଡ଼ି (ସୋଲେନୋପ୍ସିସ୍ ଇନଭିକ୍ଟା) ଉପରେ ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ଗ୍ଲୁଟାଥିଓନ୍ S-ଟ୍ରାନ୍ସଫରେଜ୍ (GST) ଏବଂ ଏଷ୍ଟେରେଜ୍ (EST) ର ନିରୋଧ ହେଉଛି ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ ଜୈବ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର ମୁଖ୍ୟ କ୍ରିୟାବିଧି, ଏବଂ AITC, କମ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପରେ ମଧ୍ୟ, GST କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ନିରୋଧ କରିପାରିବ। କମ ସାନ୍ଦ୍ରତାରେ ଲାଲ ଆମଦାନୀ ହୋଇଥିବା ଅଗ୍ନି ପିମ୍ପୁଡ଼ି। ଡୋଜ୍ ହେଉଛି 0.5 µg/ml80। ବିପରୀତରେ, AITC ବୟସ୍କ ମକା ୱିଭିଲ୍ସ (ସିଟୋଫିଲସ୍ ଜେମାଇସ୍)81 ରେ ଆସିଟେଲକୋଲିନେଷ୍ଟେରେଜ୍ କୁ ନିରୋଧ କରେ। ମଶା ଲାର୍ଭାରେ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର କ୍ରିୟାବିଧିକୁ ସ୍ପଷ୍ଟ କରିବା ପାଇଁ ସମାନ ଅଧ୍ୟୟନ କରାଯିବା ଆବଶ୍ୟକ।
ସୋରିଷ ବିହନ ଭୋଜନ ଦ୍ୱାରା ମଶା ଲାର୍ଭା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପାଇଁ ଉଦ୍ଭିଦ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସର ହାଇଡ୍ରୋଲିସିସ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଶୀଳ ଆଇସୋଥିଓସାଇନାଟ୍ସ ଗଠନ ପାଇଁ ଏକ ଯନ୍ତ୍ର ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରେ ବୋଲି ପ୍ରସ୍ତାବକୁ ସମର୍ଥନ କରିବା ପାଇଁ ଆମେ ତାପ-ନିଷ୍କ୍ରିୟ DFP ଚିକିତ୍ସା ବ୍ୟବହାର କରୁ। ପରୀକ୍ଷିତ ପ୍ରୟୋଗ ହାରରେ DFP-HT ବିହନ ଭୋଜନ ବିଷାକ୍ତ ନଥିଲା। ଲାଫାର୍ଗା ଏବଂ ଅନ୍ୟମାନେ 82 ରିପୋର୍ଟ କରିଛନ୍ତି ଯେ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସ ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରାରେ ଅବନତି ପ୍ରତି ସମ୍ବେଦନଶୀଳ। ଉତ୍ତାପ ଚିକିତ୍ସା ବିହନ ଭୋଜନରେ ମାଇରୋସିନେଜ୍ ଏନଜାଇମକୁ ବିକୃତ କରିବ ଏବଂ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଶୀଳ ଆଇସୋଥିଓସାଇନାଟ୍ସ ଗଠନ ପାଇଁ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ସର ହାଇଡ୍ରୋଲିସିସ୍କୁ ରୋକିବା ପାଇଁ ମଧ୍ୟ ଆଶା କରାଯାଉଛି। ଏହା ଓକୁନାଡେ ଏବଂ ଅନ୍ୟମାନେ ମଧ୍ୟ ନିଶ୍ଚିତ କରିଥିଲେ। 75 ଦେଖାଇଥିଲେ ଯେ ମାଇରୋସିନେଜ୍ ତାପମାତ୍ରା ସମ୍ବେଦନଶୀଳ, ଦର୍ଶାଉଛି ଯେ ସୋରିଷ, କଳା ସୋରିଷ ଏବଂ ରକ୍ତମୁଖା ବିହନ 80° ସେଲସିୟସ୍ ଉପରେ ତାପମାତ୍ରାରେ ପ୍ରକାଶିତ ହେଲେ ମାଇରୋସିନେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ନିଷ୍କ୍ରିୟ ହୋଇଯାଇଥିଲା। ଏହି ଯନ୍ତ୍ରଗୁଡ଼ିକ ଉତ୍ତାପ-ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଇଥିବା DFP ବିହନ ଭୋଜନର କୀଟନାଶକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ହରାଇପାରେ।
ତେଣୁ, ସୋରିଷ ବିହନ ଖାଦ୍ୟ ଏବଂ ଏହାର ତିନୋଟି ପ୍ରମୁଖ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ ମଶା ଲାର୍ଭା ପାଇଁ ବିଷାକ୍ତ। ବିହନ ଖାଦ୍ୟ ଏବଂ ରାସାୟନିକ ଚିକିତ୍ସା ମଧ୍ୟରେ ଏହି ପାର୍ଥକ୍ୟକୁ ଦୃଷ୍ଟିରେ ରଖି, ବିହନ ଖାଦ୍ୟର ବ୍ୟବହାର ମଶା ନିୟନ୍ତ୍ରଣର ଏକ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ପଦ୍ଧତି ହୋଇପାରେ। ବିହନ ପାଉଡର ବ୍ୟବହାରର ପ୍ରଭାବ ଏବଂ ସ୍ଥିରତାକୁ ଉନ୍ନତ କରିବା ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ ଫର୍ମୁଲେସନ୍ ଏବଂ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ବିତରଣ ବ୍ୟବସ୍ଥା ଚିହ୍ନଟ କରିବାର ଆବଶ୍ୟକତା ଅଛି। ଆମର ଫଳାଫଳଗୁଡ଼ିକ କୃତ୍ରିମ କୀଟନାଶକର ବିକଳ୍ପ ଭାବରେ ସୋରିଷ ବିହନ ଖାଦ୍ୟର ସମ୍ଭାବ୍ୟ ବ୍ୟବହାରକୁ ସୂଚିତ କରେ। ଏହି ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା ମଶା ବାହକମାନଙ୍କୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ ଏକ ଅଭିନବ ଉପକରଣ ହୋଇପାରେ। ଯେହେତୁ ମଶା ଲାର୍ଭା ଜଳୀୟ ପରିବେଶରେ ବଢ଼ନ୍ତି ଏବଂ ବିହନ ଖାଦ୍ୟ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ଜଳୀୟକରଣ ପରେ ଏନଜାଇମାଟିକ୍ ଭାବରେ ସକ୍ରିୟ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ସରେ ରୂପାନ୍ତରିତ ହୁଏ, ମଶା-ଅଧିଭୂତ ପାଣିରେ ସୋରିଷ ବିହନ ଖାଦ୍ୟର ବ୍ୟବହାର ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ସମ୍ଭାବନା ପ୍ରଦାନ କରେ। ଯଦିଓ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ସର ଲାର୍ଭିସାଇଡାଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଭିନ୍ନ ହୁଏ (BITC > AITC > 4-HBITC), ବିହନ ଖାଦ୍ୟକୁ ଏକାଧିକ ଗ୍ଲୁକୋସିନୋଲେଟ୍ ସହିତ ମିଶ୍ରଣ କରିବା ଦ୍ଵାରା ବିଷାକ୍ତତା ବୃଦ୍ଧି ହୁଏ କି ନାହିଁ ତାହା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ପାଇଁ ଅଧିକ ଗବେଷଣା ଆବଶ୍ୟକ। ଡିଫ୍ୟାଟେଡ୍ କ୍ରୁସିଫେରସ୍ ବିହନ ଖାଦ୍ୟ ଏବଂ ତିନୋଟି ଜୈବ ସକ୍ରିୟ ଆଇସୋଥିଓସାଇନେଟ୍ସର କୀଟନାଶକ ପ୍ରଭାବକୁ ମଶାଙ୍କ ଉପରେ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିବା ପାଇଁ ଏହା ପ୍ରଥମ ଅଧ୍ୟୟନ। ଏହି ଅଧ୍ୟୟନର ଫଳାଫଳଗୁଡ଼ିକ ନୂତନ ଭୂମି ସୃଷ୍ଟି କରେ ଯାହା ଦର୍ଶାଏ ଯେ ବିହନରୁ ତେଲ ନିଷ୍କାସନର ଏକ ଉପ-ଉତ୍ପାଦ, ଡିଫ୍ୟାଟେଡ୍ ବନ୍ଧାକୋବି ବିହନ ମିଲ୍, ମଶା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରତିଶ୍ରୁତିପୂର୍ଣ୍ଣ ଲାର୍ଭିସାଇଡାଲ୍ ଏଜେଣ୍ଟ ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରିପାରେ। ଏହି ସୂଚନା ଉଦ୍ଭିଦ ଜୈବ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏଜେଣ୍ଟଗୁଡ଼ିକର ଆବିଷ୍କାର ଏବଂ ଶସ୍ତା, ବ୍ୟବହାରିକ ଏବଂ ପରିବେଶ ଅନୁକୂଳ ଜୈବ କୀଟନାଶକ ଭାବରେ ସେମାନଙ୍କର ବିକାଶକୁ ଆଗକୁ ବଢ଼ାଇବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିପାରିବ।
ଏହି ଅଧ୍ୟୟନ ପାଇଁ ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା ଡାଟାସେଟ୍ ଏବଂ ଫଳସ୍ୱରୂପ ବିଶ୍ଳେଷଣଗୁଡ଼ିକ ସମ୍ପୃକ୍ତ ଲେଖକଙ୍କ ଠାରୁ ଯୁକ୍ତିଯୁକ୍ତ ଅନୁରୋଧରେ ଉପଲବ୍ଧ। ଅଧ୍ୟୟନ ଶେଷରେ, ଅଧ୍ୟୟନରେ ବ୍ୟବହୃତ ସମସ୍ତ ସାମଗ୍ରୀ (କୀଟପତଙ୍ଗ ଏବଂ ବିହନ ଭୋଜନ) ନଷ୍ଟ କରାଯାଇଥିଲା।